新生儿输血获得性巨细胞病毒感染的前瞻性研究

刘红玲　劳富娟

摘要：目的 探讨输血获得性巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染在新生儿重症监护病房（neonatal intensive care unit，NICU）中的发生率，提出预防措施。方法 第一阶段收集我院NICU 114例其母为CMV-抗体阴性的接受输血的新生儿。第二阶段，另外检测了28例其母为CMV抗体阳性或阴性的、出生体重<1250g的接受新生儿。所有的142例新生儿均在最后一次输血后的第6～12w每周1次和每月1次做病毒培养。结果 142例研究对象中126例（126/142，88.7%）新生儿血清CMV抗体阴性，16例（16/142，11.3%）新生儿血清CMV抗体阳性发生了CMV感染。结论 新生儿输血获得性CMV感染发生率和死亡率高。建议新生儿，尤其是低出生体重儿给予血清CMV-特异性抗体阴性、少白细胞的成分输血（红细胞、血小板及血浆），不能输注白细胞。

关键词：输血获得性巨细胞病毒感染；新生儿；低出生体重儿

输血被认为是新生儿CMV感染的一种来源。其母亲为CMV血清抗体阴性低出生体重儿或接受多次输血的新生儿是输血获得性CMV感染的最高危人群。新生儿输血获得性CMV感染高发生率及高死亡率使得各医疗机构的输血科意识到预防其发生的重要性。尽管使用冰冻去甘油化血液及其制品，或CMV抗体阴性的血液及其制品可以有效防止输血获得性CMV感染的传播，但其成本昂贵。

本研究的目的是证明输血获得性CMV感染在NICU中的发生率，从而介绍有效可行的方法来预防这一输血并发症。

1 资料与方法

1.1一般资料 本研究分2个阶段。第一阶段，选取从2013年10月～2014年6月入住我院NICU的新生儿（包括正常出生体重儿和低出生体重儿），我们使用酶联免疫吸附试验检测母体、脐带或新生儿血清的CMV-特异性IgG抗体。选取了114例其母亲血清CMV-IgG抗体阴性的输过血的新生儿作为研究对象。所有受试新生儿的父母签署输血知情同意书及本研究知情同意书。由于CMV感染的阳性率很低，第二阶段，我们选取了28例出生体重<1250g早产儿（包括其母血清CMV抗体阳性及阴性的早产儿）作为研究对象。所有的研究对象仅给予母乳喂养或经过消毒的配方乳喂养。母亲血清CMV-抗体阳性，母乳需经过病毒灭活（加热）再喂给新生儿。

1.2病毒培养 每个研究对象从最后一次输血开始6～12w，每周取尿标本做病毒培养，每月取咽拭子标本做病毒培养，每月取血清标本做病毒培养。尿标本和咽拭子标本在单层人胚胎肺细胞及含有2%的牛血清培养基上接种并复制。每2w检测一次培养基上的由CMV所产生的典型的细胞病变效应。

1.3血清学检查 备好CMV及其对照抗原将其置于试管中。然后用0.1ml碳酸盐缓冲液稀释0.05mlCMV及其对照抗原使其为pH 9.6，含有0.02% NaN3将其置于37℃环境中4h，然后用0.5%的盐水冲洗3次。加入0.05ml牛血清，使其为pH7.2，含有0.5%牛血清白蛋白（bovine serum albumin， BSA），0.02NaN3。置于37℃环境中30min，去除过量的抗体。

用酶联免疫吸附试验测定血清CMV-特异性IgG。如果以前血清CMV-特异性IgG阴性，本次检测阳性的新生儿，再次取血清标本检测来排除假阳性。如果CMV-IgG阳性同时也检测血清CMV-特异性IgM。

1.4备血及血液制品 所有的血液制品来源于潍坊市中心血站自愿献血者。红细胞来源于Rh血型供血者与受血者相同的O型新鲜血液（6d之内的血液）。新鲜冰冻血浆来源于Rh血型供血者与受血者相同的AB型新鲜血液。血小板不需特殊准备。所有研究对象均没有输注白细胞制剂。

2 结果

第一阶段，54例为其母亲为血清CMV-特异性抗体阴性的新生儿（54/114，47.1%）。64例新生儿（64/114，56.1%）父母完成了随访。30例新生儿（37/114，32.5%）在出院后失访，没有完成其后的标本采集及CMV-特异性抗体的检测，无法获知是否因为输血而导致输血获得性CMV感染。13例（13/114，11.4%）在新生儿期死亡。我们排除了失访和死亡研究对象。12例低出生体重儿（<1250g）且输注CMV-特异性抗体阴性血液的新生儿没有参与本研究。红细胞制剂供血者：均数（9.7±8.6），范围1～24人。血浆供血者：均数（6.5±9.3），范围0～32人。第二阶段，另外28例新生儿全部完成随访，其中12例（12/28，42.9%）其母亲血清CMV-特异性抗体阴性，16例（16/28，57.1%）其母亲血清CMV-特异性抗体阳性。在所有供血者中42.5%（296/696）其血清CMV-特异性抗体阳性。

仅2例新生儿发生了CMV感染，2例新生儿血标本中的IgM均对CMV发生反应，其中1例其母亲为血清CMV-特异性抗体阴性，1例其母亲为血清CMV-特异性抗体阳性。接受1单位CMV感染的成分输血，新生儿（其母为血清CMV-特异性抗体阴性）发生获得性CMV感染的几率约为0.16%；接受CMV-特异性抗体阳性的成分输血，发生获得性CMV感染的几率约为0.37%。本研究中新生儿一般情况及输血性获得性CMV感染的发生率见表1。

本研究的第一阶段有1例输血获得性CMV感染的新生儿，出生体重1110g，孕龄30w，其母为血清CMV-特异性抗体阴性。此新生儿病情复杂患有坏死性小肠结肠炎，手术切除了狭窄的乙状结肠。在生后的11w出现CMV感染症状，表现为肝脏肿大、黄疸、肝功能明显受损。此新生儿先后接受了红细胞成分输血（来源于15位供血者）和血浆输注（来源于12位供血者），其中，7位红细胞供血者及6位血浆供血者血清CMV-特异性抗体阳性。

本研究的第二阶段13例其母为血清CMV-特异性抗体阳性的新生儿中有1例发生了输血获得性CMV感染。此例新生儿出生体重890g，孕龄27w，剖腹产儿，生后没有母乳喂养。可以排除母婴传播性CMV感染。在其住院期间，由于坏死性小肠结肠炎而手术切除了一段小肠，还患有支气管肺发育不良及持续胎儿循环。在生后8w时出现CMV感染表现，以呼吸道和消化道症状为主，气促、发绀、间质性肺炎表现，黄疸、肝脾肿大等。本患儿在生后10w死亡。此患儿在接受过红细胞成分输血（来源于20位供血者）、血小板成分输血（来源于30位供血者）和血浆输注（来源于30位供血者）。其中，9位红细胞供血者、13位血小板供血者和18位血浆供血者血清CMV-特异性抗体阳性。

本研究显示新生儿（其母血清CMV-特异性抗体阳性）输血获得性CMV感染发生率明显低于Yeager[1] and Adler[2]的研究。Alder等的研究发现约24%（7/29）其母血清CMV-特异性抗体阴性的低出生体重儿（<1250g）发生输血获得性CMV感染。而本研究中一般情况均衡科比的新生儿输血获得性CMV感染发生率仅为2.4%（1/41），两组比较（P<0.01，χ2检验）。Yeager等研究显示约24%（10/41）血清CMV-特异性抗体阴性的新生儿接受>1次红细胞成分输血或>50ml的全血就有可能发生输血获得性CMV感染，而本研究显示仅1.4%（1/62）的发生率，两组比较，差异有明显统计统计学意义（P<0.001，χ2检验）。

3 结论

尽管本研究中输血获得性CMV感染的发生率与Yeager和Adler的研究比较差异有显著统计学意义。另外3项研究显示输血获得性CMV感染发生率有明显的地区差异。Lamberson等[3]研究报道：其母为血清CMV-特异性抗体阴性的低出生体重儿输血获得性CMV感染的发生率为1.8%（7/386）。Smith等[4]报道：其母为血清CMV-特异性抗体阴性的低出生体重儿（<1250g）输血获得性CMV感染的发生率为8.7%（2/23）。Bayer等[5]报道：其母为血清CMV-特异性抗体阴性的低出生体重儿（<1500g）输血获得性CMV感染的发生率为6.9%（2/29）。

输血获得性CMV感染的发生率各报道有较大差异的原因不是很明确。本研究中供血者血清CMV-抗体阳性率为42.5%，Yeager等的研究中为45.3%，Alder等的研究中为34%。在所有研究中供血者的年龄差异没有统计学意义。

有关研究证明血清CMV-特异性IgM阳性的供血者（提示近期有CMV感染）传染性较强。是否所有血清CMV抗体阳性的血细胞成分输血供血者均能传播CMV感染不明确。接受血清CMV-特异性抗体阳性血液次数和数量的多少可能是导致输血获得性CMV感染的关键因素。如果一个新生儿在短时间需要接受多次红细胞成分输血或较多单位的成分输血，输血获得性CMV感染发生的危险性较高。在本研究中很少有新生儿接受同一个供血者的血液或血液制品。仅30例血清CMV-特异性抗体阴性的新生儿在整个治疗过程中接受>50ml 血清CMV特异性抗体阳性血液，而且治疗过程持续数月之久。2例发生输血获得性获得性CMV感染的新生儿均在生后的一个月内接受>50ml的血清CMV抗体阳性的输血。

输血获得性CMV感染与所输注的成分输血的血液成分相关联性强。血清CMV抗体阴性的血液或去白细胞的血液成分输注大大减少输血获得性CMV感染的发生率。

D.G.NJERU等[6]研究报道，供血者中血清CMV-IgG和IgM阳性率分别为97.0%和3.6%。女性阳性率要高于男性。因此，许多学者建议女性在受孕前要检测血清CMV特异性抗体，在受孕前清除体内的CMV，以防母婴传播。由于供血者CMV-特异性抗体的高阳性率，实际上几乎所有的供血者均有可能暴露于CMV。即使血清CMV-抗体阳性的感染者，CMV也会在白细胞内处于休眠状态。因此，减少或去除白细胞的成分输血会减少输血获得性CMV感染的发生。对于高危人群，包括低出生体重儿、艾滋病患者、放化疗所致骨髓移植的肿瘤患者及肾移植患者要输注血清CMV-特异性抗体阴性、少白细胞的成分输血（红细胞、血小板及血浆），不能输注白细胞。

参考文献：

[1]Yeager AS， Grumet FC， Hafleigh EB， et al. Prevention of transfusion-acquired cytomegalovirus infections in newborn infants[J].J Pediatrics，2008，108：287-287.

[2]Adler SP， Chandrika T， Lawrence L， et al. Cytomegalovirus infections in neonates acquired by blood transfusions[J].Pediatric Infectious Disease Journal，2003，22：114-118.

[3]Lamberson H， McMillan J， Weiner L， et al. Nursery acquired cytomegalovirus （CMV） infection[J].Tranfusion，2003，29：418.

[4]Simth D， Wright P， Estes W， et al. Posttransfusion cytomegalovirus （PTCMV） infection in neonates weighting less than 1250 grams[J].Transfusion，2004，29：430.

[5]Bayer WL， Buckley SE，Jenkins DC， et al.Acquired cytomegalovirus infections in transfused， premature neonates[J].Blood，2003，74：（suppl 1）：232.

[6]D.G.NJERU， W.O.MWANDA， G.W.KITONYI. Prevalence of Cytomegalovirus Antibodies in Blood Donors at the National Blood Transfusion Center[J].East African Medical Journal，2009，9：（Suppl）：S58.

编辑/赵恒德