菌草栽培赤芝培养基配方筛选

王锦锋，林占熺

(1.福建农林大学园艺学院，福建福州 350002；2.国家菌草工程技术研究中心，福建福州 350002)

菌草栽培赤芝培养基配方筛选

王锦锋1,2，林占熺2*

(1.福建农林大学园艺学院，福建福州 350002；2.国家菌草工程技术研究中心，福建福州 350002)

[目的]筛选合适的菌草栽培赤芝培养基配方。[方法]采用试管法对6种菌草、2种辅料进行配方筛选优化。对筛选配方中菌丝和子实体生长状况进行观察。[结果]适合菌草栽培Ga0801(赤芝)的 配方是1号(78%芒萁+20%麸皮+2%石膏)、2号(78%五节芒+20%麸皮+2%石膏)、6号(78%绿洲1号+20%麸皮+2%石膏)和10号(30%芒萁+48%类芦+20%麸皮+2%石膏)配方，其中6号配方最优，该配方菌丝生长旺盛，原基形成时间早，子实体壮实，生物转化率高。[结论]该试验为菌草栽培赤芝的大规模市场栽培提供了科学依据。

菌草；灵芝；培养基；配方

灵芝(GanodermaLucidum)属担子菌纲多孔菌目多孔菌科灵芝属[1]，是我国著名的药用菌。随着野生数量的日益减少，灵芝人工栽培技术已成为当前的研究重点[2-3]。传统的椴木栽培对森林损耗非常大，考虑到环保和节约资源，灵芝的生产已由传统的椴木栽培逐渐转向代料栽培，而现今普遍用于栽培食用菌的棉籽壳农药残留过高或重金属超标[4-5]，不符合绿色食品的要求且影响出口，制约了灵芝产业的发展。为了解决“菌林矛盾”这一问题，该试验采用林占熺等[6-7]发明的菌草技术来栽培赤芝。已筛选出的可用于人工栽培食药用菌的菌草多达46种，已筛选出适合菌草栽培的主要菌类品种有55种[8-10]。现在用于栽培灵芝的菌草主要是五节芒和芒萁，其他菌草栽培灵芝鲜见报道，因此关于其他菌草栽培培养基配方的筛选就显得极为重要。笔者根据灵芝对培养基的营养要求并结合前人总结的经验[11]，设计筛选方案并确定最佳菌草栽培赤芝的培养基配方，以期为其大规模市场栽培提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌。供试材料为芒萁、五节芒、象草、巨菌草、类芦和绿洲1号。供试菌株Ga0801(赤芝)由福建农林大学菌草所提供。

1.1.2 仪器。SW-CJ-1F型超净工作台购于苏州集团苏州安泰技术有限公司。Blue pard生化培养箱购于上海一恒科学仪器有限公司。分析天平、立式灭菌锅购于山东新华医疗器械股份有限公司。

1.2 方法 试验于2015年在福建农林大学菌草研究所进行。菌草配方见表1。其中7号配方为已用于市场栽培的配方，此试验中作为对照(CK)。

参照表1配制的16个配方，含水量控制在65%左右，拌料后装入22 cm×19 cm试管，每支试管装干料10 g，每个配方设5个重复，每个重复3支。放入立式高压锅中121 ℃灭菌2 h，冷却至室温接种，接种时利用打孔器接种，保证接种的菌块大小相同。接完种将试管放入25 ℃恒温培养箱培养。每3 d划线1次，测定菌丝生长速度，记录菌丝体长势及原基形成时间。原基形成后，将试管移入温度28 ℃、湿度85%的人工气候室中培养，观察并记录子实体生长情况。

1.3 数据处理 利用SPSS 20软件对菌丝生长速度进行单因素试验统计分析。

2 结果与分析

2.1 培养基配方筛选 由表2可见，1号、2号、6号、10号配方与7号配方之间差异不显著，菌丝生长旺盛，其中2号配方菌丝日均长速最大，生长最快。15号、3号、13号、14号、9号、12号、5号、11号、4号配方与7号配方之间存在显著性差异，4号配方菌丝根本不吃料。6号配方与7号配方原基形成时间相同，为25 d，其他配方原基形成时间均大于25 d，但1号配方晚1 d，2号和10号配方晚2 d，与7号配方差异不明显。其他配方均比7号配方晚至少3 d，差异较明显，其中3号、4号及12号配方不形成原基。在生物转化率方面，1号、2号、5号、6号、10号、11号、15号及16号配方生物转化率均大于7号配方，其中6号配方生物转化率最高，达52.78%。综合分析显示，1号、2号、6号和10号配方比较适合用于栽培，可进行下一步研究。

2.2 筛选配方中菌丝和子实体生长状况 由图1可知，对于Ga0801菌株，各配方表现都很好，菌丝浓密且白。不同配方栽培的菌株子实体生长状况是有区别的(图2)，成熟后都会产生孢子粉。

表1 菌草的培养基配方

表2 菌草培养基配方筛选结果(n=5)

注：同列不同小写字母表示在0.05水平差异显著，同列不同大写字母表示在0.01水平差异显著。“-”表示菌丝不生长，“+”表示菌丝的旺盛程度，越多表示越旺盛。

Note:Different lowercases and capital letters in the same column indicated significant differences at 0.05 and 0.01 levels,respectively.“-” indicated no growth.“+” represented the growth vigorous degree of mycelium and more “+” indicated more vigorous growth.

3 结论与讨论

传统的灵芝栽培采用椴木栽培。目前，灵芝栽培原料主要为杂木屑、棉籽壳、玉米芯等[12-13]。随着灵芝产业规模的不断扩大，原料短缺现象逐渐凸显，木屑、棉籽壳等价格逐步攀升[14-16]，灵芝生产成本大幅提高，严重降低了芝农们的生产积极性。此外，大量的木屑需求间接地对森林资源和生态环境构成了威胁[17]，寻找新型代替原料就显得极为重要。随着菌草技术的发明，用菌草栽培灵芝不仅使生产成本大幅降低，还解决了“菌林矛盾”的问题。林占熺等[7]对菌草栽培灵芝可行性进行了研究。李娜[18]用菌草成功栽培了紫芝，并进行了营养成分的分析。王凯等[19]利用菌草栽培并观察9种灵芝菌株的生长情况及成分研究。该试验在前人的经验基础上采用新的菌草栽培灵芝。试验结果表明，除了芒萁、五节芒外，类芦和绿洲1号也适合用于灵芝栽培，且6号配方为单一菌草配方，简单易于操作，很有发展前景，但是否可推向市场还需进一步研究。

图1 1号、2号、6号、7号及10号配方菌丝生长情况Fig.1 Mycelium growth situations of formulas No.1,2,6,7 and 10

注：a.子实体成熟期；b.子实体生长期。Note:a.Mature stage of fruiting bodies; b.Growth stage of fruiting bodies.图2 子实体生长情况Fig.2 Growth situation of the fruiting bodies

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Screening of Culture Medium Formula forGanodermalucidumCultivated by JUNCAO

WANG Jin-feng1,2,LIN Zhan-xi2*

(1.College of Horticulture,Fujian Agriculture and Forestry University,Fujian,Fuzhou 350002; 2.China National Engineering Research Center of JUNCAO Technology,Fujian,Fuzhou 350002)

[Objective] To screen the culture medium formula forGanodermalucidumcultivated by JUNCAO.[Method] Six kinds of JUNCAO and two auxiliary materials were screened by test-tube method. The growth situations of hypha and fruiting body in selected formulas were observed.[Result] The suitable formulas forGanodermalucidum(Ga0801) cultivated by JUNCAO were No.1(78%D.dichotoma+20%bran+2% gesso), 2(78%M.floridulus+20% bran+2% gesso),6(78%P.oasis1+20% bran+2% gesso) and 10(30%D.dichotoma+48%N.regnaudiana+20% bran+2% gesso). Among them,formula No.6 was the optimal,which had vigorous mycelium growth,early formation of primordium,strong fruiting body and high biotransformation rate.[Conclusion] This research provides scientific basis for the large-scale market cultivation ofGanodermalucidumby JUNCAO.

JUNCAO;Ganodermalucidum; Culture medium; Formula

福建省科技厅重大专项(2014NZ0002-1)；福建省菌草生态产业协同创新中心攻关项目(JCXTGG08)。

王锦锋(1990- )，男，福建宁德人，硕士研究生，研究方向：菌草栽培食药用菌。*通讯作者，研究员，从事菌草技术研究和推广工作。

2016-10-26

S 567.3+1

A

0517-6611(2016)35-0029-03