牛胎儿弯曲杆菌病的临床和实验室诊断

徐 丽

(吉林省柳河县动物卫生监督所 135300)



牛胎儿弯曲杆菌病的临床和实验室诊断

徐 丽

(吉林省柳河县动物卫生监督所 135300)

弯曲杆菌病是由弯曲杆菌属细菌所引起的牛及其他动物的不同疾病的总称。与牛有关的主要有两种病型：由胎儿弯曲杆菌引起的牛不育与流产和主要由空肠弯曲杆菌引起的牛及其他动物的急性肠炎。牛胎儿弯曲杆菌病是由弯曲杆菌中的胎儿弯曲杆菌性病亚种和胎儿亚种引起的牛慢性不显性生殖器官疾病。其感染部位公母牛都局限于生殖器官，通过交媾而相互传播，引起牛的一时性不孕、流产或腹泻。本病是1913年在英国的大群发生流产的病牛中发现的。现在世界上大部分国家或地区都有发生此病的报道。我国部分地区也有散发，给养牛业带来一定影响。

1 临床症状

公牛感染本病，无明显的临床症状，精液也正常，但精液和包皮中可带菌。母牛于交配感染后，病菌一般在10～14 d侵入子宫和输卵管中，在其中繁殖，导致其发炎。阴道黏液常清澈，偶尔稍混浊。同时还发生子宫内膜炎。有些怀孕母牛的胎儿死亡较迟，则发生流产，流产多在怀孕后的5～6个月，流产率在5%～20%。早期流产，胎膜常可随之排出，如发生在怀孕的第5个月以后，往往有胎衣滞留现象。

2 实验室诊断

用于诊断胎儿弯曲杆菌病亚种(CFV)感染的方法包括以下步骤。

2.1 培养

胎儿弯曲杆菌不易在培养基中生长，其微需氧、脆弱、对培养基要求严格，通常可在被其他细菌污染的环境中分离到该菌。因此，在对胎儿弯曲杆菌的培养结果是阳性时可以诊断为感染，但是培养结果为阴性时需要谨慎下结论。

采集培养胎儿弯曲杆菌的样品包括：第一，阴道内采集。阴道冲洗样品是可行的，但是除非患牛为近期感染，否则从母牛分离到细菌的概率非常小。妊娠奶牛不可能得到阳性分离结果，未孕牛还有可能分离到细菌。第二，包皮内采集。采集包皮垢或清洗包皮。使用拭子不如采集包皮垢或清洗包皮有效。公牛比母牛更有可能分离到细菌。第三，从流产材料中采集样品。从母牛流产材料中可分离到CFV，主要从流产胎儿胃内容物中分离细菌。尽管在丘陵地带收集到流产的胎儿很困难，但对于流产胎儿具有重要的诊断价值，因此必须要在围栏内寻找这类流产的胎儿。因为胎儿弯曲杆菌非常脆弱，在冲洗液中不能长时间存活，因此，应立即接种到培养基中，推荐使用兰德氏培养基。如果这种方法不可行，样品必须在6 h内送到实验室。在微氧条件下用兰德氏培养基培养3 d后，可在血液琼脂培养基上再培养，并可在微氧条件下进一步培养。

2.2 血清学诊断

基于体液抗体的血清学诊断几乎没有价值，因为无论是在母牛还是公牛体内，性传染弯曲杆菌病都不能产生明显的血清抗体。

基于阴道IgA反应的血清学诊断方法应用较为广泛，因为即使抗体对清除CFV感染不是特别有效，但它仍是一种快速和持续的反应。然而，血清学方法不能准确区别的是CFV感染还是CFF感染。因此，在牛已经暴露于CFF的情况下，基于监测阴道黏液中IgA作为疾病诊断的可靠性较低。

基于阴道IgA的检验包括如下试验。①阴道黏液凝集试验。许多学者认为，尽管阴道黏液凝集试验对于个体牛的检测结果可能误差较大，但这种试验能很好地应用于群体水平(能检测出50%受感染的牛)。但由于该方法不能区分CFV感染和CFF感染，因此目前已基本被废弃。②IgA ELISA。澳大利亚建立了一种间接ELISA试验方法，用于鉴别阴道黏液样品中的免疫球蛋白A。对该方法进行的现场评价表明，在牛群中鉴定CFV感染时特异性达98.5%。如果牛群可能发生CFF感染(例如牛和羊混合饲养的牧场)，CFF和CFV的交叉反应限制了该试验方法的应用。虽然该方法的应用性仍有局限，但是IgA ELISA依然被世界动物卫生组织(OIE)推荐为诊断CFV感染的方法。

免疫荧光单独或者与细菌培养结合应用，是有价值的诊断弯曲杆菌病的辅助方法。这是一种快速、方便、准确的诊断公牛带菌的方法；如果和细菌培养结合使用，免疫荧光能成功地鉴别98%被感染公牛。Dufty(1967)曾建议，在连续4次荧光抗体试验检测呈阴性的公牛，可宣布其未被感染。但是，Barr和Anderson(1993)认为细菌培养比荧光抗体试验更有价值。

2.3 聚合酶链式反应(PCR)

应用PCR法可避免CFF和CFV培养以及二者的交叉反应等诸多问题。在最近10多年来，PCR试验进展速度很快，能在培养中区分CFF和CFV。最近已建立了一种适合现场使用的灵敏PCR，它不仅能够区分CFF和CFV，而且能在严重污染的样本(即包皮垢)中或不能培养的样品中鉴定出CFV。这种方法在澳大利亚和新西兰已广泛使用，同时，也有人根据细菌培养结果对这种方法的灵敏度和特异性进行了研究。

2017-05-03

徐丽(1975-)，女，中专，兽医师。

S858.23

B

1005-2739(2017)04-0040-02