雷公藤红素的长期毒性研究

王慧

【摘要】目的：研究雷公藤红素口服给药的长期毒性情况，确定其安全剂量。方法：分别通过设立高、中、低剂量组、空白对照组等组别，研究口服给药3个月后对大鼠的毒性情况，结合给药后大鼠的一般状况、体重、摄食量、血液学检查、尸解结果和组织病理学检查结果进行综合判定，判断动物是否发生毒性反应，确定大鼠无毒性反应剂量、毒性反应剂量或安全剂量范围。结果：对实验数据进行分析发现，3个给药剂量在实验期及恢复期间均不影响大鼠体重、摄食量、脏器系数、血常规指标、血清生化学指标，对高剂量组进行组织病理学检查也尚未发现异常的组织病理学病变。结论：给予大鼠灌胃雷公藤红素3个月，未观察到与受试物本身相关的毒性反应，在剂量470ug/kg下未见有害作用，此剂量可作为安全剂量。

【关键词】雷公藤红素；长期毒性；毒性研究

【中图分类号】R2855【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2017）06-0039-07

雷公藤红素（Celastrol，又名南蛇藤素）主要来源于中药雷公藤的根皮，具有抗炎、抗氧化等活性。近年来发现雷公藤具有很好的抗肿瘤作用，并且市场需求逐年上升，尽管雷公藤红素具有显著的药理活性[1]，但其毒性也不容忽视[2]，是其臨床应用的最大问题。因此，研究对其毒性情况进行全面而深入的认识，在保持或提高其药理活性的同时应该尽可能降低其毒性。

1仪器与材料

11[JP2]实验动物SPF级SD大鼠，体重80～100g，雌雄各半。由长沙市天勤生物技术有限公司（生产许可证号：SCXK（湘）2014-0011）提供。使用屏障级动物房（使用许可证号：SYXK（琼）2014-0025）饲养。A级大、小鼠维持饲料喂养，由长沙市天勤生物技术有限公司（生产许可证号：SCXK（湘）2014-0011）提供。饮水经消毒后由动物自由饮用，符合SPF级动物饮水要求。[JP]

12材料雷公藤红素（海南省药物研究所自提，纯度901%）；羧甲基纤维素钠（国药集团化学试剂有限公司生产批号：20140406）；血液化验分析系统分析试剂（稀释液、溶血剂和清洗剂）由EXIGO公司提供；血生化检测试剂由日本和光，朗道公司提供。

13仪器[JP3]DT5-2离心机（时代北利）；AUW220D电子天平（岛津）；YP30K电子天平（上海良平）；TP1020脱水机（莱卡）；EG1150H石蜡包埋机（莱卡）；RM2245轮转式切片机（莱卡）；HI1210摊片机（莱卡）；立式显微镜（索尼）；血生化测定仪（Echo plus）；动物血细胞分析仪（Exigo）。[JP]

2方法

21试验方法[3]将80只SD大鼠随机分为供试品高、中、低剂量组及空白对照组，每组20只，雌雄各半，给药组给予雷公藤470μg/kg、94μg/kg、和47μg/kg，空白对照组给予05%羧甲基纤维素钠溶液，各组均按大鼠10 mL/kg体重灌胃给药，每天1次，连续灌胃给药12周，停止给药2周作为恢复期观察，给药期（12周）和恢复期（2周）各组大鼠于第1次给药前及给药后至恢复期结束每周末称体重1次，并观察动物的一般状况及计算每周动物摄食量。给药期和恢复期，各组分别取大鼠14、6只处死，雌雄各半，麻醉后采血，测定血常规、和血清生化学指标，大鼠重要脏器称重后计算脏器系数，病变器官进行主要脏器的组织病理学检查。结合大鼠的状况、组织病理学检查结果及检测数据进行综合判定，判断动物是否发生毒性反应，确定大鼠无毒反应剂量、毒性反应剂量或安全剂量范围。

22统计方法采用SPSS190软件单因素方差分析[4]进行统计处理，数据以（x[TX-*3]±SD）表示，采用t检验，P<005表示差异有统计学意义。

3结果

37剖检观察结果及病理组织学检查实验期及恢复期发现，供试品本身并不引起大鼠组织器官形状、体积大小、色泽、位置、硬度、外膜等的异常改变。取部分高剂量组及对照组动物剖检，未发现与供试品本身相关的病理学检查，因此不进行中、低剂量组检查。

4讨论

雷公藤红素长期毒性剂量组的剂量设置，是根据本实验室前期研究中得到LD50 469mg/kg决定，大鼠3个月长期毒性试验中高、中、低3个剂量可分别采用1/10、1/50、1/100左右的LD50，符合长期毒性试验设计原则[5]。

经3个月给药及恢复期研究发现，雷公藤红素（470μg/kg、94μg/kg和47μg/kg）未引起大鼠一般状况异常、组织器官异常及组织病理学病变，虽然大鼠体重、摄食量及个别脏器系数、血常规指标及血清生化指标在给药期或恢复期出现部分数据的差异性，但从整体研究周期数据来看，均未体现任何规律性，也不存在任何剂量相关性及性别相关性，认为此指标的的差异性不存在实际意义，应并无毒理学意义。

综上所述，在本实验室条件下，大鼠经口灌胃给予雷公藤红素3个月，未观察到与受试物本身相关的毒性反应，在剂量470μg/kg以下未见有害作用，在此剂量以下使用，可作为安全剂量。

参考文献

[1]胡凯，葛卫红.雷公藤红素药理活性研究进展[J].亚太传统医药，2012，8（11）：179-181.

[2]袁菱，陈彦，周蕾，等. 纳米结构脂质载体降低雷公藤红素毒性的实验研究[C].//首届全国方剂组成原理高峰论坛. 2012.

[3]高晓东，李雪萍，徐春茂，等. 扶正逐毒丸制剂大鼠长期毒性实验研究[J]. 中国临床药理学杂志， 2015（7）：563-565.

[4]张晓冬，宗英，陆国才，等. 药物长期毒性试验血液和生化指标的统计处理[J].中国新药杂志，2010，19（4）：270-272.

[5]国家食品药品监督管理局.药物研究技术指导原则（2005[BF]）[[BFQ]M].北京：中国医药科技出版社，2005：217-226.

（收稿日期：2017-01-13编辑：梁志庆）