文冠木中芦丁的微波萃取研究

王银虎+秦学

【摘 要】 本文用正交试验方法优选了微波辅助萃取文冠木中芦丁工艺中的溶剂用量、辐射时间、微波功率等条件，并对提取溶剂进行筛选，试验结果表明，提取溶剂为PH=12水溶液，用量为15倍，微波功率为350W是，文冠木中芦丁的提取率为最高。

【关键词】 文冠木 芦丁 微波萃取

文冠木[1]（Xanthoceras sorbiflia Bunge）为无患子科文冠木属植物文冠果的枝条或茎干的木部。文冠果生于干旱丘陵地区，分布于华北、东北、西北、华南等地，主产于内蒙古。《本草纲目》和《救荒本草》中有记载，收于1977年版《中國药典》，现为蒙医常用药材，蒙古族药名为希拉森登，具有祛风湿、消肿止痛、敛干黄水的功效，主要用于风湿性关节炎、风湿内热、皮肤风湿的治疗。

芦丁[2]是文冠木的主要成份，具有抗菌抗炎作用、抗辐射，调节毛细管壁的渗透，降低血管脆性，防止血管破裂且具有抑制醛糖还原酶的作用。临床上芦丁主要用于高血压病的辅助治疗和用于防治因芦丁缺乏所致的其他出血症。国内外医药工业中用芦丁作原料生产多维葡萄糖羟乙基芦丁、槲皮素、二乙胺基甲基芦丁、二乙胺基乙基芦丁、芦丁镁络盐、羟乙基槲皮素、盐酸镁芦丁络盐、对氯苯氧异丁酸镁芦丁络盐及维脑路通等心血管药物，在食品工业中芦丁用作着色剂。因此芦丁在国内外市场上需求量较大，由于芦丁合成耗资较大，因此研究文冠木中芦丁的提取工艺具有现实意义。

微波萃取（MicrowaveExtraction，ME）[3]是微波和传统的溶剂萃取法相结合而成的一种萃取方法。1986年等首先在分析化学制样（天然萃取成分的提取）技术中应用了微波萃取法。此技术操作方便、省时、节能，广泛用于食品、化学合成、分析、环保、冶金、日化等领域。近年来，微波提取技术开始应用于天然产物的提取，本文用微波萃取法对文冠木中芦丁的提取进行了研究，结果报道如下。

1 实验部分

1.1 仪器与材料

Waters600高效液相色谱仪（配有2996光电二极管检测器，717自动进样器，Waters600泵，Empower色谱工作站）；MilliQAcademic型超纯水系统（美国Millipore公司）；电子天平（上海天平仪器厂）；2200LH超声波提取仪（上海科导超声仪器有限公司）。

芦丁（Rutin）对照品（由中国药品生物制品鉴定所提供），甲醇、乙酸（美国Fisher公司）为色谱纯，实验用水为三蒸水。

1.1.1 正交实验优选微波萃取条件

分别用溶剂用量、辐射时间、微波功率为三个因素，进行了三个因素水平正交试验设计，各因素水平见表1如下：

因为RC>RB>RA，说明微波功率是第一影响因素，三种因素影响提取程度大小顺序为：功率>辐射时间>溶剂用量.

因 对因素A：I3>I2>I1

对因素B： I3>I2>I1

对因素C：I3>I2>I1

因此，最佳条件为A3B3C3

1.1.2 提取溶剂筛选

分别精密称取文冠木0.1g，在上述试验条件下，分别用甲醇、乙醇70%乙醇、PH=12的水溶液作为提取溶剂进行了微波提取、离心、微孔滤膜过滤，进样10，HPLC测试，结果见表如下：

结果表明PH=12水溶液的提取效率最好。

*利用PH=12的NaOH进行萃取，同时加入0.04g的硼砂。由于芦丁中具有邻二酚羟基，易发生氧化，尤其在碱液中，加入硼砂将邻二酚羟基保护起来而有利于芦丁的提取。再用0.1M盐酸调制PH为6的提取液进行测试。

1.1.3 工作曲线

把标准溶液分别2、4、6、8、10进样，在2.1项条件下测定，以进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制工作曲线，结果芦丁的回归方程式：Y=4.12×106X-2.46×105，r=0.9998，线性范围为0.4～2.0。

1.1.4 HPLC分析法

保护柱：Waters Symmetry C18（5μm，20mm×39mm）；分析柱Waters Nova-pakC18（4μm，3.9×150mm），流动相：甲醇—水—乙酸（V：V：V=80：5：15），流速：0.8ml/min；检测波长：紫外254nm，柱温25℃。在该色谱条件下进样后1.80分钟时得到芦丁的尖锐而对称的色谱峰。

1.1.5 不用功率条件下提取率的比较

分别精密称取文冠木0.1g，加入PH=12水溶液作为提取剂，在不同功率条件下对文冠木进行了微波提取，结果见下表：

由上表可知，随着微波功率的增大，芦丁产率先增加而后下降，这是由于微波功率小时，提取剂在规定时间内达不到沸腾。功率越高，提取剂在规定时间内能沸点，是提取液沸腾，提取效果反而差。微波功率为350W是提取率最高。

1.1.6 微波萃取法的可靠性评价

1.1.6.1 微波萃取实验精密度

取6份粉碎后的文冠木药材，在相同的微波萃取最佳条件下萃取，测定其芦丁含量，6次测定结果的RSD为3.9%。

1.1.6.2 稳定性实验

每隔1小时对同一文冠木供试液进行测试，结果表明供试液在6小时内稳定。

1.1.6.3 加样回收实验

在4份相同的文冠木样品中加入4中不同体积的芦丁标准溶液，在最佳微波萃取条件下处理后进行HPLC测定，计算芦丁的回收率，芦丁的平均回收率为97.6%，RSD为2.3%（n=4）.

2 结论

微波萃取被誉为“绿色分析化学”，是因为微波萃取试剂用量少，节能、省时、污染小。使用很少的溶剂，更快的时间，更好的回收，更高的效率。通过以上实验结果：表明微波提取法提取文冠木中的芦丁是，PH=12水溶液作为提取液，溶剂用量为15倍，萃取时间为10min，微波功率为350W时芦丁的提取率为最高。

参考文献

[1]王额尔敦；蒙药学[M]；辽宁：辽宁民族出版社，2000：211-212.

[2]崔承彬，陈英杰，姚新生等.文冠木活血成分的化学研究[J].中草药，1987，18（7）：9-10

[3]韩增，张德华，宁平。微波萃取天然物活性组分[J].云南化工，2008，35（05）：69-72.