应用抗体检测对猪瘟免疫效果的评价研究

柳清

（青海省湟源县畜牧兽医站 青海西宁 812100）

应用抗体检测对猪瘟免疫效果的评价研究

柳清

（青海省湟源县畜牧兽医站 青海西宁 812100）

近些年我国生猪产业的现代化、集约化、规模化发展势头日益壮大，随之而来的多种新老疫病也出现了新的流行程度、流行范围，多病原混合感染和继发感染、持续感染和隐性感染、温和非典型病变等多种形态共存，对我国猪病的综合防控提出了新的要求。

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病，多感染猪场内母猪，目前临床表现主要以隐性带毒和慢性感染为主，是我国要求强制免疫的重要猪病之一。

当前免疫接种各类疫苗正成为规模化猪场疫病防控的重要措施，显然传统的技术手段已不能满足现代化养殖需求。而评价疫苗免疫效果好坏的主要指标就是相应抗体滴度的高低，免疫后的猪群体内抗体达到一定的水平，才能有效避免因相应致病原的感染而发病，因此抗体检测是和疫苗免疫同等重要的工作，可以为各猪场内疫病的综合防控提供有效的参考，与此同时抗体检测还可对没有免疫的猪群监测野毒感染的情况，当前抗体检测工作已成为现代化养殖业监测疫病的重要手段。

目前抗体水平检测的方法种类繁多，优劣不一，其中常采用 ELISA 检测方法用于疫病流行病学调查、大批量检测样品抗体等监测。为初步了解青海省湟源县猪场猪瘟疫苗的免疫效果好坏，对当地部分规模养猪场和散养户的猪群进行随机取样，应用猪瘟间接 ELISA 检测试剂盒对该地区部分猪场免疫后 800 份血清抗体效价进行了检测。根据监测的抗体保护率情况，采取适当调整措施，为本地猪瘟的防控及净化工作提供科学的参考。现报告如下：

1 试验材料

1.1 材料

随机采集本地区部分规模化猪场和散养户共计 800 份血样，其中规模化猪场血样为 600 份，散养户血样样本为 200 份。

1.2 仪器及试剂

各型号移液器及其移液枪头，5mL 注射器，离心管，小型离心机，酶标仪，洗板机等，猪瘟间接ELISA 检测试剂盒（购于武汉科前生物科技有限公司）等。

2 试验方法

2.1 血液采集及血清处理

绑定猪后，用 75%酒精棉球对猪耳静脉处皮肤消毒处理，将 5mL 注射器呈 45 度插入耳静脉内采血；将采血后的注射器置于 37 ℃环境中孵育 1～2 h 后，转入离心管中，8 000 rpm 离心 10min，分离血清并标记好后低温保存备用。

2.2 间接ELISA检测方法

操作方法严格按照检测试剂盒说明书进行。

2.3 结果有效性的判定标准

检测结果判定：正常情况下，当阳性对照样品D650 值大于等于 0.6，且阴性对照孔平均 D650 值小于 0.3 时检测结果有效。检测样品阴阳性结果的判定按照样品检测值大于 0.35 时判定该检测样品为阳性；样品检测值小于 0.35 时判定该检测样品为阴性。

3 血清学检测结果

通过猪瘟抗体水平检测，结果表明此次养殖场和散养户的 800 份血液样品平均猪瘟抗体阳性率为 83.9%，其中规模化养殖场的猪瘟免疫抗体阳性率高达 85.2%，散养户的猪瘟免疫抗体的合格率80.0%（见表1）。整体猪瘟免疫抗体合格率均高于国家规定的免疫群体猪瘟抗体合格率 70%的要求。

表1 猪瘟抗体检测结果

4 小结与分析

从本地区随机采取的 800 份规模场及散养户血样的猪瘟免疫抗体监测统计结果可以看出当地猪瘟免疫抗体合格率整体水平较高，经与 2015 年同期相关数据比较可知规模场和散养户的猪瘟免疫抗体合格率均有提高的趋势。但规模养殖场的猪瘟抗体水平普遍比散养户的高，建议有关部分及养殖单位采取有效措施加强散养猪的疫苗免疫和抗体监测工作，继续保持猪瘟免疫效果的良好态势。此次检测结果已回馈到各采样养殖单位，并指导了免疫不良的猪场集中进行了猪瘟疫苗的强化免疫。

本次试验采用间接 ELISA 试剂盒对当地部分猪场免疫猪瘟疫苗后的血清抗体水平进行了动态监测，整体来看，无论是规模化猪场还是散养户猪瘟疫苗免疫后抗体水平均能达到 80%以上，说明防制和净化猪瘟的形势有所缓解，但与国外发达国家相比免疫接种工作仍需进一步加强，除选用优质的猪瘟疫苗产品及制定科学的免疫方案外，还应同步加强免疫后抗体水平的监测工作，确保猪群真正产生强大的保护力。疫苗免疫后抗体水平低可能原因有多种，根据生产实践调查分析可能有以下几种：①免疫程序不合理，各养殖场应根据本场及当地疫病的实际流行情况，科学的指导疫苗免疫；②疫苗保存、运输等过程中不良条件使得疫苗失效时造成的免疫失败；③技术人员操作不规范、免疫剂量不足等；④免疫抑制因素和免疫抑制性疾病等；⑤接种的疫苗间的干扰作用等。

猪瘟是危害养猪业的重要传染病，给全球养猪业造成了巨大的经济损失。定期进行猪瘟疫苗免疫是防控猪瘟的重要手段，良好的免疫效果才能真正降低猪瘟的发生。猪瘟疫苗免疫是否有效可以通过检测猪群体内的猪瘟抗体滴度进行判断，世界上一些发达国家已成功通过抗体检测技术有效控制了猪瘟的发生和流行。我国猪瘟综合防制策略以免疫预防为主，虽然对猪瘟的发生和传播也起到了积极有效的作用，但是当前很多不同规模的猪场并没有彻底根除猪瘟，甚至尚有相当数量的免疫猪存在没有获得足够的抗体或抗体作用不持久等免疫失败现象，与此同时在疫苗选择压力作用下，猪瘟病毒发生了较快的变异，致使易感猪群普遍存在，给疫病的防控带来新挑战。猪群抗体检测工作的开展对猪病尤其是一些重大猪病的流行情况实施动态的监测、疫苗免疫效果的评价及免疫程序的修订等均具有重要的现实指导意义，随着我国动物疫病防控体系的不断完善，抗体检测将成为畜禽养殖过程中疫病监测的常态化工作之一。

10.3969/j.issn.1008-4754.2017.02.042

柳清（1984-），女，青海人，汉族，本科，助理兽医师，研究方向：畜牧兽医。