母婴阻断成功儿童1岁至3岁乙肝表面抗体的保护性研究

曹卫华 张英 李明慧 冉崇平 齐天林 王星月 胡玉红 周明书 张璐 路遥 吴淑玲 申戈 郝红晓 常敏 胡蕾苹 刘如玉 华文浩 易为 谢尧

100015北京大学医学部教学医院 北京地坛医院肝病中心(曹卫华、张英、谢尧);100015 首都医科大学附属北京地坛医院肝病中心(李明慧、冉崇平、齐天林、王星月、张璐、路遥、吴淑玲、申戈、郝红晓、常敏、胡蕾苹、刘如玉)；检验科(华文浩)；妇产科(易为、胡玉红、周明书)

母婴阻断成功儿童1岁至3岁乙肝表面抗体的保护性研究

曹卫华 张英 李明慧 冉崇平 齐天林 王星月 胡玉红 周明书 张璐 路遥 吴淑玲 申戈 郝红晓 常敏 胡蕾苹 刘如玉 华文浩 易为 谢尧

100015北京大学医学部教学医院 北京地坛医院肝病中心(曹卫华、张英、谢尧);100015 首都医科大学附属北京地坛医院肝病中心(李明慧、冉崇平、齐天林、王星月、张璐、路遥、吴淑玲、申戈、郝红晓、常敏、胡蕾苹、刘如玉)；检验科(华文浩)；妇产科(易为、胡玉红、周明书)

目的探讨高病毒载量e抗原(HBeAg)阳性慢乙肝孕妇母婴阻断成功后，在1岁和3岁之间儿童HBsAb 滴度变化以及分析其长期保护性和感染率。方法入组乙肝表面抗原(HBsAg)、HBeAg双阳性、孕28周HBV DNA≥106IU/ml慢性HBV感染孕妇的1周岁龄儿童，并随访至3岁，分别在1岁和3岁时检测这些儿童的进口乙肝五项及生化检测并分析1岁至3岁未补打加强疫苗儿童HBsAb 滴度变化、阳性率、阴性率和感染率；同时回顾性收集这些1岁儿童在我院有7个月HBsAb滴度检测者，分析7个月至1岁期间未补打加强疫苗儿童HBsAb滴度变化、阳性率和阴性率。结果该研究入组264例1岁儿童，其中有7个月至1岁期间未补打加强疫苗儿童有178例，1岁至3岁期间的儿童中有114例未补打加强疫苗。结果显示在1岁和3岁时未发现感染儿童。7个月至1岁儿童HBsAb 滴度呈现下降趋势，HBsAb 滴度中位数从1 000 IU/L降至509.43 IU/L(P<0.05)，抗体仍然具有保护性；而1岁至3岁期间，HBsAb 滴度中位数从466.72 IU/L降至 67.3 IU/L (P<0.05)，3岁时有60.52%儿童处于低免疫应答或无应答状态，但仍具有保护性，但显著低于补打加强疫苗者，因此，这些1岁至3岁期间未补打加强疫苗的儿童仍处于高危状态。结论7个月抗体有保护性，则1岁和3岁时不易感染；而3岁时抗体降至低或无应答状态，儿童仍处于高危状态，有必要对其采取保护措施，补打加强疫苗。

我国HBV感染的主要传播方式是围产期母婴垂直传播。HBeAg阳性慢性HBV感染孕妇高病毒载量是HBV母婴垂直传播最重要的危险因素[1-3]。目前，乙肝疫苗刺激机体免疫系统产生保护性抗体是预防HBV感染的最有效方法。自1992年,我国将新生儿出生后0,1,6个月，乙肝疫苗常规接种纳入计划免疫有效控制了HBV母婴传播，有效率高达95%。WHO推荐应用高病毒载量孕妇分娩的新生儿在出生后12 h内接种HBIG和乙肝疫苗，并在出生后1个月和6个月分别注射乙肝疫苗来预防新生儿感染极大地提高了母婴阻断的效果[4]；一项研究表明，HBV感染孕妇分娩新生儿中，95%未被感染的新生儿对首次接种的疫苗有应答[5]。还有研究证明，第1针乙肝疫苗接种1个月后，只有约30%的孩子会产生HBsAb，而相继接种第2针第3针疫苗后大约70%～90%会产生HBsAb[6]。由于儿童免疫系统功能不如成人强大，经常规接种乙肝疫苗后，随着年龄增长，产生的HBsAb会被慢慢消耗，抗体滴度会下降甚至失去保护性[7-8]。有研究发现，部分儿童在1岁时没有感染，但是在1岁以后发生HBV感染[9]。因此，本研究的目的是探讨经过常规接种乙肝疫苗后7个月至1岁和1岁至3岁期间未补种乙肝疫苗的高危儿童乙肝表面抗体滴度的变化及分析其长期保护性和感染率。

1 材料与方法

1.1研究设计本研究是一项回顾性、观察性研究，入组自2013年10月至2014年8月到首都医科大学附属北京地坛医院妇产科就诊的孕妇其满1岁的264例儿童，并随访至3岁；同时，收集这些儿童7个月HBsAb滴度定量检测值，分别在1岁和3岁时检测这些儿童的进口乙肝五项，肝功能，肾功能，电解质以及血常规。回顾性分析7个月至1岁时HBsAb滴度变化，观察1岁至3岁时HBsAb滴度变化以及分析其长期保护性和感染率；分析7个月至1岁儿童时排除这期间补打加强疫苗的儿童；分析1岁至3岁儿童时排除这期间补打加强疫苗的儿童。入组标准为： HBsAg 阳性超过6个月，HBeAg 阳性且在孕28周和产前HBV DNA载量均大于1×106IU/ml，孕期肝功能正常的母亲所生孩子，且这些孩子均经过出生后2 h、1个月、6个月常规注射10 μg 重组乙型肝炎疫苗(大连，汉逊酵母)免疫接种。排除标准：母亲孕期羊水穿刺史；妊娠高血压疾病、胎膜早破、早产、前置胎盘、胎盘早剥等病史；孕期注射乙肝免疫球蛋白治疗；孕妇孕期合并除HBV外的其它病毒感染；出生7个月确诊已经感染的孩子以及患有肝脏疾病或免疫缺陷病等儿童排除。家属签署知情同意书，本研究通过了首都医科大学附属北京地坛医院伦理审核。

1.2检测指标分别在1岁和3岁时检测随访儿童的进口乙肝五项，肝功能，肾功能，电解质以及血常规，这些指标均由首都医科大学附属北京地坛医院检验科提供。

1.3保护性评价指标将HBsAb滴度作为保在护性指标。参考文献[10]HBsAb滴度定义如下：HBsAb滴度≥100IU/L定义为强应答，HBsAb滴度在10-99 IU/L之间定义为弱应答，HBsAb滴度<10 IU/L定义为无应答。HBsAb滴度≥10IU/L(定义为HBsAb阳性，有保护性)百分率，HBsAb滴度<10 IU/L(定义为HBsAb转阴，无保护性)百分率以及感染率。HBV母婴传播失败率定义为出生后7个月静脉血HBsAg阳性和/或DNA阳性。

1.4统计学方法应用统计软件SPSS 19.0进行统计分析。计量资料以均数±标准差或中位数表示。正态分布资料的两组间数据的比较采用t检验完成，配对资料比较用配对设计t检验。计数资料用率表示，组间差异采用卡方检验。P<0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1入组1岁儿童基本情况本研究共入组264例1岁儿童，包括128例女孩和136例男孩，其中7个月至1岁期间未补打乙肝疫苗的儿童有178例；自1岁随访至3岁的儿童中有114例未补打加强疫苗。7个月确诊母婴阻断成功的儿童在1岁、3岁随访时未发现HBsAg阳性儿童。

2.27个月和1岁儿童HBsAb滴度变化、阳性率和阴性率178例儿童在7个月至1岁期间未补打加强疫苗，通过比较两个时间点HBsAb滴度水平发现，7个月至1岁，HBsAb滴度呈现下降趋势：7个月HBsAb滴度中位数1 000, 12个月HBsAb滴度中位数509.43，两个时间点比较差异有统计学意义(P=0.000)，如图1所示。在7个月抗体阳性率达100%，1岁时只有1例儿童抗体转阴，但未感染。

图1 7个月与12个月HBsAb滴度的比较Fig.1 Comparing HBsAb titer at months 7 and 12

2.3完成3岁随访的未补打加强疫苗儿童HBsAb滴度变化、阳性率、阴性率和感染率114例儿童完成3岁随访，且没有补打加强乙肝疫苗，这些儿童1岁和3岁HBsAb滴度比较发现，3岁时HBsAb滴度明显低于1岁时HBsAb滴度(12个月HBsAb滴度中位数466.72, 36个月HBsAb滴度中位数67.34)，两个时间点比较差异具有显著地统计学意义(P=0.000)如图2所示。这些未补打乙肝加强疫苗的儿童在1岁时85.96%者处于免疫强应答水平，低免疫应答或无应答所占比例很少，而在3岁时低应答或者无应答者占60.52%，比例较1岁时明显升高，差异具有统计学意义(P=0.017)，见表1, 随着年龄的增长，儿童免疫应答强度会下降，HBsAb滴度会逐渐下降。3岁时抗体阳性率92.10%，阴性率为7.90%。结果还显示在3岁时没有儿童感染。

图2 12个月与36个月HBsAb滴度的比较Fig.2 Comparing HBsAb titer at months 12 and 36

表 1 年龄和HBsAb滴度应答的相关性

2.41岁至3岁期间未补打加强疫苗和补打加强疫苗儿童抗体滴度及阳性率比较表2显示补打加强疫苗儿童抗体滴度大于未补打加强疫苗儿童(P<0.001)，且补打者阳性率为100%。

表2 未补打加强疫苗和补打加强疫苗儿童抗体滴度及阳性率比较

3 讨论

预防性接种乙肝疫苗可刺激机体产生HBsAb，在自然状态下，HBsAb随着年龄增长而逐渐被消耗，甚至失去对机体的保护性[11]。

有研究表明，母亲HBV DNA高载量是母婴垂直传播的独立危险因素，其所生孩子处于高危险状态[12-13]。在7个月已确诊母婴阻断成功的部分儿童在1岁以后可能会再感染HBV[14]，但在我们的研究中并没有发现儿童在1岁和3岁时有感染者。我们的研究结果显示7个月乙肝表面抗体滴度高时，1岁时也不易感染HBV；虽然3岁时抗体显著下降，但是抗体仍为阳性，依然具有保护性，则3岁时也不易发生HBV感染。

本研究结果显示，1岁至3岁期间未补打加强疫苗儿童的抗体滴度显著低于补打疫苗儿童，抗体阳性率低于补打加强疫苗者，这提示1岁至3岁儿童在未补打疫苗情况下，虽然儿童体内有抗体，但保护性较弱，再者，这些儿童仍处于高危险状态中，因此，对这些低保护性儿童有必要采取保护措施，以降低其感染HBV的几率。

我们研究目的旨在通过探讨抗体的长期保护性和高危儿童的感染率，预防母婴阻断成功后儿童再发生HBV感染。然而，如何彻底避免1岁以后儿童感染HBV，尚需要进一步研究。

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2017-06-06)

(本文编辑：陈培莉)

ProtectivityofhepatitisBsurfaceantibodyinchildrenbetween1and3yearsaftersuccessfulblockingofmother-to-childtransmission

CaoWeihua,ZhnagYing,LiMinghui,RanChongping,QiTianlin,WangXingyue,HuYuhong,ZhouMingshu,ZhangLu,LuYao,WuShuling,ShenGe,HaoHongxiao,ChangMin,HuLeiping,LiuRuyu,HuaWenhao,YiWei,XieYao

DepartmentofLiverDiseasesCenter,BeijingDitanHospital,PekingUniversityTeachingHospital,Beijing100015,China(CaoWH,ZhangY,XieY);LiverDiseasesCenter,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China(LiMH,RanCP,QiTL,WangXY,ZhangL,LuY,WuSL,ShenG,HaoHX,ChangM,HuLP,LiuRY);ClinicalTestCenter,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China(HuaWH);DepartmentofObstetricsandGynecology,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China(YiW,HuYH,ZhouMS)

XieYao,Email:xieyao00120184@sina.com;YiWei,Email:yiwei1215@163.com.

ObjectiveTo investigate the change of hepatitis B surface antibody (HBsAb) titer and its long-term protection and infection rates between 1 and 3-year-old children whose mothers were chronic hepatitis B pregnant woman with HBeAg positive and high viral load after successful blocking of mother-to-child transmission.MethodsOne-year-old children whose mothers were hepatitis B surface antigen (HBsAg) and hepatitis B e antigen (HBeAg) positive, with HBV DNA≥106IU/ml were enrolled, then were followed up till 3 years old, and tested the five serological markers of hepatitis B and biochemical parameters at the age of one and three years respectively, and analyzed HBsAb titer, positive rate, negative rate and infection rate of 1 to 3-year-old children without enhanced vaccination; meanwhile, data of HBsAb titers at the age of 7 months were collected HBsAb titer, positive rate, and negative rate were analyzed.ResultsTotally 264 1-year-old children were enrolled into the study, including 178 children without enhanced vaccination between seven months and 1 year of age, and 114 children without enhanced vaccination between 1 year and 3 years of age. Our result showed that there were no infected children at the age between 1 and 3 years. HBsAb titer decreased from 7 months to 1 year old and dropped from 1 000 IU/L to 509.43 IU/L (P<0.05), and the antibody was still protective. From 1 year to 3 years old, HBsAb titer dropped from 466.72 IU/L to 67.3 IU/L (P< 0.05); at the age of 3 years, 60.52 % children were either weakly positive or negative, but still protective, but significantly less than those who had the reinforced vaccination. As a result , the children without the enhanced vaccination between 1 and 3 years of age were still at high risk.ConclusionsIf the antibody was protective at 7 months, children were not easily infected between 1 year and 3 years of age. At the age of 3, the antibody dropped to low or no responsive levels, and the children were still at high risk. It is necessary to take protective measures and supplement the vaccine.

Hepatitis B virus; Hepatitis B surface antibody; Hepatitis B vaccine; Mother-to-child transmission

谢尧，Email: xieyao00120184@sina.com; 易为，Email: yiwei1215@163.com

10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.05.005

肝炎病毒,乙型；乙肝表面抗体,疫苗肝炎，乙肝；母婴传播

北京市卫生系统高层次卫生人才项目(2015-3-106)；北京市科委首都临床特色应用课题(Z141107002514131)

FundprogramsBeijing Healthcare System for "High-level Technical Personnel Training Project"(2015-3-106); Beijing Science and Technology Commission Capital Clinical Characteristic Application Subject (Z141107002514131)