桂枝汤加减对慢性特发性荨麻疹的疗效及血清MMP-9和25羟维生素D的检测

李春鸟 王 镏

(1 陕西省咸阳市杨凌示范区医院皮肤科，咸阳，712100； 2 陕西省咸阳市第一人民医院皮肤科，咸阳，712000)

桂枝汤加减对慢性特发性荨麻疹的疗效及血清MMP-9和25羟维生素D的检测

李春鸟1王 镏2

(1 陕西省咸阳市杨凌示范区医院皮肤科，咸阳，712100； 2 陕西省咸阳市第一人民医院皮肤科，咸阳，712000)

目的：探讨桂枝汤加减对慢性特发性荨麻疹的临床疗效，同时观察期对患者外周血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)和25羟维生素D浓度的影响。方法：选取2015年1月至2016年12月陕西省杨凌示范区医院皮肤科门诊就诊的慢性特发性荨麻疹患者60例，随机分为对照组和观察组，每组30例。对照组患者服用氯雷他定10 mg/次，1次/d，联合西替利嗪10 mg/次，1次/d，观察组在对照组治疗基础上加用桂枝汤，2组均连续治疗28 d，治疗结束后观察2组的临床疗效，同时采用酶联免疫吸附测定(ELISA)及蛋白质免疫印迹(Western Blotting)观察2组患者治疗前后MMP-9及25羟维生素D浓度的变化。结果：1)观察组总有效率86.67%，高于对照组的66.67%，差异有统计学意义(P<0.05)。2)经过治疗后，2组患者外周血25羟维生素D浓度均较治疗前升高，其中观察组升高的趋势更为明显，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；3)经过治疗后2组患者外周血MMP-9浓度均较治疗前下降，其中观察组下降的幅度高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

慢性特发性荨麻疹；桂枝汤；25羟维生素D；MMP-9

慢性特发性荨麻疹(Chronic Spontaneous Urticaria，CSU)的发病原因错综复杂，目前尚处于研究阶段。有文献显示CSU患者体内存在维生素D下降的现象，有研究人员通过尝试添加维生素D治疗CSU，取得一定的疗效。CSU属于变态反应性疾病，其发病过程中性粒细胞发挥重要作用，而MMP-9免疫反应性恰与中性粒细胞关系密切，更有文献指出过敏原激发效应可导致MMP-9浓度急剧上调，因此我们认为观察MMP-9的浓度变化对于评估CSU的病情是有据可循的。

目前临床将抗组胺药物视为治疗CSU的一线用药，谁在短时间内可明显缓解患者的临床症状，但长期使用后带来的耐药、停药后复发影响了患者的治疗依从性。传统中医从整体出发，辨证论治，在治疗诸多疾病均有独特优势，笔者团队经过多年的临床经验，以桂枝汤加减对CSU患者进行干预，取得一定疗效，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年1月至2016年12月陕西省咸阳市杨凌示范区医院皮肤科门诊就诊的慢性特发性荨麻疹患者60例，随机分为对照组和观察组，每组30例。其中对照组男14例，女16例，年龄21～52岁，平均年龄(31.5±5.2)岁，病程1个月至3年，平均病程(6.7±0.5)个月。观察组男13例，女17例，年龄20～55岁，平均年龄(31.8±6.1)岁，病程1个月至2.5年，平均病程(6.5±0.7)个月。2组患者在年龄、性别、病程等一般情况方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

同时《意见》指出，被纳入社保“黑名单”的失信主体，经办机构可结合实际情况以适当方式督促失信主体在3个月内整改。整改到位后，失信主体可提请经办机构确认，经办机构应在确认后5个工作日内将其移出社保“黑名单”；整改不到位的，经办机构应启动警示性约谈程序。经办机构应对在规定期限内整改不到位的失信主体主要负责人进行一次警示性约谈。约谈记录(包括拒绝约谈或不配合约谈等情形)记入失信主体信用记录，纳入全国信用信息共享平台。

1.2 诊断标准[3]根据第4版《临床皮肤病学》中关于CSU的诊断：1)皮肤突发淡红色风团，发无定处，可遍布全身，大小形态不一，风团周围可见反射性红晕。2)自觉瘙痒伴有灼热感，部分患者可出现消化道症状，甚至可出现呼吸困难。3)风团时隐时现，多在24 h内消退，症状消失后不留痕迹，4)风团可反复出现，每周发作次数≥2次，病程>6周。5)皮肤可出现白色抓痕。具有1)～4)中的任意2项以及5)即可诊断CSU。

1.4 排除标准 1)具有食物及药物过敏史者。2)近7 d内服用任何抗组胺药物、激素类药物或其他抗过敏药物者。3)哺乳期或妊娠期妇女。

1.3 纳入标准 1)符合1.2诊断标准者。2)年龄18～70岁。3)近7 d内未服用任何抗组胺药物、激素类药物或其他抗过敏药物者。4)意配合治疗，并签署知情同意书者。

纯电动汽车是电力驱动的一种新能源汽车，纯电动汽车适合慢速行驶，这种汽车在停车状态下不会消耗过多的电能，其主要以发电机为制动电机，因此，可借助减速时的能量来减少石油资源的消耗量。同时，其他能源可转化为车辆行驶所需的电能，维修保养工作相对简单，且工作压力较小。但是蓄电池容量有限，且价格较高，需要完善的基础设施支持，故而该类型汽车的投资较高。

频率稳定度是精密振荡器的重要特性之一，也是衡量频率标准稳定性的重要指标[15-16]。对于频率稳定度的精确测量即可以确定振荡器的性能优劣，同时可以促进精密振荡器的研制。频率稳定度的测量分为频域测量和时域测量，文中主要在时域对卫星本振频率稳定度进行测量分析。

1.6 治疗方法 对照组患者服用氯雷他定(开瑞坦，上海先灵葆雅制药有限公司生产，国药准字H10970410)10 mg，1次/d。盐酸西替利嗪(成都恒瑞制药有限公司生产，国药准字H20030191)10 mg，1次/d。观察组在对照组治疗基础上加用桂枝汤加减，组方如下：桂枝12 g、白芍9 g、生姜3片、炙甘草6 g、大枣5枚、瘙痒严重者加蝉蜕9 g、防风9 g，发热重者加石膏9 g、黄芩9 g、栀子9 g、连翘6 g，风团鲜红者加生地黄9 g、赤芍12 g、川芎9 g，消化道症状者加茯苓12 g、白术12 g。1剂/d，200 mL早晚温服分服。2组患者均接受为期28 d的治疗。

湖州一个富家儿媳，丈夫死后想改嫁，而公公不允许，迫她守寡。她便向“疙瘩老娘”求援，“疙瘩老娘”开价是一字百两银子，向她要了一千六百两银子，写了张十六字的状子。

图1c)的仿真结果表明：当港口群内干线泊位的处理能力增强时，某些干线港口的枢纽地位进一步得到巩固，如图中上海港，但该类型港口的承载压力也将会加重，见表4。

1.7.1 ELISA检测治疗前后25羟维生素D浓度的变化 治疗前、治疗28 d，于安静清醒状态下、上午8～9时取血测定，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)，根据购自上海谷研实业有限公司ELISA试剂盒说明进行操作，检测25羟维生素D。

2.2 2组25羟维生素D浓度变化 经过治疗后2组患者外周血25羟维生素D浓度均较治疗前升高，其中观察组升高的趋势更为明显，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见图1。

1.8 疗效判定标准 参照《中药新药临床研究指导原则》[4]对患者瘙痒程度、风团数量及大小，发作频率进行评定，计算出总积分，疗效指数=(治疗前积分-治疗后积分)/治疗前积分×100%。疗效指数≥90%视为痊愈；50%≤疗效指数≤89%视为显效；20%≤疗效指数≤49%视为有效；疗效指数<20%视为无效。

1.7 观察指标

表1 临床疗效评定标准

2 结果

2.1 2组临床疗效比较 治疗28 d后2组患者均获得一定疗效，其中观察组总有效率86.67%，高于对照组的66.67%，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组临床疗效结果比较

1.7.2 Western Blotting检测治疗前后MMP-9水平的变化 取治疗前、治疗28 d患者前臂外周血5 mL置于肝素钠包被的抗凝管中，用人淋巴细胞分离液分离出外周血单核细胞200 μL，加入100 μL裂解液进行细胞分裂，放入4 ℃振荡器中持续震荡30 min，并将液体用移液枪转移至事先预冷离心管，再次置于4 ℃离心机中以5 000 r/min转速进行离心15 min，用移液枪将上清液抽取至新的离心管中备用。利用BCA试剂盒测定蛋白浓度，并在100 ℃水浴中进行蛋白变性7 min，并计算上样量。事先配制好SDS-PAGE胶体，用移液枪将蛋白加之胶体中进行电泳，随后将蛋白转移至硝酸纤维膜上，随后用脱脂奶粉进行封闭2 h，用PBS清洗2次，10 min/次，加1∶500稀释的一抗(MMP-9)及内参抗体(β-acting，1∶3 000)室温孵育2 h，用PBS清洗2次，10 min/次，随后加入辣根过氧化酶HRP-二抗，室温下轻摇2 h取出继续PBS清洗2次，10 min/次，最后利用ECL显影，拍照，统计分析。

1.5 脱落与剔除标准 1)治疗过程中配合差者。2)患者自行退出本研究。3)出现严重并发症或并发症者。4)虽然完成试验，但服药量不在应服量的80%～120%范围内；5)泄盲或紧急揭盲的病例。

图1 2组患者25羟维生素D比较

2.3 2组MMP-9浓度变化 经过治疗后2组患者外周血MMP-9浓度均较治疗前下降，其中观察组下降的幅度高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见图2、表3。

(3)根据生产管理系统的数据，编制水泥生产流程的成本分布表、全月的成本总表，以完整体现水泥生产成本的分布情况。

图2 2组患者MMP-9 Western Blotting结果比较

3 讨论

慢性特发性荨麻疹是皮肤科常见疾患，全身性反复发作性风团伴皮肤瘙痒是其主要临床表征。目前慢性特发性荨麻疹的发病机制仍处于探索阶段，国内外均有文献显示组胺、白三烯、细胞因子等炎性反应介质的浓度变化在慢性特发性荨麻疹的发病中有重要作用，因此抗组胺药目前已然成为治疗慢性特发性荨麻疹的首选药物，同时联合激素、白三烯受体拮抗剂等辅助治疗，亦可获得理想疗效。然而临床上发现长期服用上述西药虽在短时间内可一定程度改善临床症状，但无法从根本上治愈慢性特发性荨麻疹。因此临床迫切需要一类即可理想改善临床症状又可减少不良反应的药物。近10余年，中药因其治疗效果佳、不良反应小逐渐进入临床工作者的视线。

慢性特发性荨麻疹属于中医学“瘾疹”“风疹”范畴，机体受七情内伤，致阴阳失衡，营卫不调，卫外不固，导致风邪侵袭机体诱发此病，而风为百病之长，善行而数变，因此可出现病情反复[5-8]。风邪与寒邪相搏结合而风寒之邪，风邪与热邪相搏结合而风热之邪，风寒及风热之邪留恋于肌肤皮毛腠理之间[9-10]。因此祛风止痒，并视不同证型临证加减，本研究使用桂枝汤对观察组患者进行干预，结果显示该汤药明显提高了临床疗效。桂枝汤具有祛风解表、调和营卫之功，直中慢性特发性荨麻疹的病因病机。方中桂枝为君药，助卫阳，通经络，解肌发表而祛在表之风邪，芍药为臣药，益阴敛营，敛固外泄之营阴。桂枝芍药合用可体现营卫同治，邪正兼顾，两药相辅相成，散中有收，组成了内调营卫、阴阳的基本结构。生姜辛温，可助桂枝祛风解肌之功，大枣甘平，既能益气补中，又可滋脾生津，甘草可调和诸药药性。本研究还根据不同的病症临证加减，予蝉蜕、防风等加强搜风祛风之功，生地黄、川芎、赤芍加强凉血活血作用，石膏、黄芩、栀子、连翘助化热之功，提高了临床疗效。

表3 MMP-9/内参(IOD比值)的情况

注：与对照组比较，*P<0.05

在对中药作用机制的进一步探讨中我们对25羟维生素D以及MMP-9这2项指标进行检测，结果发现加用桂枝汤组患者外周血25羟维生素D的浓度高于对照组，MMP-9的浓度低于对照组，这说明桂枝汤治疗慢性特发性荨麻疹的作用机制可能与上述2个因子有密切关联。25羟维生素D是机体主要代谢物，近年来25羟维生素D与过敏性疾病的关系逐渐受到重视，已有文献证实25羟维生素D的缺乏是诱发哮喘的主要危险因素，因此我们认为25羟维生素D浓度下降对于慢性特发性荨麻疹而言属于一种诱因[11-15]，其水平的变化诱发免疫炎性反应而导致此病。此外，我们还发现降低MMP-9的水平可一定程度改善慢性特发性荨麻疹的病情，有研究表明MMP-9可破坏细胞基膜，导致炎性反应细胞进一步侵润更深层次的组织，由此加剧本病。

总之，通过分子生物学层面的探析我们进一步证实桂枝汤治疗慢性特发性荨麻疹有明确临床疗效，并且安全可靠，临床建议进一步推广运用。

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CurativeEffectsofGuizhiDecoctiononChronicIdiopathicUrticariaandtheDetectionofSerumLevelsofMMP-9and25-hydroxyvitaminD

Li Chunniao1, Wang Liu2

(1DepartmentofDermatology,YanglingDemonstrationZoneHospital,Xianyang712100,China; 2DepartmentofDermatology,XianyangFirstPeople′sHospital,Xianyang712000,China)

Objective:To investigate the clinical curative effect of Guizhi decoction on chronic idiopathic urticaria, at the same time to observe the impact on matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) and 25-hydroxyvitamin D concentrations in the peripheral blood of the patients.MethodsA total of 60 cases of patients with chronic idiopathic urticaria who visited the dermatology clinic in our hospital included in the research were randomly divided into the control group and the observation group. The control group took loratadine 10 mg/times, 1 time/day, combined with cetirizine 10 mg/times, 1 time a day. The observation group had Guizhi decoction on the basis treatment of the control group. Both of the 2 groups had treatment for 28 days. The clinical curative effects of 2 groups after treatment was observed, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and protein immunoblot (Western Blotting) was used to observe the concentration changes of MMP-9 and 25-hydroxyvitamin D in the 2 groups before and after treatment.Results1) The total effective rate of the observation group was 86.67%, higher than that the total effective rate 66.67% of control group. The differences were statistically significant (P<0.05). 2) 25-hydroxyvitamin D concentration in the peripheral blood of the 2 groups increased after treatment, and the increasing trend of observation group was more significant. Compared with the control group, the difference was statistically significance (P<0.05); 3) The MMP-9 concentrations of peripheral blood of the 2 groups declined after treatment compared with before the treatment, and the falling range of the observation group was higher than control group. The differences were statistically significant (P<0.05).

Chronic idiopathic urticarial; Guizhi decoction; 25-hydroxyvitamin D; MMP-9

R285.6；R758.24

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.12.035

2014年陕西省科技计划项目(2014JM4100)

李春鸟(19810.06—)，女，硕士研究生，主治医师，研究方向：中西医结合皮肤病学，E-mail:781596021@qq.com

王镏(1976.02—)，女，本科，主治中医师，研究方向：中医皮肤与性病学及中医美容，E-mail：945852443@qq.com

(2017-05-11收稿 责任编辑：张文婷)