安徽省2016～2017年禽流感免疫抗体定点监测

王军 周迎春 何长生 王倩 沈艳 王维 （安徽省动物疫病预防与控制中心 230091）

禽流感是由正黏病毒科、流感病毒属、A型流感病毒引起的禽类烈性传染病[1]。1978年意大利就有发生禽流感的报道，当时叫真性鸡瘟[2]，根据禽流感病毒对易感禽致病性将其分为3类：高致病性—高毒力—主要包括H5和H7；低致病性—中低毒力—H9或其他型；无致病性—无毒力—各种亚型 （从H1～H15）。该病主要侵害禽类呼吸系统、消化系统及神经系统等，产生从无症状或温和症状到高度致死性的感染。在世界范围内，家禽中流行的主要有H5、H6、H7、H9等亚型。H5和H7亚型的某些毒株可以造成禽类很高的发病率和死亡率，被称为高致病性禽流感病毒，严重威胁养禽业的发展[3]，并对公共健康构成重大危害，已引起全球普遍关注。H9亚型禽流感引发家禽的致死率相对较低，但其造成的经济损失并不亚于高致病性禽流感，而且具有重大的公共卫生学意义[4]。疫苗免疫接种是当前预防和控制禽流感发生的最重要手段，为掌握安徽省禽流感免疫效果，2016～2017年在全省选取5个县 （市、区）设置固定监测点，开展禽流感免疫抗体定点监测与分析工作。

1 材料与方法

1.1 监测点的选择

综合考虑安徽省家禽养殖情况、流通模式及地理环境等特征，以养殖、屠宰、交易为3个主要监测环节，在宣州区、青阳县、太湖县3个县 （区）各选择4个不同规模的家禽养殖场作为养殖环节的禽流感定点监测点；将宁国市某家禽屠宰场设为家禽屠宰环节的禽流感定点监测点；将长丰县某畜禽交易市场设为家禽交易环节的禽流感定点监测点。

1.2 样品采集

将规模禽场、家禽屠宰场及交易市场按照存栏量不同，采用分层随机抽样的原理，使用Win Episcope 2.0流行病学分析软件中估计流行率 （Estimate Percentage）的抽样方法（预期流行率设为5%，可接受绝对误差为5%，置信水平为95%）确定监测数量和采样比例。大型养禽场 （家禽＞100000）每次采集血清样品100份，中型养禽场 （10000≤家禽≤100000）每次采集血清样品50份，小型养禽场 （家禽＜10000）每次采集血清样品35份。家禽屠宰场及家禽交易市场每次采集血清样品50份。鸡翅静脉采血，每份约2ml，自然凝固析出血清，离心分离后备用。

1.3 实验器材

单道、8道、12道移液器若干，90°96孔V型微量反应板若干，100ml、500ml量筒，微量振荡器。

1.4 检测试剂

禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原 （批号：2016004；2016012）、禽流感病毒H5亚型阳性血清 （批号：2015007；2016003）、禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原 （批号：2015003；2017001）、禽流感病毒H9亚型阳性血清 （批号：2015003；2016003），均由哈尔滨维科生物技术开发公司生产。

1.5 检测方法与判定标准

1.5.1 方法

参照2016及2017年国家动物疫病监测与流行病学调查计划指定的方法[5,6]，依据GB/T 18936-2003进行。采用血凝（HA）与血凝抑制试验 （HI），检测禽流感免疫抗体。

1.5.2 判定

HI抗体效价≥24判定为合格。存栏禽群免疫抗体合格率≥70%判定为合格。

2 结果

2016～2017年共检测血清样品1543份，H5及H9亚型禽流感免疫抗体平均合格率分别为91.83%和90.99%。结果见表1。

由表1可以看出，无论是2016年还是2017年，H5及H9亚型禽流感免疫抗体平均合格率均超过农业部规定的70%的标准，这表明安徽省近两年禽流感免疫效果总体较好。

对于H5亚型禽流感免疫抗体，所检测的1543份血清样品中：养殖场禽血清1344份，合格1257份，免疫抗体合格率93.53%；屠宰场禽血清100份，合格88份，免疫抗体合格率88%；交易市场禽血清99份，合格72份，免疫抗体合格率72.73%。结果见表2。

对于H9亚型禽流感免疫抗体，所检测的1543份血清样品中：养殖场禽血清1344份，合格1248份，免疫抗体合格率92.86%；屠宰场禽血清100份，合格84份，免疫抗体合格率84%；交易市场禽血清99份，合格72份，免疫抗体合格率72.73%。结果见表3。

由表2、表3知，交易市场禽的禽流感免疫抗体合格率相对较低，其中2016年交易市场禽的H5亚型禽流感免疫抗体合格率仅为69.39%，略低于农业部规定的标准。

3 讨论

3.1 规模养禽场免疫效果较好

根据监测结果，规模养禽场的禽流感免疫抗体合格率最高，表明免疫效果较好，这与养殖户饲养管理水平较高、重视免疫接种有关。每个养禽场都有各自的免疫程序，平时加强饲养管理、注重强化免疫、定期进行免疫监测，取得了较好免疫效果。

3.2 加大对家禽交易市场的监测力度

交易市场的家禽免疫抗体合格率相对较低，预示有禽流感发生的风险。鉴于当前的活禽交易市场同时存在多个经营档口，场地狭小，运输车辆与人员流动频繁等特点，禽类交易市场已成为禽流感病毒发生重组扩散的高风险区域。市场内多种禽类长期密集接触，同时处在高湿高热的环境，再加上消毒不及时、不彻底等，为禽流感病毒在动物之间传播创造了有利条件，活禽交易市场已成为我国禽流感病毒的重要集散地和疫病传播环节[7,8]。应加大对家禽交易市场的监测力度，增加监测频次，加强检疫工作，定期开展流行病学调查，以控制禽流感的发生和传播风险。

3.3 继续做好免疫抗体定点监测工作

抗体监测是检验免疫效果，掌握疫情动态最直接、最有效的方法，不仅可以及时了解免疫后的免疫效果、指导制定和调整免疫程序，而且可以提示疫病发生的风险[9]。禽流感疫苗免疫是我国防治禽流感采取的主要措施之一，已在全国范围内推行。做好禽流感免疫抗体监测工作，可以及时掌握禽群免疫状态，有效分析评估免疫效果，为禽流感疫情预警预报提供技术支撑。继续做好定点监测工作，通过定时、定点、长期、持续的监测，做到早发现、早报告、早处理、早控制，可有效防止禽流感疫情的发生。

表1 2016～2017年H5及H9亚型禽流感免疫抗体检测结果

表2 不同禽别H5亚型禽流感免疫抗体合格率

表3 不同禽别H9亚型禽流感免疫抗体合格率

[1]殷震,刘景华.动物病毒学[M].第二版,北京：北京科技出版社,1997.

[2]赵君和.2016年禽流感的流行特点及防控策略[J].中国畜牧兽医文摘,2016,32(1):2-3.

[3]王军,陈曦,周迎春,等.安徽省2014～2015年禽流感免疫抗体集中监测分析[J].中国动物检疫,2016,33(6):15-17.

[4]蔡扩军,成进.H9亚型禽流感的危害与防控[J].兽医导刊,2016(5):22-24.

[5]农业部.关于印发《2016年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》的通知[Z].农医发〔2016〕11 号,北京：农业部，2016-03-30.

[6]农业部.关于印发《2017年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》的通知[Z].农医发〔2017〕7 号,北京：农业部，2017-03-14.

[7]贾伟新,廖明.从活禽交易的干预效果看我国禽流感的流行与防控[J].中国家禽,2015,37(22):1-3.

[8]曹蓝,陈艺韵,鲁恩洁,等.广州市2015年禽类市场禽流感流行病学监测[J].中国动物检疫,2016,33(8):8-12.

[9]王新慧,黄军军.当前免疫抗体监测工作存在的问题及建议[J].畜禽业,2016(11):35-36.