新生儿脐血的网织血小板与产妇全血的网织血小板的相关性

李可成，刘艳萍，张华玲

(1.柳州市人民医院检验科，广西 柳州 545006；2.柳州市中医医院肺病科，广西 柳州 545001)

网织血小板(Reticulated platelet，RP)在骨髓中能够分泌到人体外围血液内也即人体血循环内最为年轻也是尚未成熟状态的血小板，是一种网络状的染色物。该指标所反映的是骨髓内血小板的生成状态。它在血小板削减性病症的诊治与鉴别诊治方面，发挥着关键性的功能。由于母亲与胎儿的血流于胎盘内存在着紧密的组织学关系，产妇全血网织血小板能够经由“血-胎盘屏障”的渠道转移至正处于生长发育的胎儿体内[1]。本研究旨在分析是新生儿脐血的网织血小板与产妇全血的网织血小板的相关性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：随机选取我院的年龄在26～38岁的身体健康的产妇100例为研究对象，其中孕周37～42周为满足足月妊娠的产妇95例，不足37周属于早产孕妇5例(注：本试验中孕周都不低于35周)。新生儿男55例,女45例；平均体重(3 407.36±438.41)g，其中2.5～4.0 kg(即体重正常的新生儿)74例(其中，足月的新生儿71例，早产儿3例)，不足2.5 kg(即低体重的新生儿)10例(其中，足月的新生儿7例，早产儿3例)，超出4.0 kg新生儿18例[2]。

1.2仪器设备：Sysmex XN-9000全自动血液体液分析仪及其配套原厂试剂及其校准品和质控品。

1.3测定方法：孕妇入院待产时,使用无菌一次性注射器留取2 ml孕妇静脉血,纳入产妇组；分娩时留取2 ml脐静脉血,纳入新生儿脐血组；均用EDTA抗凝,颠倒混匀。通过使用Sysmex XN9000 PLT-F通道进行检测，Fluorocell PLT 为 PLT-F 通道检测专用荧光染料，高特异性(与CD41/61免疫学PLT检测相当)，静脉血在 CBC+DIFF+PLT-F模式下进行检测，网织血小板以IPF(%)由配套软件自动计算得出。

2 结果

100例产妇全血网织血小板和新生儿脐血的网织血小板无论是RP%平均值还是数量而言，差异均有统计学意义(P<0.05)，且新生儿脐血中的网织血小板含量要远低于产妇全血的网织血小板的含量，见表1。通过相关性研究发现，100例产妇全血网织血小板和新生儿脐血的网织血小板之间RP%平均差异4.124 92，标准误1.761 33，P=0.133，两者并不存在着内在的相关性(P>0.05)。

品名例数RP%平均值RP(×109/L)产妇全血网织血小板10012.61±2.1314.32±2.41新生儿脐血网织血小板1009.32±3.3132.15±3.07P值0.0020.001

3 讨论

根据相关的研究表明，网织血小板内胞浆留有不少的mRNA与粗面内质网，能够保留并合成不多的蛋白质性能，其对凝血酶原受体激动肽(TRNP)的刺激会发生更为明显的反应性，而膜外表能够表达出更为丰富的CD62P，即凸显出止血的活性。由于其体积比较大，TO能够通过膜和浆中的RNA发生特异性结合，同时在很大程度上强化荧光的强度，从而有助于开展流式细胞仪的测试。出于确定所检测的细胞是属于网织血小板，一般借助于CD41加以测定[3-4]。在检测网织血小板的过程中，RP网络状的结构属于细胞质内所残留的RNA，因为网络状的结构并不大，同时数量不多，在一般的光镜下测试时并不容易，因此，在测定RP 检时，在很长的一段时期中都没有被使用于临床学内。1986 年，Lee 等学者发现了可以和活细胞RNA物质相融合的荧光色素-噻唑橙(Thiazole orange,TO)，并在4年之后，运用到作RNA荧光的染料物质，借助于流式细胞仪则能够容易地测定包括RNA的血小板，据此构建起RP 智能化的计数方法。该方法虽然比较地精确，然而试验周期长，同时，结果也容易受到标本内网织红细胞所产生的荧光影响。Richards 等学者对以上方法加以改进，然而仍旧存在着操作流程过于复杂与费时等不足之处。渡道清明等学者构建起基于奥黄 (AuramineO,AO)当做RNA主要染料的RP智能化计数法，此法有着良好的精确度，同时所制定的标本能够维持在1/2 d。其最大的特征在于测定外周血标本所花费的时间只有78s。从而为临床学的应用提供了有利的条件。外周血RP的测定，主要有助于血小板减少症的病因学诊断，为生成障碍或破坏过多，可作为骨髓移植、造血促进因子使用和骨髓抑制后的骨髓血小板造血恢复的监控指标[5]。

就新生儿而言，虽然胎儿是母亲身体的一部分，通过脐血和产妇相联系起来，但由于胎盘具有屏障的功能，因此新生儿的脐血网织血小板比较地稳定，并不受到妊娠与生产的影响。同时，健康新生儿的RP与孕龄有关，孕龄<30周的新生儿RP为(8.7%±4.9%)，明显高于>36周新生儿RP(3.9%±2.3%)和30～36周的新生儿RP (4.5%±1.6 %)。患免疫性血小板减少症的足月新生儿RP则明显高于健康足月新生儿，前者RP达(38.3% ±23.1%)，而在一名血小板生成减低的新生儿血中其RP百分率(1.6%)和绝对数均明显降低。因此作者认为测定血中RP值有助于评价新生儿血小板减少症的原因。

新生儿脐血的网织血小板与产妇全血的网织血小板并不存在关联性，且新生儿脐血网织血小板不会受到孕妇的影响，处于稳定的状态。

4 参考文献

[1] INGRAM M，Coopersmlth A.Reticulated platelets following acute blood loss[J].Br J Haematol，2014，17(3)：225.

[2] 宋红蕾，冯 萍，朱雪明.网织血小板与MPV、血小板数量的关系探讨[J].临床输血与检验，2014，(62)：91.

[3] AULT KA，KNOWLES C.In vlvo biotinylation demonstrates that reticulated platelets are the youngest platelets in circulation[J].Exp Hematol，2015,23(9)：996.

[4] BUTKIEWICZ AM，KEMONA H，DYMIC KA，PIEKARSKA V，et al. P1atelet count，mean platelet volume and thrombocytopoi-ic indicesin healthywomen andmen[J].Thromb Res，2015，31(8)：30.

[5] Kienast J，Schmitz G.Flow cytometric analysis of thiazole orange uptake by platelets：a diagnostic aid in the evaluation of thrombocytopenic disorders[J].Blood，1990，75(1):116.