离子色谱法测定郁李仁药材中的二氧化硫残留量

王佳慧 夏洋

郁李仁（semen pruni）味辛甘苦、性平，具有润肠通便、利水消肿之功，临床治疗便秘、水肿和小便不利等症，疗效良好[1]。中药常熏硫来防霉防蛀，熏硫可能改变药的材性状和成分[2-3]，二氧化硫残留还可能危害人体健康[4-5]。我国药典中规定天麻等十种中药材的二氧化硫残留应低于400 mg/kg，其他中药材应低于150 mg/kg[6-7]。目前还没有用离子色谱法测定郁李仁中二氧化硫残留量的文献报道。本文用此法测定郁李仁中二氧化硫残留量，可避免酸碱滴定法测定带来的误差。本法测定结果可靠，测试时间短，检出限低，是测定郁李仁中二氧化硫残留量的有效方法。

1 仪器与方法

1.1 仪器

Milli-Q超纯水机（Integral 15型，美国millipore公司）；电子分析天平（瑞士 METTLER-TOLEDO公司）；ICS-90 离子色谱仪（美国戴安公司）。

1.2 试剂

硫酸根离子标准溶液（1 mg/ml，中国计量科学研究院，批号：GBW（E）080266）；超纯水（电阻率18.2 MΩ/cm）；其他使用的试剂均为分析纯。郁李仁（购自沈阳市的中药药房），取已知未熏硫的郁李仁自制熏硫样品。

1.3 试验方法

1.3.1 色谱条件 色谱柱：Dionex Ionpac离子色谱柱（AS11A型）；流速1.0 ml/min；柱温30 ℃；流动相：12 mmol/L KOH溶液；进样量 20 μl。

1.3.2 熏硫样品的制备 把郁李仁均匀放在通风橱内的架子上，将硫磺点燃放入通风橱密闭24小时，制备熏硫郁李仁。

1.3.3 供试液的制备 将郁李仁粉碎，过二号筛，精密称取10 g装入水蒸汽蒸馏装置，加入50 ml水和5 ml盐酸，密封容器，开始蒸馏。配制3% H2O2作为接收液，接收至接近100 ml停止蒸馏，用超纯水定容，以0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液，用离子色谱测定其中的硫酸根，再换算出二氧化硫含量。熏硫郁李仁同法处理制备供试液。

2 结果

2.1 专属性

将样品供试液依据色谱条件分析，供试液的其他成分不干扰硫酸根的测定，硫酸根离子的保留时间约7.52 min，理论塔板数大于2 000，郁李仁样品供试液的离子色谱图，见图1，二氧化硫残留以硫酸根离子的形式定量，硫酸根色谱峰与相邻峰的分离度大于1.5。

2.2 线性范围

采用外标法定量，将硫酸根标准品溶液稀释成浓度为0.5 mg/L、1.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、25.0 mg/L和50.0 mg/L的标准品溶液，经离子色谱仪分析，测定硫酸根离子色谱峰面积，以硫酸根离子的质量浓度C（mg/L）为横坐标，硫酸根离子的色谱峰面积A为纵坐标，进行线性回归。标准曲线方程为A=0.112 6C-0.031 5（r=0.999 8），硫酸根离子的线性范围在0.5～50.0 mg/L内呈良好的线性关系。

图1 硫酸根离子标准品溶液（A）和熏硫郁李仁（B）离子色谱图

2.3 定量限和检测限的测定

将硫酸根标准品溶液逐级稀释，测量出3倍基线噪音信号时的硫酸根离子浓度，作为方法的检测限，测量出10倍噪音信号时的硫酸根离子浓度，作为方法的定量限。结果表明，二氧化硫的检测限和定量限分别为0.08 mg/L和0.27 mg/L。

2.4 精密度和重复性试验

以5.0 mg/L的硫酸根标准溶液计算精密度，依法分析测定6次，计算精密度，取自制熏硫郁李仁样品，各制备6份供试品溶液，测定计算重复性。结果硫酸根离子峰面积的RSD%为1.21%，熏硫郁李仁样品的RSD为4.16%，表明方法的精密度和重复性良好。

2.5 稳定性试验

将制备好的熏硫郁李仁样品供试液，分别在0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h进样，记录峰面积。结果峰面积RSD为4.68%，表明供试液在24 h内具有良好的稳定性。

2.6 回收率试验

以1号郁李仁样品进行回收率试验，精密称取10 g样品，分别加入2.0 ml、4.0 ml和8.0 ml的无水亚硫酸钠溶液，无水亚硫酸钠溶液中相当于含有116 mg/L的二氧化硫，制成含高中低3个浓度的样品，每个浓度制备3份样品，按照2.3项下制备供试液，离子色谱分析，计算回收率。结果郁李仁样品在0.23 mg、0.46 mg和0.93 mg三个水平的平均回收率在98.4%～101.6%之间，RSD小于5%。

2.7 样品含量测定

采用本方法对采集的6份样品、2份自制熏硫郁李仁样品进行测定，结果6份采集样品均未检出二氧化硫，而自制熏硫郁李仁样品中二氧化硫残留量为45.308 mg/kg和42.662 mg/kg。

3 讨论

3.1 中药材熏硫对药性的影响

中药材常熏硫来防腐防虫蛀，在硫磺熏蒸时会有一定数量的硫附着在药材表面，可能会影响中药材本身的药性[2]。硫磺性温味酸，有小毒，有益火助阳之功，熏硫后的中药材如用于益火壮阳的方剂可起到协同的功效，反之则会降低治疗效果甚至起反作用[3-5]。因此，需要严格控制中药材中的二氧化硫残留量。

3.2 二氧化硫残留量测试方法选择

我国2015年版药典中规定了三种测定二氧化硫残留量的方法，即酸碱滴定法（第一法）、气相色谱法（第二法）和离子色谱法（第三法）[7]。目前，第一法为常用方法，但对郁李仁等含有苦杏仁苷化合物的中药材容易误判，这是由于苦杏仁苷在酸性环境中会水解产生氰化氢，也会消耗碱液[8]。本文采用离子色谱法测定郁李仁的二氧化硫残留量，可避免苦杏仁苷带来的假阳性干扰。

3.3 离子色谱分析条件的优化

参考文献方法对分析条件进行优化[8-15]，考察了10 mmol/L、12 mmol/L和15 mmol/L的KOH 溶液为流动相时硫酸根离子分离情况，浓度为12 mmol/L时硫酸根离子与相邻色谱峰可完全分离。考察了柱温变化对检测结果的影响，柱温升高会使得硫酸根离子色谱峰保留时间提前，幅度不大，为了兼顾方法的实用性，本法最终选择30 ℃作为试验用柱温条件。考察了0.8 ml/min、1.0 ml/min和1.2 ml/min三个流速对测量结果的影响，结果流速1.0 ml/min时色谱峰峰形较好。以优化后的色谱条件分析，供试液的其他成分不干扰硫酸根离子测定，与相邻峰间分离度大于1.5，可用于郁李仁药材的二氧化硫残留量测定。

3.4 建立的郁李仁药材二氧化硫残留量测定方法评价

建立的离子色谱法分析郁李仁药材中的二氧化硫残留量，方法稳定可靠、重现型好，适用于郁李仁药材的二氧化硫残留量控制。通过分析多批郁李仁样品和熏硫后的郁李仁样品，表明本法分析郁李仁药材中的二氧化硫残留，测定结果不受药材中其他物质的干扰，方法简便快速，可用于控制郁李仁药材的质量。