血清淀粉样蛋白A及CD64在新生儿败血症诊断中的价值

危夷　严争　林福忠

【摘要】 目的：研究血清淀粉样蛋白A（SAA）及中性粒细胞CD64早期临床诊断新生儿败血症及疗效评价的意义。方法：选择福建医科大学附属福州市第一医院2016年3月-2017年9月收治的新生儿败血症患儿56例为观察组，选择同期非感染新生儿42例为对照组。采用胶体金法和流式细胞分析术分别检测SAA和CD64，观察这两项指标对于新生儿败血症诊断的特异性、敏感性、阴性、阳性预测值及约登指数。结果：观察组治疗前SAA、CD64值明显升高，与治疗后、对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05），联合早期诊断新生儿败血症优于单个指标独立诊断。结论：SAA和CD64联合测定在新生儿败血症早期诊断具有较高的敏感性及特异性，同时有助于判断疗效及预后。

【关键词】 新生儿败血症； 血清淀粉样蛋白A； 中性粒细胞CD64

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2018.23.020 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2018）23-00-03

【Abstract】 Objective：To evaluate the therapeutic effects of serum amyloid A（SAA） and neutrophil CD64 in early diagnosis of neonatal sepsis.

Method：Fifty-six cases of neonatal sepsis admitted to the Fuzhou First Hospital Affiliated to Fujian Medical University from March 2016 to September 2017 were selected as the observation group，and 42 non-infected neonates were selected as the control group.The DIGFA method and flow cytometry（FACS） were used to detect levels of SAA and CD64，respectively.The specificity，sensitivity，negative，positive predictive value，and the Youden index in both groups were compared.Result：Before treatment，SAA and CD64 levels in the observation group were significantly increased compared with the control group，and the differences were statistically significant（P<0.05）.It is believed that the early diagnosis of neonatal sepsis with multiple indicators was better than that of single indicator.Conclusion：The combined determination of SAA and CD64 levels has higher sensitivity and specificity in the early diagnosis of neonatal sepsis，which is helpful to evaluate the efficacy and prognosis.

【Key words】 Neonatal sepsis； Serum amyloid A； Neutrophil CD64

First-authors address：Fuzhou First Hospital Affiliated to Fujian Medical University，Fuzhou 350009，China

新生儿败血症是发生于新生儿期的严重全身感染性疾病，是指病原体（主要是细菌，也可为病毒、真菌等）侵入新生儿血液循环，并且在其中生长、繁殖、产生毒素引起全身炎症反应综合征[1]。新生儿败血症早期症状不典型，诊断困难，但该病进展迅速，病情险恶。血培养是目前诊断新生儿败血症的金标准，但血培养周期长、阳性率低。SAA是一种急性时相反应蛋白，CD64是一类中性粒细胞表面标记物[2]，在新生儿感染性疾病早期即可明显升高。本文通过观察新生儿败血症患儿血中SAA与CD64治疗前后动态变化，并与非感染新生儿进行对比，探讨其在早期诊断、疗效判断中的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般資料

选择福建医科大学附属福州市第一医院2016年3月-2017年9月确诊为新生儿败血症的56例患儿为阳性观察组，临床诊断标准参照2011年《实用新生儿学（第4版）》[3]；观察组中男27例、女29例，胎龄35～41周，日龄1～6 d。对照组42例，为同期出生的非感染新生儿（病种包括：湿肺11例、新生儿出血症9例、糖尿病母亲的婴儿13例、新生儿低血糖症9例），对照组中男21例、女21例，胎龄36～40周，日龄1～5 d。两组均排除了先天性心脏病、消化道畸形、严重肝肾疾病及遗传与代谢性疾病，同时两组患儿的胎龄、日龄、性别等基本资料差异无统计学意义（P>0.05）。本研究所有新生儿采血检测均获家长知情同意，并经过医院伦理委员会审查批准。

1.2 方法

观察组及对照组新生儿均在入院当日未使用任何药物治疗前抽取静脉血进行SAA、CD64检测，观察组于抗生素（头孢类、碳青霉烯类等）及对症治疗5 d后复查。SAA采用胶体金法进行测定（仪器及试剂盒购自上海市奥普生物医药有限公司），阳性诊断阈值为10 mg/L。流式细胞术检测全血CD64，采用Coulter Immunotech公司生产的异硫氰酸荧光素标记的CD64单克隆抗体，每个样本检测104个细胞，经计算机分析后得出每个样本CD64的平均荧光强度（mean fluorescence intensity，MFI），阳性诊断阈值为35 MFI。所采用的阳性诊断阈值为临床常用诊断标准。

1.3 观察指标

观察新生儿败血症组患儿治疗前后SAA、CD64动态变化，并与对照组比较。根据阳性诊断阈值，计算各组SAA、CD64检测的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值，再计算约登指数（约登指数=敏感性+特异性-1）。

1.4 统计学处理

采用SPSS 13.0统计学软件进行分析和处理，计量资料以（x±s）表示，采用独立样本t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清SAA、CD64水平

观察组新生儿外周血中SAA、CD64含量明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）；经治疗，观察组恢复期SAA、CD64明显下降，与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 SAA、CD64诊断价值

SAA、CD64联合检测对败血症的诊断效能优于单独检测，诊断指标的敏感性、特异性、阳性、阴性预测值及约登指数，见表2。

3 讨论

新生儿败血症是新生儿时期的危重症，出生体重越低，败血症发病率越高。临床表现为反应差、少吃少哭、体温不升或发热等症状，早期症状常不典型，缺乏特异性，容易漏诊；新生儿的免疫系统尚未完全发育，特异性免疫及非特异性免疫功能低下，对感染的局限能力差，如诊疗不及时，可引起休克、化脓性脑膜炎等并发症，是引起新生儿死亡的重要原因之一。目前通常采用血培养的方法对新生儿败血症进行确诊，但血培养周期长、一般需要5～7 d才能出结果，采血量大、阳性率低，且易受抗菌药物等因素影响，不能达到早期诊断的目的。寻找快速而可靠的炎症反应标记物，不仅有助于新生儿败血症早期临床诊断、改善预后及降低败血症死亡率，而且可以帮助指导医师调整治疗方案。

SAA是一类多基因编码的多形态蛋白家族，分子量12～14 KDa，

基因位于第11号染色体上，与C反应蛋白（CRP）一样，同属于急性时相反应蛋白。在生理情况下，血液中的浓度极低，1～5 mg/L；当机体发生急性炎症、感染时，受白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等炎症介质的调控，由肝脏的巨噬细胞和纤维母细胞短时间大量分泌，故血液中的SAA含量迅速上升，通常在5～6 h可达最高值，为正常值的1 000倍以上[4]，其升高程度与病情严重程度呈正相关。与CRP白相比较，SAA在病毒和细菌感染中均明显升高，而在病毒感染时，CRP不升高或升高不明显[5]。SAA半衰期较短，只有50 min左右[6]，当感染控制、症状缓解后，在疾病的恢复期迅速下降，因此，血清SAA水平是反映新生儿感染性疾病的灵敏指标，有助于感染的早期诊断、病情严重程度评估、疗效判断及转归预测。

中性粒细胞CD64，即IgG Fc片段受体1（FcγR Ⅰ），属于免疫球蛋白超家族。正常情况下，CD64在外周血中主要表达于单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞的表面，而在中性粒细胞表面仅少量表达、约1000分子/细胞；当机体患感染性疾病时，在粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、细菌细胞壁的脂多糖（LPS）和干扰素-γ（IFN-γ）等因子作用下，中性粒细胞表面CD64表达迅速升高[7]，CD64在新生儿败血症发生后0～24 h均可保持较高水平，表明CD64在败血症早期的敏感度高[8]。刺激过后，CD64的表达可迅速恢复至正常水平。CD64能够同时介导体液免疫以及细胞免疫[9]，CD64能够识别IgG的Fc段，在抗原递呈、细胞吞噬、清除免疫复合物起到关键性作用，还能释放炎性因子[10]。中性粒细胞能依靠其表面的CD64参与抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（ADCC），能够促进巨噬细胞吞噬和清除免疫复合物以及颗粒性抗原。中性粒细胞CD64与新生儿感染程度的平行性好[11]，影响因素少，稳定性高，对于感染的诊断具有很高的敏感性和特异性，新生儿采血相对困难，但少量血液标本可检测出CD64水平，为临床诊疗提供指导。Fjaertoft等[12]研究表明，在急性细菌感染的早期阶段，新生儿细菌感染组CD64明显高过非感染组，而且感染组中CD64水平在早产儿、足月儿、年长儿与成人之间无差异，CD64表达在革兰阳性菌和革兰阴性菌感染之间无差异，说明CD64可以作为新生儿尤其是早产儿细菌感染的一个有效指标。Allen等[13]认为，病毒感染或者非感染性的炎性反应均不会引起CD64的表达增加，由此说明，CD64在诊断新生儿细菌感染具有很高的特异性。

综上所述，联合检測SAA、CD64对败血症早期诊断具有较高的敏感性和特异性，在疾病恢复期，SAA及CD64可迅速降至正常水平，有助于判断疗效及预后。

参考文献

[1]王卫平，毛萌，李廷玉，等.儿科学[M].第8版.北京：人民卫生出版社，2013：127-129.

[2] Jia L Q，Shen Y C，Hu Q J，et al.Diagnostic accuracy of neutrophil CD64 expression in neonatal infection：a meta-analysis[J].Journal of International Medical Research，2013，41（4）：934-943.

[3]邵肖梅，叶鸿瑁，丘小汕，等.实用新生儿学[M].第4版.北京：人民卫生出版社，2011：340-342.

[4] Lannergard A，Larsson A，Friman G，et al.Human serum amyloid A（SAA） and high sensitive C-reactive protein（hsCRP） in preterm nevborn infants with nosocomial infections[J].Acta Paediatr，2008，97（8）：1061-1065.

[5] Urieli-Shoval S，Linke R P，Matzner Y.Expression and function of serum amyloid A，a major acute- phase protein，in normal and disease states[J].Curr Opin Hematol，2000，7（1）：64-69.

[6]劉燕丽，刘勋，步军.血清淀粉样蛋白A在儿童感染性疾病早期诊断中的价值[J].中国卫生检验杂志，2017，27（24）：3596-3598.

[7] Hoffmann J J.Neutrophil CD64：a diagnostic marker for infection and sepsis[J].Clin Chem Lab Med，2009，47（8）：903-916.

[8] Streimish I，Bizzarro M，Northrup V，et al.Neutrophil CD64 as a diagnostic marker in neonatal sepsis[J].Pediate Infect Dis J，2012，31（70）：777-781.

[9] Fossati G，Bucknall R C， Edwards S W.Fc gamma receptors in autimmune diseases[J].Clin Invest，2001，31（9）：821-831.

[10] Fossati G，Bucknall R C，Edwards S W.Fc gamma receptors in autimmune diseases[J].Clin Invest，2001，31（9）：821-831.

[11] Wagner C，Deimh R，Dendleh B，et al.Expression Patterns of the Lipopolysaccharide Receptor CDI4，and the F[gamma] Receptors CDI6 and CD64 on Polymorphonuelear Neutrophils：Data from Patients with Severe Bacterial infections and Lipopolysaocharide-Exposed Cells[J].Shock Society，2003，19（1）：5-12.

[12] Fjaertoft G，Hakansson L，Ewald U，et al.Neutrophils from term and preterm newborn infants express the high affinity Fcgamma-receptor I（CD64） during bacterial infections[J].Pediatr Res，1999，45（6）：871-876.

[13] Allen E，Bakke A C，Purtzer M Z，et al.Neutrophil CD64 expression：distinguishing acute inflammatory autoimmune disease from systemic infections[J].Ann Rheum Dis，2002，61（6）：522-525.

（收稿日期：2018-03-30）