痰标本真菌涂片对侵袭性肺部真菌感染的诊断价值

刘 雯

（本溪市第一人民医院检验科，辽宁 本溪 117002）

真菌感染在近些年的发病趋势呈升高之势，其中以白色念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、曲霉菌最为常见[1]。侵袭性肺部真菌感染是一种因真菌感染肺部而出现的疾病，不包括真菌过敏或真菌寄生引起的肺部过敏反应或炎症，严重情况下可造成肺组织坏死或经血行播散发生转移[2]。侵袭性肺部真菌感染由于缺乏典型的临床表现与影像学特征，常常不能早期明确病原学诊断，从而延误了治疗，影响疾病的转归与预后。本研究旨在探讨痰标本真菌涂片对侵袭性肺部真菌感染的诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择2016年1月至2017年8月84例侵袭性肺部真菌感染患者，均符合《侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)》，其中男47例，女37例，年龄27～66岁，平均年龄（40.52±9.88）岁。

1.2 方法：所有受检者均采集晨起空腹留取咳出的第一次痰，具体方法：首先将注射用糜蛋白酶（上海第一生化药业有限公司，国药准字H31022113）4000U溶于0.9%生理盐水10 mL中进行雾化吸入，用一次性吸痰管（杭州美泰医疗器械有限公司）吸痰，对痰少的患儿轻叩胸骨柄上方，以促进痰液排除。用标本瓶收集痰液，避免痰液内有唾液、鼻涕、胃内容物。半小时内送检，以避免原始菌死亡或变质。经判断所有痰标准均达到合格标准。按《全国临床检验操作规程》，30°下将痰标本在培养基（济南百博生物技术公司）中培养24 h，在电子显微镜下挑出真菌孢子，然后鉴定菌种，以ATCC14053白色假丝酵母菌（中国食品药品检定研究院）为质控菌株。每天观察培养结果，真菌培养2次以上均为阳性判断为真菌培养阳性，如果至5 d后仍无真菌生长则为阴性。

2 结果

84例痰真菌培养阳性69例（82.1%），共分离出真菌77株，其中白色念珠菌38株（49.4%），光滑念珠菌19株（24.7%），光滑念珠菌11株（14.3%），克柔念珠菌7株（9.1%），热带念珠菌2株（2.6%）。

3 讨 论

肺组织具有高容量、低压力、低阻力的特点，十分容易发生真菌感染。侵袭性真菌感染常是一些肿瘤、滥用广谱抗生素以及长期大剂量使用激素、免疫抑制剂等患者的并发症。据文献报道，急性白血病患者继发急性白血病的比例达到10%～25%，病死率高达60%[3]。研究表明，高龄、≥3种广谱抗生素使用超过2周、侵入性操作、多脏器功能障碍、低白蛋白血症是侵袭性真菌感染的独立危险因素[4]。

侵袭性真菌感染患者的临床表现缺乏特异性，诊断困难，一般只能“疑诊”或“拟诊”，常常对于发热、中性粒细胞减少，而在使用广谱抗生素治疗后无效的患者，采取的是经验性用药，病死率高，感染念珠菌的病死率达到30%～40%，而感染曲霉菌的病死率更高大50%～100%[5]。痰标本真菌涂片是诊断侵袭性真菌感染的不可或缺的手段，《侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则(草案)》将痰标本真菌涂片作为诊断侵袭性真菌感染的微生物学证据之一。本研究结果显示，84例痰真菌培养阳性率为82.1%，共分离出真菌77株，其中以白色念珠菌最多。念珠菌是人类口腔中的正常定植菌，研究表明，在正常人的痰标本中有20%～55%可分离出少量念珠菌，主要通过吸入与血源性播散进行感染。其次，在侵袭性真菌感染患者痰标本中还可分离出光滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌，分别为24.7%、14.3%、9.1%。可见，痰标本真菌涂片可为侵袭性肺部真菌感染提供重要的诊断依据，临床意义价值高。不过，留取痰标本的时间对培养结果有一定的影响。一般情况下，晨起留取痰标本具有一定的优势，一方面是晨起空腹唾液少，以及无呕吐，因而能够减少影响因素的干扰；另一方面，夜间迷走神经兴奋，产生的痰液量较多，清晨交感神经兴奋，所以更便于痰液的排出，痰液比较黏稠，其中含有的细菌数较多，所以有利于提高真菌培养的阳性率[5]。而其他时间留取痰标本容易受到唾液、呕吐物等的污染，从而阳性真菌培养结果。选择适合的标本采集时间有助于提高真菌培养阳性率。

侵袭性肺部真菌感染的痰培养、血培养、胸腔积液培养等的阳性率整体较低，以及真菌G试验和GM试验的特异性也不高，应结合患者的症状、体征、自身危险因素等进行综合的判断，以达到早期诊断。