胆固醇24S-羟化酶基因rs754203多态性与阿尔茨海默病发病风险的Meta分析

胡平 冯国昌 张华强

(青岛市疾病预防控制中心 青岛市预防医学研究院，山东 青岛 266000)

阿尔茨海默病(AD)是一种伴有认知、行为和功能失常的进行性的神经变性疾病，是老年痴呆的一种最常见的形式〔1〕。AD致残率和死亡率高，已成为继心血管病、脑血管病和癌症之后威胁老年人健康的第四大杀手〔2〕。研究表明，高胆固醇代谢是AD的一个风险因素。胆固醇24S-羟化酶(CYP46A1)基因是细胞色素P450家族成员，是一个与脂代谢关系密切的基因〔3〕。该基因的产物CYP46酶，是颅内胆固醇转化为24S-羟化胆固醇过程中的限速酶〔4〕。因此，CYP46A1基因可能涉及AD的发病机制。

目前关于CYP46A1基因第二个内含子rs754203多态性与AD关系的研究比较受关注，但研究结果并不完全一致。本研究搜集了较为全面的文献，对相关病例对照研究(RCT)进行Meta分析，定量评价CYP46A1基因rs754203多态性基因与AD发病风险的相关性。

1 资料与方法

1.1检索策略 计算机检索PubMed、中国知网、万方数据库及维普数据库，搜集有关CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险相关性的RCT，检索时限为建库至2017年12月。检索采用主题词和自由词结合的方式进行。检索语种限定为中文和英文。中文检索词包括胆固醇24S-羟化酶、CYP46A1、rs754203、基因多态性、阿尔茨海默病；英文检索词包括：cholesterol 24S-hydroxylase、CYP46A1、rs754203、polymorphism、Alzheimer′s disease。

1.2文献筛选

1.2.1纳入标准 ①公开发表的关于CYP46A1基因rs754203多态性与AD的RCT；②文献中可直接查到或可以间接推算确切的基因型频数；③诊断标准明确，采用美国国立神经病学及语言障碍和脑卒中研究所——老年痴呆及相关学会(NINCDS-ADRDA)标准、精神疾病诊断和统计手册(DSM-Ⅳ)、修订版精神疾病诊断和统计手册(DSM-Ⅲ-R)、阿尔茨海默病联合登记协作组织(CERAD)标准；④纳入研究的样本数据明确且可靠；⑤对同一人群或重复文献的报道选择文献质量较高的一篇。

1.2.2剔除标准 ①综述、会议摘要类文献；②未涉及CYP46A1基因rs754203多态性基因频率的研究；③无法获取有效数据的文献；④重复发表文献。

1.3文献筛选与资料提取 由2位研究者根据纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料，如遇分歧则由第三方协助裁定。资料提取内容：第一作者的姓名，发表年限，研究人群的种族和国家，病例组及对照组的基本信息(包括性别分布、平均年龄、诊断标准、基因型及基因分布、样本量)，对照组的基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡(HWE)法则。

1.4统计分析 应用STATA11.0软件。①对各纳入研究中对照组基因型分布进行Hardy-Weinberg遗传平衡检验，计算各组的χ2值，以P<0.05为检验水准。②通过计算 3种基因型〔等位基因模型(C vs T)、显性模型(CC+CT vs TT)、隐性模型(CC vs CT+TT)〕获得合并比值比(OR)值及其 95%可信区间(CI)，用以评估CYP46A1基因rs754203多态性和AD发病风险之间的关联强度，并结合人群种族情况进行亚组分析。③用I2统计量检验法评估不同研究间异质性，对于异质性可以忽略的情况(I2值<50%)，采用固定效应模型进行统计量的合并；否则采用随机效应模型。④应用剔除法进行敏感性分析，对剩余研究重新合并效应量，观察结果的稳定性。⑤绘制漏斗图评估发表偏倚。

2 结 果

2.1文献检索情况 文献检索流程见图1，最终纳入22篇文献〔5～26〕26组数据进行Meta分析。纳入文献研究对象包括病例组4 956例，对照组4 994例，其中8组数据是关于中国人的研究，16组数据是关于高加索人的研究，剩余的2组中1组是非裔美国人，另1组研究人群的种族不明。见表1。

图1 文献筛选流程及结果

2.2Meta分析结果

2.2.1等位基因模型(C vs T) 异质性检验I2=54.5%，故采用随机效应模型进行分析，Meta分析结果显示:在等位基因模型下，CYP46A1基因rs754203多态性与AD的发病无明显相关性〔OR= 0.976，95%CI(0.884～1.077)〕。去除对照组基因型不符合HWE的4个研究〔9,10,12,22〕后，结果也无统计学意义〔OR=0.984，95%CI(0.886～1.092)〕。基于人群种族进行亚组分析的结果与整体分析结果一致〔中国人：OR=0.912，95%CI(0.678～1.225)；高加索人：OR=0.997，95%CI(0.883～1.126)〕。见表2。

表1 纳入研究基本特征(n)

续表1 纳入研究基本特征(n)

1)对异质性产生主要影响的研究

2.2.2显性模型(CC+CT vs TT) 异质性检验I2=58.1%，故采用随机效应模型进行分析，Meta分析结果显示:在显性模型下，CYP46A1基因rs754203多态性与AD的发病无明显相关性〔OR= 0.943，95%CI(0.826～1.076)〕。去除对照组基因型不符合HWE的4个研究〔9,10,12,22〕后，结果也无统计学意义〔OR=0.947，95%CI(0.820～1.094)〕。基于人群种族进行亚组分析结果与整体分析结果一致〔中国人：OR=0.812，95%CI(0.530～1.246)；高加索人：OR=0.991，95%CI(0.845～1.163)〕。见表2、图2。

表2 CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病相关性Meta分析结果

2.2.3隐性模型(CC vs CT+TT) 异质性检验I2= 26.2%，故采用固定效应模型进行分析，Meta分析结果显示:在隐性模型下，CYP46A1基因rs754203多态性与AD的发病无明显相关性〔OR=1.045，95%CI(0.904～1.207)〕。去除对照组基因型不符合HWE的4个研究〔9,10,12,22〕后，结果也无统计学意义〔OR=1.125，95%CI(0.963～1.315)〕。基于人群种族进行亚组分析结果与整体分析结果一致〔中国人：OR=1.222，95%CI(0.837～1.783)；高加索人：OR=1.085，95%CI(0.912～1.292)〕。见表2。

2.3敏感性分析 剔除对照组基因型不符合HWE和在各个模型中对异质性产生主要影响的研究后，对剩余研究重新进行Meta分析，结果显示各遗传模型合并效应量也均未发生明显变化，说明本次Meta分析结果比较稳定。见表2。

2.4发表偏倚评估 剔除对照组基因型不符合HWE和在各个模型中对异质性产生主要影响的研究后，对是否存在发表偏倚进行评估。漏斗图显示，各点之间对称性较好，说明发表偏倚较小；应用Egger线性回归法对漏斗图对称性进行定量评价，结果也提示无明显发表偏倚(C vs T：P=0.244；CC+CT vs TT：P=0.235；CC vs CT+TT：P=0.418)。见图3。

图2 去除对照组基因型不符合HWE后，CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险的Meta分析(CC+CT vs TT)

图3 CYP46A1基因rs754203多态性与AD发病风险的漏斗图(CC+CT vs TT)

3 讨 论

AD为老年神经变性疾病，近年来关于AD病因与发病机制及治疗方面的研究取得了较大的进步，特别是关于AD基因的研究已成为目前研究的热点。Bogdanovic等〔27〕于2001年首次对CYP46A1基因与AD之间的关系进行了研究报道。从这以后，大量的研究开始关注CYP46A1基因在AD病因学上的重要性。

本次Meta分析结果显示,人群AD与CYP46A1基因rs754203多态性无显著关联。无论是对所有研究进行统计分析还是去除对照组基因型不符合HWE的研究进行分析，在三种模型中均无统计学意义。考虑到不同的人群种族的基因型频率不同及不同的遗传背景对AD的遗传易感性不一样，我们对不同种族中CYP46A1基因rs754203多态性位点与AD的相关性进行了亚组分析。研究结果进一步证实了CYP46A1基因rs754203多态位点与AD发病风险没有相关性。为验证Meta分析检查结果的稳定性，本文还进行了敏感性分析。去除对照组基因型不符合HWE和各个模型中对结果产生主要异质性的研究后得到的结果与之前的结果相似。此外，对CYP46A1基因rs754203多态性的各研究是否存在发表偏倚进行漏斗图观察，未见明显的发表偏倚，证明结果较稳定可靠。综上，本次Meta分析结果具有较高的科学性。

AlzGene数据库是对AD遗传易感性进行Meta分析的一个重要工具。此次Meta分析所得结果与AlzGene数据库结果一致：CYP46A1基因rs754203多态性与AD没有相关性。与AlzGene数据库Meta分析的结果相比，此次结果更具有说服力和可靠性。因为：①此次Meta分析纳入的研究数据比AlzGene数据库的文献多3组；②此次的Meta分析对CYP46A1基因rs754203多态性与AD关系的等位基因、显性和隐性三种模型进行了分析，而AlzGene数据库仅分析了等位基因模型；③此次的Meta分析对每种模型的异质性都进行了计算分析，并根据异质性的大小选择固定效应模型或随机效应模型进行统计量的合并，而AlzGene数据库都采用了随机效应模型进行统计量的合并。

Meta分析是一种可进行全面了解、综合分析和客观评价的统计学处理方法，通过合并样本增大样本量，弥补单个研究的不足，提高统计检验功效，得到更可信的结论，越来越多地应用在医学领域。然而此次Meta分析亦存在一定局限性：①只纳入了公开发表的中英文文献，可能存在选择偏倚；②每篇文献的对照组纳入标准不完全一样，有可能会影响分析结果；③AD是一个基因与环境共同作用的疾病，可能存在基因与环境之间的交互作用，而本研究并未阐述其交互作用。

综上所述，基于现有Meta分析结果显示，CYP46A1基因rs754203多态性可能与AD无关。