全自动生化分析仪交叉污染的原因分析

刘学琦

【摘 要】全自动生化分析仪已经在临床上广泛应用，给检验人员增加了许多新课题，除了学习保养维护、操作以外，也要注意仪器使用流程和试剂的使用对实验结果的干扰，本文结合自己的实际工作分析探讨了全自动生化分析仪交叉污染的各种原因，尽量避免使用过程中发生交叉污染，以及發生交叉污染后怎样找出原因。

【关键词】全自动生化分析仪;交叉污染

【中图分类号】R443【文献标识码】A【文章编号】1005-0019（2019）11--01

现代医疗不断发展，目前，由于全自动生化分析仪其准确性高、测量速度快、消耗剂量少等优点和多样本、多项目的处理能力，给临床上对疾病的诊治以及健康状态提供可靠的信息依据，已经在各级医院得到广泛使用，成为医院进行生化分析的主要工具。但是现在多种全自动生化分析仪都存在交叉污染的问题，从而导致检测结果出现误差，每个检验结果都会影响到医生对疾病的诊治，因此避免实验中发生交叉污染就变得尤为重要。本人根据检验经历和实际情况，对全自动生化分析仪交叉感染的原因及如何找出原因作以下分析报告。

一、全自动生化分析仪交叉污染的种类

（一）试剂之间的化学污染

1.反应进程同时。上一个试剂的反应结果对下一个试剂反应进程带来了间接的干扰，因此，下一个项目检测到的是这两个试剂反应的综合结果。比如，上一个反应的产物是过氧化氢，那么就会对以Trinders反应时颜色的改变产生影响。像GLU对CREA反应结果的干扰（氧化酶法）、CHOL对CREA反应结果的干扰（酶法）、UA对CHOL测定结果的影响[1]。

2.试剂之间的直接污染。上一个检测试剂中含有下一项检测所需要的试剂，直接影响到下一项的检测结果。比如，试剂淀粉酶中含有浓度较高的钙离子、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、ALP（IFCC法）、AMY（EPS法）、TP、GLU（氧化酶法）、ACP试剂里面含有浓度较高的钾离子、TG等试剂里面含有一些镁离子等等，以上这些试剂的交叉污染分别会对钙离子、钾离子（紫外酶法）、镁离子的最后检测结果造成影响。

3.上一个检测的试剂中含有一些对下一个反应检测的底物有作用的试剂，造成下一个反应的测定结果不准确。比如，UA、TC等均含有磷酸盐缓冲液，会对于其后P的测定产生影响、铁能与镁测定试剂的络合剂结合，就会影响铁与铁络合剂的结合。

4.反应条件如pH等影响下一项的反应条件，因此改变反应进行的速率。比如，直接胆红素（钒酸盐氧化法）试剂里面含有表面活性剂的酒石酸盐缓冲液，就会影响ALT的活性，干扰最终测定结果[2]。

我们的全自动生化分析仪在使用不久后，发现用酶法检测肌酐时的结果不稳定，有时候连着好几个样本肌酐值都高于正常参考值很多，单独重新测定时，结果又恢复正常，经过检查，我们排除了搅拌棒、比色杯、加样针等几个方面的原因，我们怀疑可能是因为检测顺序出现错误：先测定了葡萄糖，紧接着测了肌酐，所以，我们做了一个实验。

随机抽取病人标本9份做三次检测，第一次和日常测定顺序相同，第二次单独测定肌酐，第三次在葡萄糖和肌酐的检测中插入AST和ALT检测，然后测定这9份标本。三次检测肌酐。结果三次测试数据为：第一次测试=112.7μmol/L，第二次测试=73.1μmol/L，第三次测试=72.9μmol/L。显而易见，第一次与第二次检测结果差距较大，第二次和第三次检测结果差距细微。这就说明试剂葡萄糖对于肌酐检测结果有很大影响，后来我们又查找了一些资料，并向请教了专家，找到了原因。

（二）样品交叉污染

1.比色杯的交叉污染。生化分析仪的比色杯一般都是反复使用的，每个比色杯使用完毕后，进行清洗，然后继续使用于下一个项目的检测。如果比色杯清洗不彻底或者粘附力增强时，就可能吸附一些上一个项目中的试剂，那么这些残留的试剂就会对下一个项目的检测产生一定的影响。

2.搅拌棒的交叉污染。在样本与试剂混合以后，往往会用搅拌棒加以搅拌，使混合均匀。如果搅拌棒清洗不彻底或者粘附力强，那么残留在搅拌棒上面的试剂或者样品就会对下一个项目的检测产生影响。

3.试剂吸针、样品吸针的交叉污染。现在大部分全自动生化分析仪都是采用了双试剂检测样本，试剂中R1与R2的吸取和吐出，，一般情况下只配一套试剂针。如果试剂针清洗不彻底，或者粘附力增强时，残留在上面的试剂就有可能会对下一个项目的检测造成干扰。除此之外，另一个不容忽视的问题是许多全自动生化分析仪长期频繁使用，使得试剂针和加样针磨损严重，或者吸头没有及时更换，使试剂针或者取样针密封层逐渐变大，发生泄漏问题，造成样本间或试剂间相互污染。

总之，试剂的种类繁多，试剂中的化学成分也非常复杂，各个厂家提供的试剂说明书不能完全说明试剂的组合成分，所以往往很难判断试剂之间交叉污染的原因。因此，检验人员在进行检测时，要合理安排项目的测试顺序，对于精确安排好的项目测试顺序，也不能随意更改[3]。所需要的试剂，要科学性、合理性的组合放置，相同酸碱度的放在一起，反应原理相同的放在一起。冲洗时使洗液压力与压缩空气的压力适中，把试剂吸针、样品吸针以及搅拌棒冲洗干净并吹干。对试剂针进行特别冲洗，比如冲洗次数增加，必要的时候可以加入碱性清洗液或酸性清洗液进行冲洗这样可以有效减弱交叉感染。

二、全自动生化分析仪交叉污染的判别

第一，把某一种试剂当做样本，进行整套项目的综合测定，仔细观察每一项的测定结果从而进一步确定发生试剂交叉污染造成直接或间接影响的项目。或者把一份样本一分为二，其中一份加入生理盐水或者其他合适的稀释液，另外一份加入等量的其他试剂，同时检测，仔细观察检测结果的变化，从而进一步确定发生试剂交叉污染时造成直接或间接影响的项目。第二，交叉污染初步测试，假设有啊，a，b，c三个项目，，标本是混合血清，按照下面的测试顺序：a，a，a，a，a，b，a，c，a，b，b，b，b，b，c，b，c，c，c，c，c，测试的结果分别为：a1，a2，a3，a4，a5，ba-b，ab-a，ca-c，ac-a，b1，b2，b3，b4，b5，cb-c，bc-b，c1，c2，c3，c4，c5（bc-b表示c项目对a项目发生污染时a的测试值，其他类同），把a2到a5、b2到b5、c2到c5的四次检测平均值分别当做a、b、c三个项目没有发生交叉污染时的测定值，如果（ab-a/a*100%）< 95%或者>105%，那么强烈支持b对a有交叉污染。如果，以上初步试验证明b对a有污染，就可以进行下面实验进行确认，检测顺序为b，a，a，a，观察结果b，a1，a2，a3，如果（a1/a3*100）< 95%或者>105%，说明b对a有交叉污染。从a1到a3的检测结果，可以进行确认b受到交叉污染的程度是不是逐渐减轻。

综上所述，为了确保检测结果的准确性，避免发生交叉污染，首先仪器应该运转正常，对仪器定期维护、保养，检验人员能够熟练操作仪器而且了解各种反应，做好实验室的质评工作和质控工作，实验室的环境质量对检测结果也会有一定影响，还要做好各种试剂之间的交叉污染的评估和调查工作，这样就可以设置实验检测程序，试剂科学合理的组合，搅拌棒、比色杯、试剂针清洗彻底，是使全自动生化分析仪避免交叉污染最有效的办法，使其提供的数据更具准确性和可靠性。

参考文献

郭旭.初探全自动生化分析仪交叉污染的原因及解决对策[J].医疗装备， 2015， 24（5）：83-83.

赵笔辉.应用日立7180全自动生化分析仪的检测时序处理交叉污染[J].检验医学， 2016， 31（2）：140-143.

杨兰， 马凌珍.全自动生化分析仪试剂交叉污染的检测方法[J].中国医疗器械信息， 2017， 23（6）：27-28.