理气中药组方对糖尿病大鼠胃排空延迟的作用

王天锡，张 俊，崔莉红

长期糖尿病患者可以出现胃动力下降、胃排空延迟等表现，临床上称为“糖尿病性胃轻瘫”。不但影响患者生活质量，更是影响食物及口服药物的吸收，对血糖的控制带来了较大影响，形成恶性循环。目前临床上治疗糖尿病性胃轻瘫的主要方法是促胃肠动力药的应用，中药治疗也取得了比较理想的效果，但缺乏有效的协定处方及相关的理论支持。陈皮、枳实、木香、香附是治疗腹痛、腹胀、早饱等胃肠动力障碍的常用中药，有健脾和胃，行气除痞，消积化滞等功效。本课题选用上述四味理气中药与胃肠动力药胃复安做对照，分别对糖尿病大鼠的胃排空进行干预，观察理气中药对促进糖尿病大鼠胃排空的作用。

1 材料与方法

1.1 动物 成年SD大鼠110只，雌雄各半，体质量180～240 g。购于中国医学科学院放射医学研究所，动物合格证号SCXK(津)2014-0001。

1.2 药品及试剂 （1）一羟四氧嘧啶粉剂（alloxan），美国Sigma公司。（2）精蛋白锌胰岛素注射液，江苏万邦生化医药有限公司，国药准字H32024565。购于天津市南开医院药房。（3）中药煎剂陈皮、枳实、木香、香附，购于天津市南开医院中草药房。上述四味药各10 g，由天津市南开医院煎药室煎制400 mL，浓度为1 mg/mL。（4）胃复安片，山西云鹏制药有限公司，国药准字H14020782。购于天津市南开医院药房。（5）13C-辛酸片剂，德国瓦格纳分析技术有限公司北京代表处提供。（6）甲基橙粉剂，由天津医科大学药学院提供。

1.3 仪器 （1）血糖仪，德国拜耳。（2）高效液相色谱仪（日本岛津LC-6A）。（3）台式高速离心机（LDZ4-2）。（4）德国瓦格纳公司红外线能谱分析仪。

1.4 实验方法 将110只成年SD大鼠按2:3:3:3比例随机分为4组。A组：正常组（n=20）；B组：糖尿病中药组（n=30）；C组：糖尿病胃复安组（n=30）；D组：糖尿病组（n=30）。普通饲料喂养1周，称重，测静脉血糖。B、C、D组禁食24 h，新配制的一羟四氧嘧啶溶液按300 mg/Kg[1]体重快速腹腔注射。共有80只大鼠非禁食状态下连续2 d血糖＞11.1 mmol/L，出现三多一少糖尿病症状，视为糖尿病大鼠造模成功。血糖范围13.5～30.5 mmol/L，平均血糖22.8 mmol/L，成模率88.89%。糖尿病大鼠皮下注射精蛋白锌长效胰岛素，随机血糖维持在20 mmol/L左右。A组、D组1次/d按10 mL/只给予0.9%生理盐水灌胃，B组1次/d按8 mL/只[1]（按大鼠平均体重及不同动物mg/只等效剂量的折算系数0.018换算）给予中药煎剂灌胃，C组1次/d按0.5 mg/只[1]（按大鼠平均体质量及不同动物mg/只等效剂量的折算系数0.018换算）给予胃复安片灌胃。饲养12周。

禁食24 h，每只大鼠予10 g13C辛酸-蛋黄底物灌胃，行13C胃排空实验，记录排空时间。再次禁食24 h，每只大鼠予1%甲基橙水溶液0.2 mL灌胃，60 min后处死。剖腹，止血钳夹闭贲门和幽门，剥离胃，剖开。用5 mL蒸馏水充分冲刷胃内壁，分别留取样品，用高压液相定量测定胃内残留甲基橙浓度，观察各组大鼠胃排空情况。在具体实验过程中，因大鼠死亡，未成模等原因，大鼠实际数量前后存在差异。

1.5 色谱条件 色谱柱(Kromasil C18 5 µm,250 mm×4. 6 mm）；进样量50 µL；流动相（甲醇：水 =60:40，0.01 mol/L KH2PO3，pH=4)；流速为1 mL/min；检测波长254 nm；灵敏度0.002； 柱温：室温。

1.6 回归方程 根据不同浓度标准液的色谱分析所得出的各自峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作折线图，得出回归方程Y=30294X-12944，回归系数R2=0.999 5。证实甲基橙浓度在0.5～65 µg/mL范围内，线性关系良好（R2=0.999 5）。

1.7 样品提取 取甲基橙溶液样品500 µL高速离心,转速为13 000 r/min。2 min后取上清液50 µL进样，得出各样品峰面积。将峰面积代入上述回归方程，得出相应的甲基橙样品浓度。

1.8 统计学方法 实验资料采用SPSS13.0软件处理，基础资料进行比对，统计无差异，分组资料进行方差齐性检验和对称检验，计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用方差分析，统计检验均采用双侧检验，实验数据以表示，以P＜0.05表示有统计学差异，P＜0.01表示有显著统计学差异。

2 结果

2.1 大鼠体质量及血糖改变情况 腹腔注射一羟四氧嘧啶后，大鼠体重下降，血糖明显升高，达到糖尿病诊断标准，糖尿病大鼠模型制作成功（表 1）。

表1 注射一羟四氧嘧啶前后大鼠一般情况比较

2.213C胃排空实验 糖尿病组大鼠胃排空较正常组大鼠明显延迟，说明糖尿病大鼠出现胃排空延迟表现，糖尿病大鼠胃排空延迟模型制作成功。糖尿病中药组和糖尿病胃复安组大鼠胃排空时间较糖尿病组大鼠缩短（P＜0.01）。说明中药组方煎剂及胃复安均能促进糖尿病大鼠胃排空。糖尿病中药组大鼠胃排空时间较糖尿病胃复安组大鼠缩短（P＜0.01）。说明中药组方煎剂在促进糖尿病大鼠胃排空效果优于胃复安。见表2。

表2 各组大鼠 13C胃排空时间比较

2.3 甲基橙溶液灌胃1 h后大鼠胃内残余甲基橙浓度 糖尿病组大鼠胃排空较正常组大鼠明显延迟,说明糖尿病大鼠出现胃排空延迟现象，糖尿病大鼠胃排空延迟模型制作成功。糖尿病中药组和糖尿病胃复安组大鼠胃内残余甲基橙浓度较糖尿病组大鼠明显降低（P＜0.01）。说明中药组方煎剂及胃复安均能促进糖尿病大鼠胃排空。糖尿病中药组大鼠胃内残余甲基橙浓度较糖尿病胃复安组大鼠降低（P＜0.01），说明中药组方煎剂在促进糖尿病大鼠胃排空效果优于胃复安。见表3。

表 3 甲基橙溶液灌胃1 h后各组大鼠胃内残余甲基橙浓度比较

3 讨论

糖尿病性胃轻瘫是长期糖尿病患者自主神经紊乱引起的胃肠动力下降。糖尿病患者中大约5%～12%的患者伴有胃轻瘫的症状[2]。糖尿病胃轻瘫者可出现恶心、呕吐等不适表现，严重者可出现胃潴留、胃扩张等，且血糖难以控制平稳，波动幅度大，形成恶性循环，加速其他急慢性并发症的出现，导致患者生活质量显著下降，增加家庭及社会负担[3-4]。1958年，Kassander[5]首先提出此概念。近年来，随着人们饮食结构的改变及生活水平的提高，糖尿病发病率有逐年上升趋势，增加了合并胃轻瘫的风险[6-7]。关于糖尿病性胃轻瘫的发病机制，目前仍不十分明确,可能与幽门螺杆菌感染、胃肠激素异常、自主神经病变等有关。有学者提出，也可能与糖尿病患者长期血糖控制不理想导致胃肠道微血管病变有关[7-8]。由于该病可影响食物及口服药物的吸收，干扰糖尿病患者血糖的控制，故积极治疗该病对于改善糖尿病患者生活质量和控制血糖都有重要意义。目前治疗该病的方法主要有控制血糖，调整饮食，促胃肠动力药及止吐药等的应用。适当补充维生素也十分重要，特别是维生素B1、B2和B12，能起到改善植物神经营养的功能[9]。

祖国医学将糖尿病归为“消渴病”“消瘅”的范畴，但无糖尿病性胃轻瘫的病名。古籍中发现，古代医家很早就认识到了消渴病与胃病的密切联系，目前临床上多将糖尿病性胃轻瘫归入“呕吐”“痞满”“胃胀”等范畴进行辨证论治[10]。关于糖尿病性胃轻瘫的中医发病机制，多数学者认为是消渴病日久阴损气耗,致中气虚弱、脾胃升降失调为主。脾气虚弱、运化无力为本，气滞、血瘀、湿阻、痰浊、食积、湿热等引起胃失和降为标，为虚实夹杂之证，故治疗上应以运脾为先，包括理气运脾、益气健脾、燥湿运脾、淡渗实脾及消食健脾等，同时可配以行气燥湿、化痰降浊、活血化瘀等药物。有学者用健脾理气合剂在动物实验中也显示的对糖尿病胃轻瘫的大鼠有良好的治疗效果[11]。本实验中，喂养12周后糖尿病大鼠胃排空较正常大鼠明显延迟，糖尿病大鼠胃排空延迟模型制作成功。理气中药组方煎剂与胃复安均能促进糖尿病大鼠胃排空，理气中药组方煎剂效果优于胃复安。

陈皮、枳实、木香、香附四味理气中药是临床上治疗脾失健运，胃失和降，腹胀、痞满等疾病的常用中药，该组方具有理气健脾、燥湿化痰、破气除痞、消积化滞的功效。本实验选取上述四味理气中药作为经验组方干预糖尿病大鼠，达到了促进大鼠胃排空的效果，且疗效优于胃复安，证实中药治疗糖尿病引起的胃排空延迟效果显著，也为将来进一步探索中医药治疗糖尿病性胃轻瘫的有效组方提供了新的理论依据。

祖国医学蕴藏着无尽的瑰宝。虽然现代医学有不可替代的地位，但如何更深入更全面地挖掘中医药在临床疾病诊治方面的有效方法，中西医结合，取长补短，发挥各自优势，是我们攻克许多疑难杂症、造福人类的有效途径，同时也给广大医务工作者提出了更高更全面的要求。