5种化学药剂对苹果斑点落叶病菌拮抗作用的研究

于占晶

（衡水学院生命科学系 河北 衡水 053000）

苹果斑点落叶病作为苹果的四大病害之一，是由苹果链格孢菌侵染而引起的一种早期落叶病[1]。该病以菌丝体在落叶、芽的鳞片及病枝上越冬，在第2年的春天，病斑上会产生新的孢子，通过风雨传播，侵染新生叶片[2]。20世纪70年代，苹果斑点落叶病在中国开始流行[3]，许多苹果园的病害率超过90%，落叶率为20%～80%，严重影响树木健康和产量[4]，给果农带来巨大的经济损失。目前，生产上有物理防治、生物防治和化学防治这3种防治方法[5]。我国苹果斑点落叶病的防治还是以化学防治为最主要的手段，同时结合其他措施[6]。本研究旨在从诸多化学药剂中有针对性地筛选出对病原菌拮抗效果好的药剂，从而为进一步的田间防效测定打下基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试药剂。选用20%吡唑醚菌酯悬浮剂(利民化工股份有限公司)、氟硅唑乳油(青岛星牌作物科学有限公司)、12%戊唑·30%多菌灵悬浮剂(青岛星牌作物科学有限公司)、菌清悬浮剂(现代农业产业技术转化基地)、30%戊唑醇悬浮剂(青岛星牌作物科学有限公司)5种药剂进行试验。

1.1.2 供试菌株。苹果斑点落叶病菌(A.alternata f.sp.mali)，由衡水学院园林植物实验学实验室保存并提供。

1.2 试验方法。5种化学药剂对病原菌菌丝生长的毒力测定采用菌丝生长速率法，分别取1 ml化学药剂加进到灭菌的冷却至40℃～50℃的99 ml的PDA培养基中，药剂的终浓度为62.5 mg·L-1、125 mg·L-1、250 mg·L-1、500 mg·L-1、1 000 mg·L-1，混合均匀倒入培养皿制备含药平板，同时以加入1 ml无菌水的培养基做对照，每个处理重复3次。用高温灭菌的打孔器从活化的病菌菌落边缘打取直径为5 mm菌饼，用接种铲将其倒置于含药平板的中央，将所有培养皿置于25℃恒温箱中黑暗培养。24 h后持续每天观察菌落生长情况，用十字交叉法测量菌落生长直径，直至对照菌落即将长满整个培养皿，计算菌丝生长抑制率。抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径×100%。

1.3 数据处理。用Microsoft Excel 2010软件处理数据，将抑制百分率转换成抑制几率值，以浓度对数值为横坐标，抑制几率值为纵坐标，做回归直线，得到毒力回归方程，根据最小二乘法计算出有效中浓度(EC50)及相关系数R。用SPSS 20.0进行方差分析，显著水平均为P＜0.05。

2 结果与分析

2.1 5种药剂对苹果斑点落叶病菌的抑制效果。由表1可知，30%戊唑醇对苹果斑点落叶病菌抑制效果最好，5个浓度的抑菌率均在90%以上，各浓度之间差异不显著，与对照相比均呈显著性差异。在125 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最好，抑菌率为91.79%，在500 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最差，抑菌率为91.03%。氟硅唑对苹果斑点落叶病菌有较好的抑制作用，在 125 mg·L-1、250 mg·L-1、500 mg·L-1和1 000 mg·L-1质量浓度下，抑菌率均在90%左右，在62.5 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最差，抑菌率仅为69.94%，各浓度之间差异不显著，与对照相比均呈显著性差异。12%戊唑·30%多菌灵对苹果斑点落叶病菌也有较好的抑制作用，在250 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最好，抑菌率为90.51%，62.5 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最差，抑菌率也达到87.07%，各浓度之间差异不显著，与对照相比均呈显著性差异。20%吡唑醚菌酯对苹果斑点落叶病菌有一定的抑制作用，在62.5 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最好，抑菌率达73.21%，在250 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最差，抑菌率仅为48.51%，各浓度之间差异不显著，与对照相比均呈显著性差异。菌清对苹果斑点落叶病菌的抑制作用较差，在125 mg·L-1质量浓度下，抑制效果最好，抑菌率仅为53.85%，与其他浓度和对照相比呈显著性差异，其他各浓度与对照之间差异不显著。

表1 5种化学药剂对苹果斑点落叶病菌菌丝生长的毒力测定

2.2 5种药剂对苹果斑点落叶病菌的毒力测定。20%吡唑醚菌酯、氟硅唑、12%戊唑·30%多菌灵、菌清、30%戊唑醇的 EC50分别为 0.0040 mg·L-1、0.5530 mg·L-1、5.0597 mg·L-1、10.094 mg·L-1、5.0153 mg·L-1，其中20%吡唑醚菌酯对苹果斑点落叶病菌的毒性最强，但是相关系数较低，菌清对苹果斑点落叶病菌的毒性最弱。

3 结论与讨论

5种化学药剂中，30%戊唑醇的抑制效果最好，其次是氟硅唑和12%戊唑·30%多菌灵，然后是20%吡唑醚菌酯，菌清抑制效果最差。30%戊唑醇的抑制效果最好，不同浓度的抑制率均在90%以上，且抑制率差异不大。12%戊唑·30%多菌灵的抑制效果仅次于30%戊唑醇，所有浓度的抑制率都在87%以上，不同浓度的抑制率差异不大。氟硅唑在62.5 mg·L-1时与其他浓度相比抑制效果最差。除菌清外其它4种化学药剂对苹果斑点落叶病菌菌丝生长均有较好的抑制作用，为下一步防效测定奠定了理论基础。