外周血T淋巴细胞及乙型肝炎病毒血清标志物与HBV-DNA的相关性分析

郭文丽，潘春燕，庄洁伟

(深圳市宝安区人民医院检验科，广东 深圳 518101)

乙型肝炎(简称乙肝)是以肝脏炎性病变为主并可引起多器官损害的传染病。近年来，乙型肝炎发病率增长较明显，据世界卫生组织报道，每年约有100万人死于乙肝恶化所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌等。多数学者认为乙肝发病的主要原因之一为乙型肝炎病毒(HBV)未得到有效控制，致使病毒在肝脏内持续复制，而T淋巴细胞可有效维持机体免疫功能。HBV脂蛋白外壳上携带乙型肝炎表面抗原HBsAg，其为HBV感染的血清学标志[1-3]。HBV-DNA作为乙型肝炎病毒感染的指标具有较高的特异性和灵敏性，当HBV复制及有传染性时，HBV-DNA 检测显示为阳性[4-6]。由于目前较多基层医疗机构对于HBV-DNA检测暂无条件，可用检测乙肝血清标志物的方法来体现机体状态。本文对外周血T淋巴细胞、乙肝病毒血清标志物及HBV-DNA间的相关性进行探讨分析，以提高乙肝诊断准确率。

1 资料与方法

1.1一般资料:从2014年1月～2015年11月，共纳入89例在我院行HBV-DNA检测的门诊及住院患者为研究对象，均符合《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准。研究对象中男45例，女44例，平均年龄为(30.33±7.42)岁。纳入标准：①患者认知正常；②无严重血液病及重要器官性疾病；③患者及其家属知情同意。排除标准：①有严重遗传病病史者；②严重器官衰竭功能不足者；③拒绝参与此次研究者。

1.2检测方法

1.2.2乙肝病毒血清标志物检测:采用ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。严格按照试剂盒操作说明进行检测，检测所需装置均在效期内使用。

1.2.3HBV-DNA检测:采用荧光测定PCR法对HBV-DNA水平进行检测。严格按照试剂盒操作说明进行检测，检测所需装置均在效期内使用。方法如下：取冻存已裂解的细胞，室温放置5 min使其完全溶解。分离并清洗后取RNA沉淀物进行溶解，先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1∶100)后，读取其在分光光度计260 nm和280 nm处的吸收值，测定RNA溶液浓度和纯度。

2 结果

表1 不同HBV-DNA水平外周血T淋巴细胞亚群检测结果

2.2不同乙肝病毒血清标志物模式间HBV-DNA阳性率：HBsAg阳性的79例患者中，HBV-DNA阳性率为64.3%；HBsAg阴性的10例患者中，HBV-DNA阳性率为56.4%。HBeAg阳性的27例患者中，HBV-DNA阳性率为88.3%；HBeAg呈阴性的62例患者中，HBV-DNA阳性率为53.1%。由此可知HBeAg较HBsAg相比更为敏感。结果见表2。

表2 不同乙肝病毒血清标志物模式间HBV-DNA阳性率

3 讨论

乙型病毒性肝炎系由乙肝病毒(HBV)引起，患者具有恶心呕吐、食欲减退、肝功能异常等临床表现。部分患者病程迁延转为慢性，或发展为肝硬化甚至肝癌[7]。由于乙肝病毒在体内长期存在,肝脏产生不同程度的纤维化；病程持续,可发展成肝硬化、肝癌等。

HBV-DNA为乙肝病毒脱氧核糖核酸，对检测乙肝病毒有无复制有重要作用[8-9]。HBV-ADN检查为后期治疗提供了准确的参考依据，对于判断乙肝传染性强弱、乙肝病毒复制情况、乙肝抗病毒治疗效果等都有十分重要的意义[2]。一般HBV-DNA水平越高，显示传染性越强。既往研究显示，乙肝患者血清HBeAg含量与HBV-DNA之间相关性较高，可对机体内乙肝病毒状态进行有效表达[10]。研究表明，BsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组的HBV-DNA阳性率为88.4%，与其他血清标志物相比明显增高，说明HBV-DNA与HBeAg有较高相关性，在评价乙肝传染性和病毒复制情况中较为准确。

综上所述，乙肝血清标志物与外周血T淋巴细胞在临床应用中均有优势,明确各指标与HBV-DNA检测结果间的关系有助于全面监测乙肝病情，为临床诊断乙肝、治疗乙肝及乙肝患者的预后判断提供客观依据。