FOXP1与AR在前列腺癌中的表达及意义

李 云， 李胜水，许 华，张凤梅，李双标，张树茂

(河北省沧州中西医结合医院,河北 沧州 061001)

前列腺癌作为男性生殖系统的恶性肿瘤之一，在欧美国家已成为排名第一的危害男性生命健康的肿瘤。近年来，在我国前列腺癌的发病率及死亡率也逐年升高，因此对前列腺癌的发生机制及演变过程的研究已成为亟待解决的问题[1]。近年来一些文献报道叉头框蛋白P1(FOXP1)作为FOXP亚家族(FOXP1-4)转录因子之一，参与生物机体生长发育的一系列过程，包括对心脏、肺的正常发育以及在免疫系统中都有重要的调控作用，而且FOXP1的异常表达对不同肿瘤的发生发展具有抑制或促进作用[2]。雄激素受体(AR)作为雄激素依赖性转录因子，参与细胞的增殖和分化，在前列腺增生及前列腺癌中具有重要作用[3]。本文应用免疫组化SP法检测FOXP1、AR在前列腺癌中的表达情况，分析探讨两者在前列腺癌发生发展过程中的作用，为临床诊治及预后评估提供有效的参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取我院2010年3月～2015年3月经病理证实的石蜡前列腺癌标本50例(前列腺癌组)，正常前列腺标本35例(正常前列腺组)，患者术前均未接受放、化疗等治疗。

1.2主要试剂：兔抗人FOXP1多克隆抗体(浓缩型，武汉博士德公司)工作液1∶50稀释；鼠抗人AR多克隆抗体(即用型)、SP免疫组化试剂盒、DAB显色剂均购于福州迈新公司。

1.3方法：采用免疫组化SP方法染色，将切片脱蜡后进行微波修复，用山羊血清封闭后，滴加抗体置于4℃冰箱过夜。用已知阳性组织做阳性对照，以PBS替代一抗做阴性对照。 次日加入二抗孵育，DAB显色，苏木精复染。

1.4免疫组织化学结果判定：FOXP1与AR都是定位于细胞核内，呈棕黄色或棕褐色。光镜下随机选择5～10个视野，计数100～200个细胞，细胞内出现黄染颗粒为阳性，计算出阳性细胞的百分率。结果评分标准：阳性细胞数<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。染色强度判定：无色为0分，淡黄色为1分，黄色或棕黄色为2分，棕褐色或褐色为3分。染色强度与阳性细胞百分比的乘积<1分为阴性，1～3分为弱阳性，4～6分为阳性，>6分为强阳性。

1.5统计学分析：应用SPSS17.0统计软件，使用χ2检验进行率的比较，相关关系采用Spearman等相关分析，P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1FOXP1、AR蛋白在良、恶性前列腺组织中的表达情况：FOXP1、AR蛋白在良、恶性前列腺组织中表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。FOXP1在正常前列腺组表达率86%(30/35)，而在前列腺癌组中表达率为16%(42/50)，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)；相反，AR在前列腺癌组中的阳性表达率为80%(40/50)明显高于正常前列腺组为29%(10/35)，两组差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2FOXP1、AR蛋白在前列腺癌组织与临床病理参数的关系:FOXP1与前列腺癌病理分级呈负相关，且在低分化组表达率与高、中分化组表达率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而AR表达率与前列腺癌病理分级呈正相关，且在各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)；但是这两种蛋白均与患者年龄无关。见表2。

2.3FOXP1、AR在前列腺癌组织中表达的相关性:在前列腺癌中FOXP1、AR两种蛋白的表达，分别呈现明显下调及上调的趋势，通过相关性分析，两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表1 FOXP1、AR在良、恶性前列腺组织中表达[例(%)]

表2 FOXP1、AR蛋白在前列腺癌中与临床病理参数的关系[例(%)]

表3 FOXP1、AR蛋白在前列腺癌中的相关性(例)

3 讨论

3.1FOXP1蛋白在前列腺癌中的表达及意义：FOXP1属于FOXP亚家族转录因子成员之一，其基因定位于染色体 3p14.1，长度628kb，表达的蛋白产物具有广泛的生物学功能，参与心脏、肺及中枢神经的发育及对免疫系统具有重要调控作用[4]。近年来也发现FOXP1表达于不同肿瘤组织中，如淋巴瘤、乳腺癌、肝细胞癌等。在不同肿瘤中，FOXP1的生物学作用也不同。有文献报道FOXP1在淋巴瘤中过表达与恶性转归及预后不良有关，提示其可能有癌基因作用[5]；在乳腺癌中，研究者发现其可能作为一种肿瘤抑制因子调控乳腺癌发病机制，FOXP1高表达提示较好[6]，因此，FOXP1的双面作用提示在不同肿瘤的发生、发展过程中其作用机制可能不同。本实验应用免疫组化发现FOXP1在前列腺癌组织中的表达明显低于正常前列腺及增生的前列腺组织，而且在高分化、中分化与低分化的前列腺癌中的表达有统计学意义(P<0.05)，说明FOXP1可能是一个潜在肿瘤抑制因子，差异也具有显著参与前列腺癌的进展过程，提示其可作为一个新的标志物用于前列腺癌的诊断及预后评估。

3.2AR蛋白在前列腺癌的表达及意义：雄激素受体(AR)属于甾体超家族成员，是一种具有配体活性的转录因子，通过与雄激素结合，参与男性性征、男性器官发育、维持男性正常生理功能；同时研究发现，AR信号通路在前列腺癌病程进展中具有重要作用[7]。本试验结果显示，AR在前列腺癌中的阳性表达明显高于良性对照组，但与前列腺癌的病理分级呈正相关，与其他研究结果一致。

3.3FOXP1与AR两种蛋白在前列腺癌中的作用机制：Taylor等研究发现FOXP1在前列腺癌中基因的缺失可能是潜在的肿瘤抑制因子，对调节前列腺癌的发生起重要作用[8]，而且Takayama K等学者发现FOXP1是一种雄激素反应因子，能够负性调节雄激素首页信号通路，影响前列腺癌的病程进展[9]。AR对前列腺癌的发生发展的促进作用可能由于AR通过激活靶基因的转录活性，使PSA等相应蛋白合成增加，发挥转录活化因子核细胞分化的作用，从而调节细胞增殖、凋亡和新生血管的作用，进而促进肿瘤生长[10-11]。本研究还发现FOXP1与AR的表达在前列腺癌中呈负相关，但是具体机制仍不清楚，需要进一步研究。

综上所述，检测FOXP1、AR可能为前列腺癌的早期发现、分期预后评估提供了新的思路。但是FOXP1与AR之间的相互关系及如何促进前列腺癌的发生、发展还不完全了解，有待进一步研究。