重症手足口病患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平变化及意义

周婷，丁娴，吴宏图，薛良，王军

1 徐州医科大学附属淮安医院，江苏徐州223002；2 徐州医科大学附属医院

在手足口病(HFMD)治疗过程中，病毒可浸润心、脑等重要脏器的组织细胞，导致病情加重、预后不良。因此，临床上对重症HFMD的病情评估或临床预后的预测，能够为患儿的诊疗提供重要的参考依据[1, 2]。氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、超敏肌钙蛋白(hs-cTnT)是反映心肌细胞损伤的指标，星形胶质源性蛋白(S100B)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)是反映神经细胞损伤凋亡的指标[3，4]；脑微血管内皮细胞(BMEC)能够反映脑血管内皮细胞的损伤程度，可用以评估脑血管意外的可能。2016年8月～2018年5月，我们检测了44例重症HFMD患儿治疗72 h时血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平，并分析其与患儿病情及治疗结局的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 经徐州医科大学附属淮安医院医学伦理委员会批准后，选取同期收治HFMD患儿的临床资料。纳入标准：①年龄6个月～3岁；②临床表现为手、足、口、臀部出现皮疹或疱疹，体温高于38 ℃；③符合中华医学会制定的HFMD诊断标准[5]，病毒类型为肠道病毒71型(EV71)；④一直在我院接受治疗，未转院；⑤治疗72 h时均行小儿危重病例评分(PCIS)及血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE检测；⑥本研究符合《赫尔辛基宣言》相关医学伦理规定，获得患儿家长的知情同意。排除标准：①伴有其他系统所致的皮肤疾病；②肝肾功能障碍；③合并其他类型的病毒、细菌感染；④先天性疾病或出生缺陷；⑤其他系统的重大疾病。共收集HFMD患儿114例，其中重症HFMD患儿44例(重症组)、普通病情患儿70例(对照组)。重症组男24例、女20例，年龄(18.6±5.9)个月，治疗72 h时PCIS为(73.8±5.0)分，经28 d治疗达到治愈37例、死亡7例；对照组男43例、女27例，年龄(19.4±7.0)个月，治疗72 h时PCIS为(93.5±3.8)分，经28 d治疗均达到治愈；两组患儿的年龄、性别比较，差异无统计学意义(P均>0.05)。

1.2 血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE检测方法 治疗72 h后采外周静脉血3～5 mL，室温下放置5～10 min，自然分层后抽取上层清亮液体待测。采用ELISA法检测S100B、NSE，BioTek酶标仪购自美国伯腾仪器有限公司；采用贝克曼库尔特UniCel DxI 800化学发光免疫分析仪检测NT-proBNP、hs-cTnT，EasyBlot ECL化学发光显色试剂盒购自赛默飞公司；采用磁珠吸附法检测BMEC，Mini免疫磁珠细胞分选仪购自德国Miltenyi公司。

2 结果

2.1 两组血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平比较 入院治疗72 h后，重症组血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平均高于对照组(P均<0.05)。见表1。

表1 两组血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE比较

注：与对照组比较，P<0.05。

2.2 重症组不同治疗结局患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平比较 存活患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平均低于死亡患儿(P均<0.05)。见表2。

表2 重症组不同治疗结局患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平比较

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.3 HFMD患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平与PCIS的相关性 相关分析显示，HFMD患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平与PCIS均呈负相关(r分别为-0.774、-0.781、-0.630、-0.695、-0.705，P均<0.05)。

3 讨论

HFMD是临床上较常见的儿童传染性疾病，病情进展速度较快，累及脏器组织较多，其致残率维持在较高的水平[6,7]。其中，重症HFMD患儿临床预后恶化更显著，其远期病死率可超过15%[8]。通过对重症HFMD患儿临床预后的预测，能够在疾病的早期提供临床治疗参考，为免疫球蛋白、抗病毒治疗等提供契机。血清学指标具有定量化和动态检测的优势，可在心脑血管脏器损伤的病情预测中发挥作用。虽然，心脏超声或颅脑CT检查也能评估HFMD脏器损害，但其评估临床预后的局限性较为明显，如评估的灵敏度较低、评估的滞后性较为明显等。本研究对于HFMD患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE的分析，能够在部分揭露HFMD病情进展机制的同时，为临床上重症HFMD患儿的预后提供量化指标。

NT-proBNP是钠尿肽前体物质，其能够反映心肌细胞的舒张储备功能；在心肌细胞顺应性下降的过程中，机械性的刺激能够显著促进NT-proBNP的释放[9]。hs-cTnT是心肌酶谱家族成员，其能够反映心肌细胞膜完整性；在心血管脏器损害的过程中，hs-cTnT的表达可明显上升[10]。BMEC能够反映外周血中释放的脑血管内皮细胞凋亡数量，可以反映脑血管损伤的潜在风险；S100B、NSE是神经细胞凋亡时释放的糖蛋白，在病毒颗粒浸润神经细胞的过程中S100B、NSE表达显著上升[11]。

本研究结果显示，HFMD重症组血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平均高于对照组，差异有统计学意义，表明HFMD病情加重后NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE表达水平显著升高。分析其原因，主要由于HFMD病情加重过程中，体内肠道病毒载量增加，使其能够透过血脑屏障，最终造成脑组织的损害，导致血清BMEC、S100B、NSE水平升高。重症HFMD患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT上升，主要与EV71对于心肌细胞浸润和黏附能力的增强有关。有研究也发现，HFMD患儿血清NT-proBNP水平可随疾病病程延长和病情加重而显著上升，在心功能下降或心力衰竭的HFMD患儿NT-proBNP可翻倍上升[12～14]。在不同的治疗结局患儿中，存活患儿血清NT-proBNP、BMEC、hs-cTnT、S100B、NSE水平低于死亡患儿，差异有统计学意义，表明这些指标的表达异常能够影响到HFMD患儿的临床预后。在NT-proBNP、BMEC、hs-cTnT、S100B、NSE水平较高的患儿，其体内病理生理途径的激活较为显著，最终促进了多脏器的功能衰竭和患儿死亡的发生。但本研究并未分析NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE诊断HFMD临床预后的具体临界值，在后续研究中可以扩大样本量进行探讨。PCIS是评估患儿病情程度的重要指标。相关分析可见，HFMD患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平与PCIS均呈负相关关系，表明这些指标均能够作为临床上评估HFMD患儿病情程度的辅助参考依据。而之所以这些指标与PCIS存在负相关关系，主要因其与心脑血管负荷、脏器组织缺血等有关，最终反映HFMD患儿病情的进展[15]。

综上所述，重症HFMD患儿血清NT-proBNP、hs-cTnT、BMEC、S100B、NSE水平高于普通HFMD患儿，并且与患儿病情程度或治疗结局有一定的关系。这些指标能够在疾病的早期为临床治疗提供参考，为免疫球蛋白治疗、抗病毒治疗等提供契机，从而改善HFMD患儿的预后。