酶转换法检测血清同型半胱氨酸在常规生化检验中的应用评价

赵 鹏，王 新

（淄博市第四人民医院检验科，山东 淄博 255000）

本文阐述了将酶转换法用于2018年2月～2019年2月期间收入的80例健康体检人员中开展常规生化检验血清HCY的临床价值。

1 资料与方法

1.1 基础资料

将2018年2月～2019年2月期间收入的80例健康体检人员作为数据计算分析对象，男性与女性之比是41：39，最大年龄76岁，最小年龄45岁，中位年龄（58.32±3.33）岁。

1.2 方法

抽血前提醒患者进行8至12小时禁食，对血样实施EDTA抗凝，并且于20分钟之内对血浆进行分离；采集静脉血凝固后立即进行血清分离处理，保存于-20°C环境下等待检测。

酶转换法检查方式与条件。采取终点法进行检测，主波长669 nm、副波长700 nm，控制37℃的温度，吸光度范围设置为0～2 A，比色杯光径设置为1.0 cm，样品量设置为200 μL，反应方向选择为升反应，控制2000 μL的Tris 缓冲液用量，进行5分钟孵育，控制300 μL的Fe Cl3用量，进行5分钟反应，采取两点定标方式进行校准。

高效液相色谱法：选择美国雅培 Abbott 公司研发且提供的AXSYM 型全自动分析仪及其试剂盒对HCY浓度进行测定，实验依据为游离 HCY 与单克隆抗体结合 HCY后的不同荧光偏振强度，将抗体、标准液及其样品结合，遵守竞争结合原理，绘制荧光偏振强度及其HCY 浓度倒数的标准曲线，进而计算HCY浓度。

荧光偏振免疫分析：选择还原剂将血样中各种形式的 HCY转化为还原形式，之后让其衍生出HCY－荧光物质复合物，色谱分析衍生后的样品；对不同物质，色谱法固定相具有不同吸附力，因此，洗脱流动相的次序差异比较大，最后依据荧光检测器检测HCY －荧光物质复合物荧光度获取HCY水平[1]。

1.3 观察指标

观察分析比较荧光偏振免疫分析、高效液相色谱法检测血清同型半胱氨酸的情况。

1.4 统计学方法

本次80例健康体检人员涉及的所有数据均应用SPSS19.0 for Windows 统计学软件实施处理，计数资料用率（%）的形式表示，行卡方检验，计量资料用（均数±标准差）形式表示，行t检验，P＜0.05，统计学具有数据指标分析意义。

2 结 果

2.1 分析酶转换法测定血清同型半胱氨酸的情况

精密度：日间变异系数：4.4%和3.8%；批内日间变异系数：2.8%和2.5%；总日间变异系：5.5%和5.1%。线性回归方程即为Y=0.98X＋0.60，R2即为0.98，如果血清同型半胱氨酸处于2至40μmol/L时的线性关系比较良好。

2.2 比较分析荧光偏振免疫分析、高效液相色谱法检测血清同型半胱氨酸的情况。

相比较高效液相色谱法，酶转换法，X为12.99 μmol/L，Y为13.2μmol/L，Y=0.91X+1.87，R2为0.97，t值为1.96，R=0.98，表示具有良好相关性。

相比较荧光偏振免疫分析，酶转换法X为13.89 μmol/L，Y为13.2 μmol/L，Y=0.97X-0.21，R2为0.94，t值为2.01，R=0.97，表示具有良好相关性

2.3 血清与血浆样本测定血清同型半胱氨酸的情况

血清测定血清同型半胱氨酸（18.68±,3.33）μmol/L，血浆测定血清同型半胱氨酸（18.11±4.54）μmol/L，t=0.30，P＞0.05，差异不显著，具有良好相关性。

3 讨 论

本文计算显示，精密度：日间变异系数：4.4%和3.8%；批内日间变异系数：2.8%和2.5%；总日间变异系：5.5%和5.1%。相比较高效液相色谱法与较荧光偏振免疫分析，具有良好相关性；血清与血浆样本测定血清同型半胱氨酸具有良好相关性。

综合以上结论，酶转换法用于常规生化检验血清HCY过程中存在很多优势[2-3]，如操作简单、高灵敏性、高精密度、较宽线性范围等。