精子形态与体外受精结局的相关性研究

教 郁，宋晶晶，王玉婷，印显勃

（沈阳二〇四医院，辽宁 沈阳 110000）

体外受精和自然受精存在很大的差别，尤其是单精子卵胞浆注射体外受精对精子的要求较低，但部分特殊类型精子依然很难实现体外受精，甚至受精失败，有些畸形精子还会导致胚胎发育异常，由此可见精子形态直接影响体外受精结局[1]。对此，本研究以IVF/ICSI治疗患者为研究对象，分析了精子形态与体外受精结局的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2015年10月～2019年10月IVF/ICSI（常规体外受精及单精子卵胞浆内注射）治疗患者为研究对象，根据不同周期精子形态分为A、B、C、D、E、F六组，其中A、B、C组属于IVF周期，A组精子正常形态＜2%，B组精子正常形态在2%～4%范围内，C组精子正常形态≥4%；D、E、F组属于ICSI周期，D组精子形态＜2%，E组精子形态在2%～4%，F组精子正常形态≥4%，助孕周期均为684个，每个周期都使用长方案促排卵，并要求男方禁欲2～7d，然后取精。所有组别的男女双方在年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、原发不孕比及回收卵数等基本情况上均有可比性无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 受精及胚胎培养

受精前：女方要根据实际情况注射绒毛膜促性腺激素（HCG），约（39.8±1.1）h后利用B超引导取卵，即在体视显微镜下找到卵丘；然后将取出的卵丘复合体（OCCC）经拾卵冲洗液（HM）冲洗后放置在规格为Falcon 353002 60 mm的培养皿中（此皿为经过夜平衡后的受精培养皿，每个液滴2～5个卵子），最后放置到专门的培养箱中进行平衡和培养，培养箱的C02浓度及温度分别控制在6%、37.0℃[2]。具体IVF/ICSI受精及培养如下.

1.2.1 IVF受精及培养

①注射HCG后约（38.9±0.4）h进行授精；②受精时将5 mL圆底试管（装有预先处理好的精液）由洗精室的培养箱中取出，再将FM受精皿（装有卵子）由培养箱中取出，以每个卵子对应5000～1000条精子将精卵进行混合培养。③培养（16.8±0.6）h后观察原核形成情况，培养箱的C02、温度分别控制在6%、37.0℃，（64.9±1.2）h后继续观察胚胎情况[3]。

1.2.2 ICSI受精及培养

①注射HCG后约（39.7±0.6）h去掉卵子颗粒细胞；②先于去颗粒皿中（透明质酸酶）脱颗粒，然后置于冲洗皿中进行洗涤，最后放置到规格为Falcon 353002 60 mm培养皿中进行培养；③精子在PVP中制动后对MII卵子行ICSI受精，受精后（16.8±0.6）h对原核的形成情况进行观察，培养箱的CO2浓度、温度控制在6%、37.0℃，（64.9±1.2）h后继续观察胚胎情况[3]。

1.3 观察指标

受精率、卵裂率、优胚率及妊娠率。

1.4 统计学分析

采用统计学软件SPSS 22.0对计数资料及计量资料进行统计学分析，其中计数资料使用x2进行检验，用“%”表示，计量资料使用t检验，用“±s”表示，同时具有差异和统计学意义的数据结果用“P＜0.05”。

2 结 果

2.1 IVF周期A、B、C三组的体外受精结局比较

C组的受精率最高，且与A、B两组比较呈现差异有统计学意义（P＜0.05），卵裂率、优胚率及妊娠率比较有可比性无统计学意义（P＞0.05），详见表1。

表1 A、B、C组体外受精结局比较（%）

2.2 ICSI周期D、E、F三组的体外受精结局比较

D、E、F三组的受精率、卵裂率、优胚率、妊娠率均具有可比性无统计学意义（P＞0.05），详见表2。

表2 D、E、F组体外受精结局比较（%）

3 讨 论

研究结果显示，IVF周期治疗中A、B、C三组的受精呈逐渐上升趋势且都具有统计学意义，这说明精子形态越正常则体外受精成功率越高。相关文献显示，精子生成和成熟过程中会受到各种因素影响[4]，从而导致异常精子形态发生，最终形成畸形精子，影响体外受精结局，诸如染色体缺陷、基因缺陷、精子DNA碎片增多等异常都会影响精子正常功能，从而影响体外受精结局，降低体外受精率，严重者完全不受精。

ICSI周期治疗中D、E、F三组中，受精率、卵裂率、优胚率、妊娠率均有可比性无统计学意义（P＞0.05），这因为ICSI是将精子直接注射到卵胞浆内，不需要精子游动，减少了精子与卵子透明带周围、卵子透明带之间的摩擦，从而更加准确的识别和穿透到卵子中，弥补了精子游动中受到各种不利因素的影响，最终证实了精子形态对ICSI受精的影响有限。

研究结果还显示因为IVF/ICSI技术中受精精子都应用到了精液处理技术，能够快速将活力很好的精姿选出，有效去除了形态异常的精子，从而保证体外受精成功率，但IVF受精受到精子形态的影响较大。