系统性红斑狼疮孕妇IIF法呼吸道病原体抗体假阳性1例报告

毕胜飞 高学智

酒钢医院，甘肃 嘉峪关735100

1 病例资料

患者，女，37岁，2017年于我院诊断为系统性红斑狼疮，以泼尼松片（30mg，po，qd）及硫酸羟喹片（0.2g，po，bid）规范治疗，病情控制平稳。2019年10月11日因全身关节痛、活动受限入院治疗。实验室检查，血沉：41mm/h、RF：47、抗核抗体谱（ANA、ENA、RNP、SM、SSA、SSB）阳性，尿蛋白定量0.67mg/24h，补体C3、C4明显下降，其余未见异常。B超检查：见宫内13mm×6mm妊囊，提示宫内早孕。2019年10月14日，患者自愿接受无痛人流术，次日出现发热表现，多次采集痰培养及血培养，痰培养结果检出正常菌群生长，血培养未检出细菌。静滴头孢曲松钠、乳酸左氧氟沙星、盐酸莫西沙星无效。

2 实验室检测

2.1 间接免疫荧光法（IIF）检测结果 患者呼吸道病原体IgM抗体MP、ADV、RSA、FluA、FluB、PIV呈现阳性荧光模式，荧光亮度与阳性对照相似。经重新采集患者血清样本，以相同试剂进行复查，检测结果与初次检测结果相同。见表1。

2.2 MP、ADV、RSA、FluA、FluB、PIV抗原检测结果 以病毒采样管采集患者咽拭子，对间接免疫荧光法阳性项目送检外部检验机构。本地疾控中心采用RT-PCR法检测RSA、FluA、FluB，检测结果为阴性。金域医学检验中心采用RT-PCR法检测MP、ADV、PIV，检测结果为阴性。2.3 ELISA法检测MP抗体结果 采集患者血清，送检金域医学检验中心，以ELSIA法检测患者肺炎支原体IgM抗体、肺炎支原体IgG抗体，结果均为阴性。

表1 间接免疫荧光法检测结果

2.4 治疗与转归 结合实验室检测结果，考虑患者呼吸道病原体抗体假阳性，更改治疗方案为口服醋酸泼尼松片（12.5mg，qd）、碳酸钙D3颗粒（3g，tid），症状缓解。

3 讨论

呼吸道感染在临床上是一种比较常见的疾病，感染者多数在发病1周后血液中可以检测到相应特异性IgM抗体［2］。目前，对于呼吸道感染的疑似患者，进行相应的呼吸道病原谱检测已成为临床诊断的一种常用筛查手段。IIF多联呼吸道病原体抗体检测试剂对诊断呼吸道感染中具有重要价值，但其假阳性报道极少，在检验工作中，常将多种呼吸道病原体抗体阳性判定为联合感染。本报道所述病例，IIF法多种病原体IgM抗体阳性，核酸检测抗原阴性，ELSIA法检测MP抗体阴性，提示IIF法检测试剂可能存在假阳性反应，现将可能引起IIF检测假阳性因素总结如下：（1）特殊体质或嗜异性抗体的存在虽未有报道提及特殊体质或嗜异性抗体可能造成IIF假阳性，但有研究显示，某些疾病如恶性肿瘤、自身免疫性疾病等患者体内含有某些治疗性抗体、自身抗体、甲胎蛋白等会对多种免疫实验产生非特异性反应［3-6］；一些免疫实验也会受到特殊人群如孕妇、婴幼儿、老年人等体内嗜异性抗体的影响［6］。（2）标本采集和方法学局限呼吸道病原体核酸检测采样多使用鼻咽拭子进行病原体采样，患者正确采样以及医务人员的规范操作难以保障。龚亚东等［7］的报道显示，咽拭子快速培养法和血清MP-IgM检测法的敏感性均较高，虽然PCR的特异性是毋庸置疑的，但期检测灵敏度仅4.15%。（3）存在某些自身抗体的干扰VIRCELL公司呼吸道病原体九项联合检测试剂中，MP孔包被物为小鼠纤维母细胞（MsCoy）中的肺炎支原体。与MP相似，本实验室IIF法阳性的其余五项均以细胞作为基质，如ADV、RSV以人喉表皮样癌细胞（HEP-2细胞）作为基质，FluA、FluB、PIV恒河猴肾细胞（LLC-MK2细胞）作为基质；三项阴性检测结果均未使用细胞作为基质。以HEP-2细胞为例，其在检测自身抗体时常作为细胞基质。在Dellavance A［8］等对d70抗体的国际自身抗体参考标准中也提及，抗DFS70自身抗体在对HEp-2细胞进行间接免疫荧光检测时会产生特征性的密集斑点核模式。（4）假阳性荧光伪影的干扰IIF测试的性能受到较多技术细节的影响，包括细胞培养条件，细胞固定、标记抗体的来源和滴度、封闭介质，洗涤缓冲液等。这些因素都可能在实验过程中引起假阳性荧光伪影产生，为了避免假阳性荧光伪影的形成，在每次测定中均应使用阴性对照和阳性对

照［9］。

本报道表明，使用IIF检测呼吸道病原体抗体存在诸多干扰因素，可能带来实验结果的假阳性，这些因素在检验工作中可能被忽视，因此，建立合理的检测和分析流程尤为重要。检验科作为医院的重要组成部分，负责对疾病的辅助诊断工作，但检验不应脱离临床，检验科通过与临床的有效沟通，可促进临床标本的正确采集、检验结果的正确解读和分析［10］。此外，检验人员的操作和处理问题的能力在工作中尤为重要，严格按照操作说明书进行规范操作，合理的设置阴性和阳性对照，对不符合临床的阳性结果进行其他方法学的比较，都可能避免因某种方法学性能限制引起假阳性结果对临床病例判断的误导。