母牛早期妊娠诊断技术

岳立 李秀菊 吴风光

（山东省菏泽市食品药品检验检测研究院 274032）

妊娠诊断的方法很多，20 世纪70 年代开始，就有学者研究出RIA 法，这种方法可以检测母牛血液或乳汁中的P4 含量，而P4 含量可以直接反应母牛是否怀孕。随着技术的不断革新，后来又先后出现了EIA 法、多普勒法、EPF 法等方法可以用于早期妊娠诊断，但都由于价格昂贵、检测手段受限等原因没有推广，临床上也很难应用。但母牛早期妊娠诊断技术并没有从此停滞不前，而是继续向快速、便捷、造价低的方向发展[1]。

1 临床诊断法

1.1 外部观察法

适龄母牛配种成功后在下一个发情期不再发情，食欲和饮欲均有明显提高，被毛光亮，性格变得温顺，不再出现追逐、打架的情况。妊娠5 个月可以看到怀孕母牛的腹围增大，8 个月可以观察到胎动。外部观察法仅在怀孕中后期较为实用，基本不能作为早期妊娠诊断的方法。

1.2 直肠检查法

直肠检查法在大型牲畜临床诊断中起重要作用，这种方法需要操作人员将手及手臂伸入母牛直肠内，通过触诊来确定卵巢、子宫及胎儿的情况。怀孕初期一侧卵巢会明显增大，且能在卵巢上触诊到黄体，子宫角基本无变化，但可以感觉到子宫壁变厚。随着妊娠时间的延长，触诊可见两侧子宫角有一侧变粗、变软。怀孕3 个月后子宫角间沟被填平，子宫内有液体波动感，有时能触到胎儿。直肠检查法是较为经济的妊娠诊断方法，但对操作人员要求较高，没有经验的兽医较难掌握。

1.3 阴道检查法

妊娠一个月后的母牛可以应用阴道检查法进行检查，可以观察到阴道和子宫颈的颜色变得苍白，子宫颈口向一侧偏移，阴道黏膜干燥。这种方法虽然有一定的参考价值，但确诊准确率较低。

1.4 超声波检查法

常用于妊娠诊断的超声波检查包括：A 超、B 超和D 超3种，A 超是将探头插入阴道穹隆，而后进行检查的一种方法，这种方法在配种后18d 就可以检测出是否妊娠。B 超则是将探头抵在皮肤上就可以进行检查，最早可以对配种后30d 的母牛进行检测。D 超是通过将血流信号变为声音信号的一种检查方式，一般在母牛配种后20d 就可以进行妊娠早期诊断[2]。A 超和D 超都需要操作人员将手伸入母牛体内，虽然D 超的准确性很好，但仪器设备相对昂贵，推广起来有一定困难。常规B 超对妊娠30d 以内的母牛基本没有办法进行妊娠诊断，目前有实施B 超的方法最早可以检测妊娠26d 的母牛，确诊准确率可达88.9%[3]。

2 免疫学诊断法

怀孕母牛体内的早期妊娠因子、孕马血清促性腺激素、黄体酮、硫酸雌酮等物质的含量会与未妊娠的母牛有显著差异，且这些因子十分敏感，是母牛早期妊娠诊断的主要指标。早期妊娠因子在母牛开始妊娠后24h 就可以在血清或乳汁中被检测出来，常用的检测方法有3 种，分别是硫酸铜法、玫瑰花环抑制试验及ELISA 法，硫酸铜能凝集早期妊娠因子，所以将待检测牛的乳汁滴入3%的硫酸铜溶液中，如果待检测牛的乳汁颜色呈现云雾状该牛只已怀孕，这种方法的确诊准确率为98%。玫瑰花环抑制试验是将母牛T 淋巴细胞与其他动物的红细胞混合后会呈现玫瑰花环形，如果玫瑰花环抑制滴度增加则证明待检测牛为妊娠牛。ELISA 法目前没有商品化的试剂盒可供使用，所以应用不多。

黄体酮检测可以依靠RIA 法、ELISA 法、胶体金双抗夹心法、PLAIT 法等进行检测，其中PLAIT 法因其造价低、操作简单等优势在临床上经常应用。

3 小结

目前虽然已经建立了较多的母牛早期妊娠诊断方法，但在规模化养殖场上的应用尚存在一定困难，直肠检查法作为最简便、经济的方法，在临床上应用最为广泛，但对于妊娠早期诊断仍不能很好地完成，且对妊娠母牛进行直肠检查容易因操作不当造成流产，带来较大损失。虽然免疫学诊断法的早期妊娠诊断的准确性很高，但对仪器设备的要求较高，且成本不低。所以，在母牛早期妊娠诊断这一领域仍需要广大畜牧兽医工作者共同努力。