基于“成分-靶点-通路”的枸杞子调控年龄相关性黄斑变性作用机制研究

郑慧丽，曹 程，王颖异，陈晨凯，张浩宽，张 芳，朱 悦，段金廒

基于“成分-靶点-通路”的枸杞子调控年龄相关性黄斑变性作用机制研究

郑慧丽1, 2, 3，曹 程1, 2, 3，王颖异1, 2, 3，陈晨凯1, 2, 3，张浩宽1, 2, 3，张 芳1, 2, 3，朱 悦1, 2, 3*，段金廒1, 2, 3*

1. 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程中心，江苏 南京 210023 2. 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心，江苏 南京 210023 3. 江苏省方剂高技术研究重点实验室，江苏 南京 210023

采用网络药理学方法探讨枸杞子改善年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）的活性成分及作用机制。以检索TCMSP数据库和查阅文献获得的枸杞子潜在活性成分为研究对象，通过Swiss Target Prediction平台、GeneCards数据库、OMIM数据库、DDT数据库和Drugbank数据库预测活性成分的潜在靶点；应用Metascape平台对潜在靶点进行基因本体（gene ontology，GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析；运用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络和“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络；考察枸杞子不同提取部位对碘酸钠诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19活力的影响，以及对脂多糖诱导的小鼠小胶质细胞系BV2中炎症因子表达的影响。枸杞子中的88个活性成分通过调控血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGFA）、白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）等靶点，参与氧化应激、炎症反应等生物学过程，影响晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products，AGE）-晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products，RAGE）、IL-17、TNF等信号通路发挥改善AMD的作用。枸杞子95%乙醇提取部位能够显著提高碘酸钠诱导的ARPE-19细胞活力（＜0.001），并显著降低脂多糖诱导的BV2细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平（＜0.05、0.01、0.001）。枸杞子中多种成分具有影响AMD相关靶点的潜在作用，枸杞子能够通过改善氧化损伤、抑制炎症反应治疗AMD，为后续深入研究枸杞子中不同活性成分调节AMD的作用机制提供依据。

网络药理学；枸杞子；年龄相关性黄斑变性；氧化应激；炎症反应；95%乙醇提取部位

年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）多发于60岁以上的老人，主要影响视网膜中央凹黄斑区域，可导致永久性视力障碍或失明，严重影响患者的生活质量。对AMD患病率的最新荟萃分析显示[1]，45～85岁人群AMD的患病率约为8.7%，其中早期患病率约为8%，晚期患病率约为0.4%。随着人口老龄化加剧，预计2040年全球受AMD影响的人数将增加至2.88亿[2-3]。作用于血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的药物可降低失明和严重视力损害[4-5]，但国际上尚无治疗干性AMD的药物。

中医学认为，AMD属于“视直为曲”“视瞻昏渺”“暴盲”的范畴。《灵枢·大惑论》中“五脏六腑之精气皆上注于目而为之精”，明确了眼睛与脏腑之间的关系。中医学认为肝肾亏虚、脾气虚弱是AMD的基本病机，滋补肝肾、活血化瘀、益精明目AMD的基本治法[6-7]。枸杞子为茄科植物宁夏枸杞L.的干燥成熟果实，《本草纲目》中记载“枸杞子除邪热、明目轻身，可用于虚劳亏损、眩晕耳鸣、内热消渴、目眩不明等病症”。枸杞子中化学成分较为丰富，主要包括多糖、糖脂、甾醇及固醇类、黄酮类、类胡萝卜素、酰胺类、生物碱、氨基酸、脂肪酸、萜类等成分。研究表明，枸杞子具有抗氧化、抗炎、免疫调节、神经保护等作用[8-9]，为治疗AMD的常用代表中药[10]。

网络药理学融合了系统生物学、多向药理学和计算机分析技术，通过多层次阐明药物的作用机制，具有整体性、系统性的特点，与中医药治疗的整体性和协同性相契合[11-12]。本研究采用网络药理学构建“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络，从整体揭示枸杞子对AMD的干预作用及其机制，为后续深入研究枸杞子中不同活性成分调节AMD的作用机制以及抗AMD药物的研发提供依据。

1 材料与方法

1.1 活性成分的收集

通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP，http://lsp. nwu.edu.cn/tcmsp.php）[13]以口服生物利用度≥30%、类药性≥0.18为筛选条件，结合国内外文献调研获取枸杞子活性成分信息，通过PubChem数据库和ChemDraw 18.0软件获得活性成分的分子结构。

1.2 靶点的预测与筛选

以筛选所得的活性成分为研究对象，通过TCMSP、Swiss Target Prediction平台（http://www. swisstargetprediction.ch/）[14]预测靶点。以“AMD”“湿性AMD”“新生血管性AMD”“湿性AMD”“地图样萎缩”为疾病关键词，通过OMIM（https://omim.org/）、GeneCards（https://www. genecards.org/）、TTD（http://db.idrblab.net/ttd/）和DurgBank（https://www.drugbank.ca/）数据库进行检索，并与枸杞子靶点取交集，获得枸杞子改善AMD的潜在靶点。

1.3 蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络构建

为了明确枸杞子活性成分与AMD靶点之间的对应关系，取二者靶点的交集，通过STRING（https://string-db.org）数据库构建交集靶点PPI网络，将生物种类设定为人类，最小相互作用阈值设定为0.4。通过Cytoscape 3.7.2软件中MCODE和Network Analyzer功能对PPI网络进行聚类分析和拓扑分析，获得枸杞子调控AMD的核心靶点。

1.4 基因本体（gene ontology，GO）富集分析与京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路分析

将枸杞子改善AMD的靶点输入Metascape平台（https//www.metascape.org），将生物种类设定为人类，设置＜0.001，进行GO富集分析和KEGG通路分析，保存数据并进行可视化处理。

1.5 “药物-成分-靶点-通路-疾病”网络的构建

将枸杞子活性成分、潜在靶点与疾病通路富集分析结果进行映射，导入Cytoscape软件，构建“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络图。

1.6 实验验证

1.6.1 细胞株 人视网膜色素上皮细胞ARPE-19和小鼠小胶质细胞系BV2均购自上海赛百慷公司。

1.6.2 药物及提取物制备 枸杞子（批号1612102）购自宁夏明德中药饮片有限公司，经南京中医药大学中药资源产业化过程协同创新中心段金廒教授鉴定为茄科植物宁夏枸杞L.的干燥成熟果实。按图1提取流程制备得到枸杞子水提取液（ST）、多糖部位（DT）、水部位（SBW）、30%乙醇部位、70%乙醇部位、95%乙醇部位、水提后醇提取液（SC）和色素部位（SS）。各样品经离心浓缩或冻干后，称取10 mg溶于DMSO配制成质量浓度为10 mg/mL的母液，经0.22 μm滤膜滤过，于−20 ℃保存备用。

1.6.3 试剂 DMEM/F-12培养基（批号10092011）、MEM-Eagle培养基（批号12120005）购自Corning公司；0.25%胰蛋白酶（批号2038152）、胎牛血清（批号2177370）、青霉素-链霉素-制霉素溶液（批号2012208）购自Gibco公司；噻唑蓝溴化四唑（批号I1810035）、碘酸钠（批号E1802068）购自Aladdin公司；脂多糖（批号12180309）购自Sigma公司；Trizol（批号176908）购自Life Technology公司；FastKing gDNA Dispelling RT SuperMix试剂盒（批号S8125）购自TianGen公司、Green qPCR SuperMix检测试剂盒（批号N41217）购自北京全式金生物技术有限公司；白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）引物由上海英潍捷基公司合成。

1.6.4 仪器 1300 series A2细胞恒温培养箱（Thermo Fisher Scientific公司）；多功能酶标仪（PerkinElmer公司）；QuantStudio 5荧光实时定量PCR仪（美国AB公司）。

1.6.5 枸杞子提取物对碘酸钠诱导的ARPE-19细胞活力的影响 将处于对数生长期的ARPE-19细胞以4×104个/mL接种于96孔板，于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h。设置对照组、模型组、枸杞子不同部位药物（1、3、10 μg/mL）组，模型组和各给药组加入碘酸钠（1.3 mg/mL），各给药组另加入相应药物，对照组加入不含药物的10% FBS DMEM/F-12培养基，培养24 h。每孔加入MTT（500 μg/mL）溶液，孵育4 h，弃去上清，每孔加入150 μL DMSO，于37 ℃摇床孵育30 min，于570 nm处检测吸光度（）值。

图1 枸杞子提取物制备流程

1.6.6 枸杞子提取物对脂多糖诱导的BV2细胞中炎症因子表达的影响 将融合度为70%的BV2细胞以4×105个/mL接种于6孔板中，培养24 h。设置对照组、模型组、枸杞子不同部位药物（1、3、10 μg/mL）组，模型组和各给药组加入脂多糖（1 μg/mL），各给药组另加入相应药物，对照组加入不含药物的培养基，培养2 h。以磷酸盐缓冲液洗涤2遍后，按照Trizol试剂盒说明书提取细胞总RNA后，按照试剂盒说明书制备cDNA，进行qRT-PCR。引物序列：IL-6上游引物为5’-CGTCACACATCCCGTCAG-3’，下游引物为5’-GGATGAGGGATGCCAGTTG-3’；IL-1β上游引物为5’-TGCTGAATCCAAGCCTCTG-3’，下游引物为5’-TTTAATGCAACTTCCCTT-3’；TNF-α上游引物为5’-GGATCCTGCACATGGGTAC-3’，下游引物为5’-CTGTTCCTCCAGGTCGATG-3’；GAPDH上游引物为5’-GACGCTGCTCATCCCACTA-3’，下游引物为5’-CCACCTGGTCCTCATCGTT-3’。

1.7 数据处理

2 结果

2.1 枸杞子活性成分的筛选

通过TCMSP数据库得到枸杞子活性成分36个，删除重复值后共35个。通过检索国内外文献得到枸杞子活性成分265个[15-23]，合并2次检索信息，删除重复值，共获得枸杞子活性成分287个，其具体类型及分布见图2。

2.2 潜在靶点预测

将上述活性成分的结构导入Swiss Target Prediction平台预测靶点，共获得靶点1133个。可能性值越高表明该靶点可信度越高，根据靶点的可信度，取可能性≥0.5的126个靶点进行下一步分析。通过TCMSP数据库获得194个靶点，合并2次检索信息，删除重复值，共获得枸杞子靶点444个。从Genecards数据库获得AMD靶点3021个，疾病靶点度值最大值为156.59，最小值为0.23，取其2倍中位数，设定相关度大于6.47的靶点为AMD的潜在靶点。结合OMIM、TTD、DrugBank数据库相关靶点，整合并删除重复值，经Uniport数据库规范化后得到553个疾病靶点。利用Venn作图取交集，如图3所示，得到80个枸杞子改善AMD的潜在靶点。

2.3 PPI网络分析

将从String数据库获得的靶点PPI图导入Cytoscape软件，通过MCODE聚类分析功能得到核心子网络，如图4所示，靶点度值越大，形状越大，表明靶点与网络中其他靶点连接越紧密。VEGFA、白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、IL-6、TNF、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase- 9，MMP-9）等排名靠前的靶点为枸杞子改善AMD的核心靶点。

2.4 GO富集分析和KEGG通路分析

2.4.1 GO分析 利用Matescape平台对枸杞子调控AMD的潜在靶点进行GO分析，枸杞子主要通过参与调节对无机物的反应、对有毒物质的反应、活性氧代谢过程、对氧化应激的反应、细胞因子介导的信号通路等1816个生物过程发挥改善AMD的作用，将＜0.001排名前10的条目运用R语言绘制气泡图，如图5所示。

2.4.2 KEGG分析 利用Matescape平台对枸杞子调控AMD的潜在靶点进行KEGG分析，枸杞子主要通过参与调节流式剪切应力与动脉粥样硬化通路、晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products，AGE）-晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products，RAGE）信号通路、癌症通路、白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）信号通路、TNF信号通路、缺氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）信号通路等135个通路发挥改善AMD的作用，将＜0.001排名前10的条目运用R语言绘制气泡图，如图6所示。

2.5 “药物-成分-靶点-通路-疾病”网络

通过CytoScape 3.7.2软件构建“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络，如图7所示，该网络共有180个节点（包括1种药材、88个活性成分、80个靶点、10条通路、1个疾病）。拓扑分析结果如表1所示，槲皮素、杨梅素、谷氨酸、β-胡萝卜素、桑色素等节点度值排名靠前，可能为枸杞子中的主要活性成分。

2.6 枸杞子提取物对碘酸钠诱导的ARPE-19细胞活力的影响

如图8所示，与模型组比较，各质量浓度的枸杞子95%乙醇部位均可显著升高ARPE-19细胞活力（＜0.001），70%乙醇部位次之（＜0.05、0.01、0.001），此外，ST低剂量组和SC中剂量组可显著提高ARPE-19细胞活力（＜0.05、0.01），表明枸杞子95%和70%乙醇部位对碘酸钠诱导的ARPE-19细胞损伤有较好的保护作用。

图2 枸杞子中潜在活性成分类型及其分布

图3 枸杞子成分与AMD靶点的韦恩图

图4 枸杞子成分与AMD靶点的PPI网络分析

图5 GO富集分析

图6 KEGG富集分析

绿色三角形代表药物；蓝色圆圈代表枸杞子活性成分；绿色菱形代表靶点；红色箭头代表通路；蓝色三角形代表疾病

表1 枸杞子活性成分拓扑信息

续表1

编号名称化学式度值 GQ60zeaxanthin monopalmitate C56H86O36 GQ61zeaxanthin dipalmitateC72H116O46 GQ62zeaxanthin monomyristateC54H82O32 GQ63zeaxanthin myristate palmitateC70H112O46 GQ64β-cryptoxanthin palmitateC56H82O26 GQ69tetraterpenyl hexaarabinoside C70H118O2611 GQ70violaxanthin dipalmitateC72H116O64 GQ71aspartic acidC4H7NO44 GQ72L-threonineC4H9NO35 GQ73serineC3H7NO36 GQ74L-glutamic acidC5H9NO414 GQ75alanineC3H7NO27 GQ76valineC5H11NO24 GQ77methionineC5H11NO2S2 GQ78isoleucineC6H13NO23 GQ79L-leucineC6H13NO23 GQ80tyrosineC9H11NO35 GQ81L-arginineC6H14N4O22 GQ82tryptophanC11H12N2O22 GQ83prolineC5H9NO22 GQ84γ-aminobutyric acidC4H9NO24 GQ85L-ornithineC5H12N2O22 GQ86nicotinic acidC6H5NO24 GQ87adenineC5H5N52 GQ88α-tocopherolC29H50O22

与对照组比较：###＜0.001；与模型组比较：*＜0.05**＜0.01***＜0.001

###< 0.001control group;*< 0.05**< 0.01***< 0.001model group

2.7 枸杞子提取物对脂多糖诱导的BV2细胞炎症因子mRNA表达的影响

如图9所示，与对照组比较，模型组BV2细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA水平显著升高（＜0.001）；与模型组比较，ST中、高剂量组及SC低剂量组及SS中、高剂量组、各剂量SBW组及30%乙醇部位低、中剂量组及70%乙醇部位低、中剂量组及95%乙醇部位各剂量组均能显著下调BV2细胞中IL-6 mRNA水平（＜0.05、0.01、0.001）；ST高剂量组、SC低剂量组、SS高剂量组、SBW高剂量组及70%乙醇部位中、高剂量组及95%乙醇部位中、高剂量组均能显著下调BV2细胞中IL-1β mRNA水平（＜0.05、0.01、0.001）；ST低、高剂量组及SC各剂量组、DT高剂量组、SS高剂量组及SBW中、高剂量组及30%乙醇部位中剂量组及70%乙醇部位低、中剂量组及95%乙醇部位各剂量组均能显著下调BV2细胞中TNF-αmRNA水平（＜0.05、0.01、0.001）。

3 讨论

研究表明，部分患者对临床用于治疗湿性AMD的抗VEGF药物无应答反应，且患者可能由于长期抑制视网膜血管生成，导致萎缩性视网膜病变加重而丧失视力[24]。中医学认为，AMD早期以脏腑精气亏虚、目失濡养为主，后期出现痰、湿、热、瘀，其病理机制与肝肾亏虚、脾气虚弱有关，调理脏腑、气血津液盈亏和脉络论治对AMD具有一定疗效[25]。枸杞子作为传统的滋补肝肾、益精明目中药，用于治疗血虚萎黄、目昏不明等病症[26]。基于中医传承辅助平台的AMD方剂中用药频次分析，发现枸杞子为使用频率排名前3的中药之一[10]。本研究基于网络药理学的整体性与系统性，对枸杞子治疗AMD的药效物质基础及作用机制进行挖掘，以期为枸杞子的开发和AMD临床药物的研发提供参考。

与对照组比较：###P＜0.001；与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001

AMD是一种以慢性炎症、氧化应激、衰老为特征的退行性疾病。视网膜色素上皮细胞RPE衰老过程中，由活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）引起的一系列进行性损伤，导致蛋白质错误折叠，引起细胞功能异常，RPE细胞丢失为干性AMD的特征病理表现[27]。小胶质细胞作为视网膜上固有巨噬细胞，可以触发炎症反应和血管生成，在视网膜变性的发生发展中发挥重要作用[28]。碘酸钠作为一种氧化性化合物，能够诱导RPE细胞内ROS产生[29]，被广泛用于RPE细胞和光感受器细胞死亡机制的研究[30]。GO功能和KEGG通路分析结果表明，枸杞子主要通过调控活性氧代谢过程、对氧化应激的反应，影响IL-17、TNF信号通路改善AMD，本研究以碘酸钠诱导ARPE-19细胞建立氧化损伤细胞模型，以脂多糖诱导BV2细胞建立炎症细胞模型，对枸杞子改善氧化应激和炎症反应进行初步验证。

由“成分-靶点-通路”网络可知，枸杞子中88个活性成分主要通过VEGFA、CXCL8、IL-6、TNF-α、MMP-9等靶点，影响AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路，发挥改善AMD的作用。VEGFA为血管内皮生长因子，参与视网膜新生血管的形成，为湿性AMD药物作用的靶点。VEGF表达受HIF-1调控，当视网膜微血管网进行性损伤导致组织缺血，HIF-1表达上调，VEGF分泌增加，刺激新的视网膜前血管叶发育为特征的视网膜新生血管[31]。枸杞子中的甜菜碱能够通过抑制蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）激活，下调糖尿病大鼠视网膜HIF-1α和VEGF的表达抑制糖尿病患者视网膜新生血管形成[32]。细胞外基质金属蛋白酶系统失调与AMD病理中Bruch膜增厚和玻璃膜疣的积累密切相关[33]，MMP-9主要参与细胞外基质局部蛋白水解和白细胞迁移，研究表明叶黄素和玉米黄质可能通过下调RPE细胞中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase，MMP-2）、金属蛋白酶-2组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinases-2，TIMP-2）蛋白酶体的表达改善AMD[34]。由KEGG通路富集分析可知，枸杞子主要通过AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路和TNF信号通路抑制CXCL8、IL-6、TNF-α、IL-1β等靶点蛋白的表达改善AMD。研究表明，枸杞子中类胡萝卜素成分能够降低RPE细胞ROS、TNF-α和IL-1α的表达，改善视网膜炎症[8]。Bruch膜内胶原蛋白层和RPE基底膜之间脂质-蛋白碎片的沉积，以及细胞外基质交联度增加和AGEs的积累参与AMD病理形成[32]；枸杞多糖具有显著的神经保护作用，能通过降低AGEs水平，拮抗AGEs对神经细胞的损伤，进而保护视网膜神经细胞[35-36]。细胞实验结果显示，枸杞子水提物经大孔树脂70%乙醇和95%乙醇洗脱部位对碘酸钠诱导的ARPE-19细胞有显著的保护作用，且95%乙醇洗脱部位可显著降低脂多糖诱导的BV2细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平，表明枸杞子可以通过抗氧化、降低视网膜炎症反应改善AMD。

本研究采用网络药理学方法构建了“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络，并通过体外实验对枸杞子改善氧化应激、抑制炎症反应的活性进行了初步验证，为后续深入研究枸杞子中不同活性成分调节AMD的作用机制提供参考。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Machansim ofon regulating age-related macular degeneration based on “component-target-pathway”

ZHENG Hui-li1, 2, 3, CAO Cheng1, 2, 3, WANG Ying-yi1, 2, 3, CHEN Chen-kai1, 2, 3, ZHANG Hao-kuan1, 2, 3, ZHANG Fang1, 2, 3, ZHU Yue1, 2, 3, DUAN Jin-ao1, 2, 3

1. National and Local Collaborative Engineering Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization and Formulae Innovative Medicine, Nanjing 210023, China 2. Jiangsu Collaborative Innovation Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization, Nanjing 210023, China 3. Jiangsu Province Key Laboratory of High Technology Research, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China

To explore the mechanism and active components ofin treating age-related macular degeneration (AMD) based on network pharmacology and molecular experimental validation.Active compounds ofobtained from TCMSP database and literature investigation were selected as the research objects. Swiss Target Prediction platform, GeneCards, OMIM, DDT, and Drugbank database were used to screen and predict potential targets. Metascape platform was used for gene ontology and Kyoto encyclopedia of genes and genomes enrichment analysis of potential targets. The protein-protein interaction network model and “drug-ingredients-targets-pathways-disease” network were constructed by using String database and Cytoscape software. The effects of different extraction parts ofon the activity of ARPE-19 of human retinal pigment epithelial cells induced by sodium iodate and the expression of inflammatory factors in mouse microglia cell line BV2 induced by lipopolysaccharide were investigated.A total of 88 active ingredients inmight regulate vascular endothelial growth factor A (VEGFA), interleukin-8 (IL-8), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor (TNF), matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and other targets. Potential targets mainly involve biological processes such as response to oxidative stress, regulation of inflammatory response, which played roles in the treatment of AMD by adjusting AGE-RAGE signaling pathway, IL-17 signaling pathway, and TNF signaling pathway. The results showed that the 95% ethanol extracts ofsignificantly improved the survival rate of ARPE-19 cells damaged by sodium iodate (< 0.001) and reduced the mRNA levels of IL-6,IL-1β, and TNF-α in BV2 cells induced by lipopolysaccharide (< 0.05, 0.01, 0.001).The results of network pharmacology showed that a variety of components inhad potential effects on AMD related targets, and preliminarily proved thatcould treat AMD by improving oxidative damage and inhibiting inflammatory response, which can provide references for further research on the mechanism of AMD regulation by different active compounds in.

network pharmacology;; age-related macular degeneration; oxidative stress; inflammatory response;95% ethanol extract

R285.5

A

0253 - 2670(2021)04 - 1039 - 10

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.04.017

2020-11-19

国家自然科学基金资助项目（81773837）

郑慧丽（1995—），女，硕士研究生，研究方向为中药化学与分析。Tel: 18851093140 E-mail: 2503567239@qq.com

段金廒，男，博士生导师，研究方向为中药资源化学与资源循环利用及产业化。Tel: (025)85811917 E-mail: dja@njucm.edu.cn

朱 悦，男，硕士生导师，研究方向为中药功效物质基础研究。Tel: (025)85811917 E-mail: zhuyue@njucm.edu.cn

[责任编辑 李亚楠]