探讨全自动微生物鉴定药敏分析仪对临床相关细菌的鉴定能力及应用价值

沈阳市第一人民医院检验科 （辽宁 沈阳 110041）

内容提要：目的：分析全自动微生物鉴定药敏分析仪对临床相关细菌的鉴定能力及应用价值。方法：选择本院临床院内标本120例患者，其呼吸道、生殖道、泌尿系统、血液样本当中分离出的菌株，以及本院医学资料库当中保存的参考菌株60例，以及4例国家资料库提供的质控菌株作为本次检测的样本。选择德国西门子公司生产的MicroScan AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析仪，以及相对应的6套鉴定标卡作为实验仪器，对比不同菌株的鉴定正确率、鉴定耗费时间以及药敏试验结果。结果：5例质控菌株各自检测十次，共50次，鉴定重复率为100%，60例革兰氏阳性菌鉴定正确率为92.54%，60例革兰氏阴性菌中鉴定正确率为97.5%。结论：药敏分析仪具有较好的检测效果，可以在比较短的时间内给出准确的鉴定结果。

本文主要采取德国公司生产的MicroScan AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析仪，进行临床鉴定分析，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

选择2018年2月～2019年11月本院临床院内标本120例患者，其呼吸道、生殖道、泌尿系统、血液样本当中分离出的菌株，以及本院医学资料库当中保存的参考菌株60例，以及4例国家资料库提供的质控菌株作为本次检测的样本。其中革兰氏阴性菌60例，革兰氏阳性菌60例，菌株类型不重复。排除标准：不在MicroScan AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析仪鉴定范围内的菌株。

1.2 方法

（1）仪器设备与应用：采用德国西门子公司生产的MicroScan AutoScan-4型全自动微生物药敏分析鉴定仪，以及对应的6种鉴定标卡。通过色泽对比检测方式，按照波形不同，对于每一种鉴定标卡的光路进行对比，在15min之内，对6种标卡的16个方位卡槽进行置换检测。其中标卡1主要检测革兰氏阴性杆菌，标卡2主要检测革兰氏阳性杆菌，两种标卡的鉴定时间均控制在3～10h之内。对于两种标卡的鉴定结果进行全面的数据比对。

（2）检测方法：在比对之前，详细阅读不同标卡当中的药敏实验要求，并将样本接种到配比好的羊血培养基上，并用哥伦比亚琼脂，按照5%的浓度进行相关配比。鉴定环境要控制在34～35.5°C，血液培养时间控制在19～24h之内。

（3）严格保障培养皿本身无菌，并采用氯化钠溶液的配比菌悬液等，对于仪器本身进行管理。检测过程当中，将盛有药敏卡的分析仪放在仪器的检测架上，并携带到孵育仓当中，对于药敏实验的鉴定样本进行细菌鉴定范围的有效查找。

（4）对本研究所选取的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌等几种质控菌株各检测十次，鉴定重复性。并分析采集到的120株病原菌和本院数据库当中保存的参考菌株，进行正确性以及鉴定时间的分析，分析上述菌株的药敏鉴定结果。

1.3 观察指标

按照首选鉴定、低分辨鉴定和属对种错鉴定三种评价方式，对于上述菌株的药敏试验结果以及正确率和鉴定时间进行控制。

2.结果

2.1 MicroScan AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析仪鉴定准确率分析

大肠杆菌、微球菌等四种菌株鉴定时间为3～9h，平均（6.54±1.42）h，其中超过70%的菌株在4h之内完成鉴定，革兰氏阴性菌药敏符合率为94.25%，革兰氏阳性菌药敏符合率为94.38%。几种检测方式之间无显著差异（P＞0.05）。详见表1。

表1.MicroScan AutoScan-4细菌鉴定及药敏分析仪鉴定准确率

2.2 菌株鉴定准确率对比

5例质控菌株各自检测10次，共50次，鉴定重复率为100%，60例革兰氏阳性菌鉴定正确率为92.54%，60例革兰氏阴性菌中鉴定正确率为97.54%。详见表2。

表2.鉴定准确率

2.3 两组鉴定平均时间情况对比

大肠杆菌、微球菌等四种菌株鉴定时间为3～9h，平均（6.54±1.42）h，其中超过70%的菌株在4h之内完成鉴定。详见表3。

表3.两组鉴定平均时间情况对比(%)

3.讨论

鉴定细菌本质上是对细菌的分类，长期以来实验室主要通过传统鉴定方法，耗时长，且误差大，更容易受到试验人员主观判断的影响。全自动鉴定药敏分析仪是在20世纪的中期得到研发和应用，其原理在于根据细菌酶系统的差异性，各新陈代谢的产物不同，因此生化特性有显著差异，会产生不同颜色的变化，因此进行分类。目前全自动微生物药敏分析仪分为两类进行检测，并具备对应的鉴定卡，具有较高的敏感性，能够对400种以上细菌精准区分鉴定，从而支持临床应用。全自动方法能够有效提高鉴定效率，大幅缩短鉴定时间，具有较好的重复性，操作简便，提高鉴定结果的准确性。

目前医疗研究领域主要应用的药敏检测方法包含比浊法与荧光测定法。本研究选择的全自动微生物药敏分析仪是通过比浊法进行鉴定，其具有良好的重复性以及时效性，操作简便，能够对细菌种类进行精确划分。仪器可以在不同分辨率下观察细菌，更为准确地评估细菌耐药性，可用于药物的研究以及临床用药指导，具有较高实践价值。本文多采用的MicroScan AutoScan-4全自动微生物药敏分析仪可在多个稀释梯度进行检测，仪器采用6个测试孔位，在加入一定的菌悬液之后，可应用光电比浊仪进行对比分析[1-4]。MicroScan AutoScan-4全自动微生物药敏分析仪目前已经在我国的多个公共医疗检测机构当中得到了广泛的应用，该仪器应用比浊法来进行菌株的对比工作，每15min就可以进行一次比着鉴定，通过透光度的比对，来从曲线图谱当中获得相对应的菌株药敏鉴定结果。该仪器配备的曲线分析图，可以得到比较准确地分析图谱对于头孢西丁指导下的不同菌株耐药程度，进行浑浊性反馈[5]。如果头孢西丁筛选呈现阳性，也就是说葡萄球菌等菌株对于甲氧西林的耐药性比较显著，而如果没有出现浑浊反应现象，就可以表明该菌株对于甲氧西林呈现敏感。从本研究当中可以看出，四种质控菌株的整体鉴定重复率可以达到百分之百，大肠杆菌、微球菌等四种菌株鉴定时间为3～9h，平均（6.54±1.42）h，其中超过70%的菌株在4h之内完成鉴定。

综上所述，使用全自动微生物药敏分析仪可以提高细菌分析鉴定的准确性和效率，实现精准检测，在短时间内提供鉴定结果，满足临床的应用。鉴定结果用于指导临床用药，能够满足临床准确用药的规范，促进患者早日康复。同时应用于药物研发中也具有实践价值，能够提高药物研发的准确性，在很多医疗机构中得到应用。