血清IL-6、TNF-α检测对药物性肝损伤严重程度的预测价值研究

谭丽娟 徐沛演 李 俐

1.广州市花都区人民医院感染性疾病科，广东广州 510800；2.广州市花都区人民医院心血管内科，广东广州 510800

药物性肝损伤主要是指患者用药后，由于药物本身、药物的代谢产物、患者对药物敏感或其耐受性降低等多因素作用导致肝脏受损[1]。一般在临床上，轻度药物性肝损伤患者停用药物后可自行恢复，而肝受损严重的，可直接危及患者的生命安全。因此，早期诊断药物性肝损伤并准确判断其损伤严重程度，对于临床治疗方案制定，改善患者的预后具有重要的作用[2]。药物性肝损伤早期无临床症状，肝功能指标检测虽为药物性肝损伤诊断的主要观察指标，但其检测到异常时，患者的肝脏往往已发生较为明显的病理变化[3]，故寻找判断早期药物性肝损伤的较敏感指标为当前临床研究的重难点。有研究发现[4]，药物性肝损伤的发生发展与炎症细胞因子介导肝内炎症反应密切相关。白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）为机体炎症反应的主要细胞因子，检测上述指标含量变化可在一定程度上反映机体炎症反应情况[5-6]。本研究拟探讨血清IL-6、TNF-α 检测对药物性肝损伤严重程度的预测价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年5月～2019年12月在广州市花都区人民医院就诊的61 例药物性肝损伤患者作为研究对象，根据其肝损伤严重程度分为轻度肝损伤组（n=30）、中度肝损伤组（n=24），重度肝损伤组（n=7）。另选同期体检健康者35 例作为正常对照组，此组患者无肝炎病史和长期药物服用史，肝功能指标检测无异常。纳入标准：①符合药物性肝损伤的相关诊断标准；②首次确诊药物性肝损伤，且就诊前未进行治疗；③自愿配合进行实验室检测；④患者签署知情同意书。排除标准：①伴有全身感染性疾病、原发性肝功能损伤疾病、恶性肿瘤；②处于妊娠期、哺乳期的女性；③有肝炎、肝硬化、脂肪肝等肝病史。研究经医院医学伦理委员会审批同意。

1.2 方法

1.2.1 肝损伤严重程度分级标准 参考2015年版《药物性肝损伤诊治指南》[7]，轻度肝损伤：谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）呈恢复性升高，总胆红素（TBil）＜42.75 μmol/L，国际标准化比值（INR）＜1.5，患者可能有乏力、食欲差、右上腹轻度疼痛、轻度黄疸、体重略下降、皮肤瘙痒等症状，可耐受。中度肝损伤：ALT、ALP 检测值升高，42.75 μmol/L≤TBil＜85.5 μmol/L，INR≥1.5，乏力、食欲差、右上腹疼痛、黄疸、消瘦等一系列症状加重。重度肝损伤：ALT、ALP 检测值升高，TBil≥85.5 μmol/L，INR≥1.5，上述一系列症状体征进一步加重。

1.2.2 药物性肝损伤治疗方法 药物性肝损伤患者一经确诊，立即停止使用相关药物或可疑药物，无法停药的患者选择对肝脏损害相对较小的药物替代或减量，并给予患者护肝、退黄、复合维生素等对症治疗。中重度药物性肝损伤者可根据患者实际病情予以血浆、白蛋白等支持治疗，病情严重还可联合使用血液灌流治疗。

1.2.3 药物性肝损伤治疗效果评价标准 药物性肝损伤患者治疗2 周后进行疗效评价，显效：经对症治疗后，药物性肝损伤患者的谷草转氨酶（AST）、ALT 水平恢复正常范围；有效：经对症治疗后，患者的AST、ALT水平在40～200 U/L，或AST、ALT 水平较治疗前降低＞50%；无效：经对症治疗后，患者的AST、ALT 水平＞200 U/L，或AST、ALT 较治疗前的降低幅度≤50%[8]。

1.3 观察指标及检测方法

1.3.1 观察指标 ①比较轻度肝损伤组、中度肝损伤组、重度肝损伤组、正常对照组患者之间的AST、ALT、IL-6、TNF-α 的检测值差异，且分析药物性肝损伤患者的IL-6、TNF-α 与AST、ALT 水平的相关性。②比较药物性肝损伤患者治疗前、治疗3 d 后的AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平变化，并比较治疗有效者与治疗无效者的AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平差异。

1.3.2 仪器与试剂日立7600 型全自动生化分析仪（日本）；Multiskan MK3 型全自动酶标仪（美国热电Thermo）；AST（生产批号：160725）、ALT（生产批号：161916）、ALP（生产批号：161109）检测试剂盒均购自武汉艾美捷科技有限公司；TBil 检测试剂盒（生产批号：160310） 购自北京世纪沃德生物科技有限公司；IL-6（人）ELISA 检测试剂盒（生产批号：160901）购自武汉艾美捷科技有限公司，TNF-α 检测试剂盒（生产批号：161212）购自上海齐一生物科技有限公司。

1.3.3 检测方法 治疗前对各组研究对象进行肝功能及血清IL-6、TNF-α 检测，并于药物性肝损伤患者对照治疗3 d 后再次进行上述指标检测，具体方法如下：①标本收集： 抽取空腹静脉血3～5 mL 于含肝素锂抗凝试管中送检，上述血样本均在采集的2 h 内将其进行离心处理（离心速度3000 r/min，离心半径10 cm）10 min，取血清部分待检。②血清IL-6、TNF-α 检测：在酶标仪上检测，严格按照试剂盒说明书操作，IL-6正常参考值为0～8 pg/mL；TNF-α 正常参考值为0～0.8 ng/mL。③血清AST、ALT、ALP、TBil 检测：应用全自动生化分析仪进行检测，按照相关试剂盒说明书操作。AST 正常参考值为8～40 U/L，ALT 正常参考值为5～40 U/L，ALP 正常参考值为40～110 U，TBil 正常参考值为1.71～17.1 μmol/L。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，任意两组间比较采用LSD-t检验；治疗前后组内比较采用配对t检验；相关性分析采用Pearson相关系数；计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前四组基线资料及血清AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较

治疗前，四组患者的性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。各组血清AST、ALT、IL-6、TNF-α水平经方差分析，差异有统计学意义（P＜0.05）；各组间的AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平比较，正常对照组＜轻度肝损伤组＜中度肝损伤组＜重度肝损伤组，各组间两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 治疗前四组基线资料及血清AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较（±s）

表1 治疗前四组基线资料及血清AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较（±s）

与正常对照组比较，aP＜0.05；与轻度肝损伤组比较，bP＜0.05；与中度肝损伤组比较，cP＜0.05

性别（n）男组别 例数年龄（岁） AST（U/L） ALT（U/L） IL-6（pg/mL） TNF-α（ng/mL）女正常对照组轻度肝损伤组中度肝损伤组重度肝损伤组35 30 24 7 18 16 14 4 17 14 10 3 48.94±11.37 48.26±11.83 49.10±11.08 50.01±10.72 26.81±4.87 43.68±5.60a 118.05±36.90ab 167.96±28.58abc 29.11±6.16 43.43±4.25a 133.35±47.43ab 216.79±31.14abc 4.94±1.38 8.77±0.63a 10.87±1.57ab 14.93±2.24abc 0.66±0.10 1.13±0.21a 1.97±0.44ab 3.46±0.51abc

2.2 轻、中、重度肝损伤组引起药物性肝损伤药物种类的比较

轻度肝损伤组、中度肝损伤组和重度肝损伤组间引起药物性肝损伤的药物种类比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

表2 轻、中、重度肝损伤组引起药物性肝损伤的药物种类的比较（n）

2.3 药物性肝损伤患者IL-6、TNF-α与AST、ALT 水平的相关性分析

经Pearson相关性分析发现，治疗前药物性肝损伤患者的血清IL-6 水平与血清AST 呈正相关（r=0.620，P=0.000），与血清ALT 也呈正相关（r=0.778，P=0.000）。血清TNF-α 水平与血清AST 呈正相关（r=0.742，P=0.000），与血清ALT 也呈正相关（r=0.744，P=0.000）。

2.4 三组药物性肝损伤患者治疗前后AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较

治疗3 d 后各组AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗3 d 后，轻度肝损伤组、中度肝损伤组、重度肝损伤组的血清IL-6、TNF-α 水平低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗3 d 后，各组间的AST、ALT、IL-6、TNF-α水平比较，轻度肝损伤组＜中度肝损伤组＜重度肝损伤组，各组间两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）（表3）。

表3 三组药物性肝损伤患者治疗前后AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较（±s）

表3 三组药物性肝损伤患者治疗前后AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较（±s）

与本组内治疗前比较，aP＜0.05；与轻度肝损伤组同期比较，bP＜0.05；与中度肝损伤组同期比较，cP＜0.05

组别 例数 AST（U/L）治疗前 治疗3 d 后ALT（U/L）治疗前 治疗3 d 后IL-6（pg/mL）治疗前 治疗3 d 后TNF-α（ng/mL）治疗前 治疗3 d 后轻度肝损伤组中度肝损伤组重度肝损伤组30 24 7 43.68±5.60 118.05±36.90b 167.96±28.58bc 34.68±4.30a 78.50±25.37ab 114.07±46.34abc 43.43±4.25 133.35±47.43b 216.79±31.14bc 33.58±4.33a 70.96±25.07ab 135.43±53.81abc 8.77±0.63 10.87±1.57b 14.93±2.24bc 6.93±0.60a 8.51±1.13ab 135.43±53.81abc 1.13±0.21 1.97±0.44b 3.46±0.51bc 0.89±0.26a 1.20±0.46ab 1.76±0.61abc

2.5 治疗有效者与治疗无效者治疗后的AST、ALT、IL-6、TNF-α 水平的比较

治疗2 周后，61 例药物性肝损伤患者中50 例治疗有效，11 例治疗无效。治疗2 周后，治疗有效者的IL-6、TNF-α、AST 水平低于治疗无效者，差异有统计学意义（P＜0.05），但两者治疗后的ALT 比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表4）。

表4 治疗有效者与治疗无效者治疗后AST、ALT、IL-6、TNF-α水平的比较（±s）

表4 治疗有效者与治疗无效者治疗后AST、ALT、IL-6、TNF-α水平的比较（±s）

与治疗无效者比较，aP＜0.05

组别 例数 AST（U/L）ALT（U/L）IL-6（pg/mL）TNF-α（ng/mL）治疗有效者治疗无效者50 11 51.38±30.38a 104.89±22.40 60.70±43.68 56.69±15.44 7.61±1.26a 9.10±1.48 1.05±0.48*1.38±0.39

3 讨论

肝脏为药物代谢转化的主要场所，故药物性肝损伤在临床中较为常见，常见于抗结核药物、抗肿瘤化疗药、中草药、抗生素等[9]。药物性肝损伤起病隐匿，大部分患者在停药后可以自行恢复，但有少数患者会进展到严重肝功能受损，甚至引起死亡[10]。然而在临床上，药物性肝损伤的诊断难度较大，有的患者发生了严重肝受损才可出现明显的生化指标改变，故肝功能检测缺乏早期诊断价值。

相关研究指出[11-12]，药物性肝损伤的发生与各种炎症因子大量释放，浸润介导肝内炎症反应，致使肝内中性粒细胞、单核巨噬细胞激活，进一步加剧炎症介质分泌，若病情得不到控制，有可能引起全身炎症反应综合征，诱发脏器功能衰竭。近年，越来越多的研究也发现[13-14]，炎症介质、细胞因子在药物性肝损伤进展中起着重要的作用。IL-6 是一种具有较高生物活性的多功能促炎症细胞因子，由机体内多种细胞反应合成可直接作用于多种细胞的，能够参与机体炎症反应、细胞免疫、造血调控等生理活动[15]。TNF-α 也是一种促炎性细胞因子，在介导肝受损中起着一定的作用，一方面有直接的细胞毒性作用，可导致肝细胞坏死，另一方面能够影响肝内微循环，致使肝脏局部坏死，而且此物质还可诱导IL-6 释放，且可与IL-6 相互作用产生级联放大反应，进一步加剧肝受损[16-17]。本研究结果显示，各组AST、ALT、IL-6、TNF-α 比较，正常对照组＜轻度肝损伤组＜中度肝损伤组＜重度肝损伤组，差异均有统计学意义（P＜0.05），且经Pearson相关性分析发现，治疗前药物性肝损伤患者的IL-6 水平与AST、ALT 呈正相关（P＜0.05），TNF-α 水平与AST、ALT 呈正相关（P＜0.05），与孟慧杰等[18]研究结果基本一致，表明了血清IL-6、TNF-α 水平能够诊断药物性肝损伤，且可客观反映药物性肝损伤患者的肝功能异常程度。

此外，本研究结果还显示，经治疗3 d 后，轻度肝损伤组、中度肝损伤组、重度肝损伤组的血清IL-6、TNF-α 水平低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；且治疗2 周后，治疗有效者治疗后的IL-6、TNF-α、AST 水平低于治疗无效者，差异均有统计学意义（P＜0.05）；但两者的ALT 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05），提示与肝功能指标检测比较，血清IL-6、TNF-α诊断早期药物性肝受损更为敏感，能够及早发现药物治疗过程中肝损害，便于临床早期干预，利于保护受损的肝细胞，促进肝功能恢复。

综上所述，血清IL-6、TNF-α 可作为药物性肝损伤病情严重程度及预后判断的预测指标，具有较高的临床价值。