磁微粒化学发光法在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用价值

朱俊民，李宁

(漯河市中心医院 检验科，河南 漯河 462000)

梅毒在临床较为常见，属于性传播疾病，主要由苍白密螺旋体感染引起，近年来感染率逐年升高，且致死率较高，因此需提前进行检测，预防梅毒传播[1]。血清学检测是诊断梅毒常用临床检测方法，但是每项检测方法的特异性、敏感度各不相同，而其对梅毒检测的诊断性又至关重要，因此需要选择更加合适的早期诊断方法[2]。目前临床较常用的方法主要包括酶联免疫法(ELISA) 和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)，但是ELISA 检测在样本量较多时，难以保证加样及反应时间的一致性；TPPA 为手工操作，繁琐耗时。磁微粒化学发光法(CLIA)属于新兴技术，其检测价值仍有待探讨[3]。本研究旨在研究磁微粒化学发光法在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料

9 860个血清标本选取于2017年1月至2019年4月漯河市中心医院需要手术、输注血制品、分娩及介入治疗等住院患者，其中男性4 988例，女性4 872例；年龄为8 ～81 岁，平均(52.34±11.41) 岁；科室来源：妇科1 687例、普外科1 954例、泌尿外科1 589例、产科1 011例、消化内科1 389例、其他2 230例。

1.2 方法

常规采集患者晨起空腹血，离心分离血清得到血清标本，分别对标本进行CLIA、ELISA、TPPA 检测，研究中所使用的仪器有全自动化学发光免疫分析仪( 郑州安图Autolumo A2000 型)、全自动酶免一体机( 中国烟台艾德康公司Elisa800 型) 及相应试剂盒( 郑州安图生物工程股份有限公司)。

CLIA 检测：采用双抗原夹心一步法免疫分析模式，测定发光值，依据临界值对抗体存在与否进行判断，S/CO ≥1.0 判定为阳性，S/CO ＜1.0 判定为阴性。

ELISA 检测：运用双抗原夹心ELISA 法进行检测，利用TMB 系统显色，使用酶标仪判断结果，S/CO ≥1.0判定为阳性，S/CO ＜1.0 判定为阴性。

TPPA 检测：检测中的抗原为梅毒螺旋体Nichols 株，将抗原包被在明胶粒子上，使其结合标本中特异性抗体，发生凝集反应，肉眼直接观察检测结果。

以上检测方法的结果均至少由两位工作年限两年以上的检验医师判读。

1.3 观察指标及评定标准

①比较三种检测方法的阳性率。②分析CLIA 对梅毒螺旋体特异抗体的检测价值。以TPPA 测定结果为金标准，分别分析CLIA 和ELISA 检测的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。灵敏度=a/(a+c)；特异度=d/(b+d)；阳性预测值=a/(a+b)；阴性预测值=d/(c+d)；准确度=(a+d)/(a+b+c+d)。其中a：真阳性例数，b：假阳性例数，c：假阴性例数，d：真阴性例数。

1.4 统计学分析

应用SPSS 24.0 系统处理所得数据，计数资料以百分比表示，用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 三组阳性率比较

三组阳性率经比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 三组阳性率比较(n，%)

2.2 CLlA、ELlSA 检测结果比较

CLIA 检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为：95.28%、99.94%、94.39%、99.95%、99.89%，ELISA 检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为：85.85%、99.85%、85.85%、99.85%、99.70%，ELISA检测结果均低于CLIA 检测(P＜0.05)。见表2。

表2 CLlA、ELlSA 检测结果比较(n，%)

3 讨 论

梅毒感染率、发病率逐渐升高，一旦感染不仅会影响患者身体健康，同时会为患者带来巨大的心理压力，均不利于后期治疗，因此降低人群感染风险，对已确诊患者进行早期诊断和治疗至关重要[4]。ELISA 法检测准确度较高，已广泛应用于临床，但是该检测方法对样本质量要求较高，CLIA 法作为一种新型检测技术，操作简单，结果可靠，逐渐获得临床认可[5]。

TPPA 法作为临床检测梅毒的金标准，检测结果的敏感性和准确性均较高，但对于梅毒最主要的传染源一期梅毒患者检测准确度较低，同时检测操作繁琐，耗费时间长，结果靠目测读取，易受人为影响，结果不够可靠[6]。ELISA 检测法操作简单，成本较低，已在临床广泛使用，但该方法对样本质量要求较高，易受检测环境影响，假阳性概率较高，不适用于大规模筛查[7]。CLIA 法所用试剂为双抗原夹心法，所用仪器为全自动分析仪，总体操作方法简单，检测所需时间较短，故可有效提高检测效率，更适合临床大批量检测，可作为筛查或辅助验证试验[8]。苏连香[9]研究表明，CLIA 检测梅毒血清样本的结果显示，敏感度为100.00%，阳性符合率为99.67%，敏感性、阳性符合率均高于其他检测方法。本研究结果显示，CLIA、ELISA、TPPA 检测阳性率无显著差异；与TPPA 检测结果比较，CLIA 检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为：91.82%、99.95%、95.28%、99.91%、99.86%，ELISA 检测灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为：90.10%、99.85%、85.85%、99.90%、99.75%，ELISA检测结果均低于CLIA 检测，与国内外报道相一致[10-11]，说明CLIA 法对阳性标本具有较强的检出能力。

综上所述，CLIA 法可有效检测梅毒螺旋体特异抗体，应用价值较高，另外可结合临床具体情况，选取ELISA、TPPA 检测法进行辅助检测。