关于气相色谱-外标法测定浓香型白酒中己酸乙酯含量的研究

云忠祥　谭亮　冀恬　李玉林　皮立

己酸乙酯是浓香型白酒的主体香，其含量影响着浓香型白酒的品质。GB/T10345-2022《白酒分析方法》建议采用内标法进行己酸乙酯含量的测定，而气相色谱外标法具有简单、快速、准确、稳定等优点，比较适合于大批量白酒中己酸乙酯的测定。为此，本研究利用气相色谱外标法测定浓香型白酒中己酸乙酯含量，并通过外标法和内标法对己酸乙酯作出分析比较，结果表明内标法与外标法无显著性差异，而且使用外标法检测己酸乙酯可以简化操作步骤，提升检测效率，符合现代检测技术的要求，值得推广，并建议在国家标准中增加外标法测定白酒中己酸乙酯的方法。

一、试剂与仪器

1.试剂。己酸乙酯（色谱纯，纯度≥99.9%；CSA号：123-66-0；批号：E808752-100mL），上海麦克林生化科技有限公司；乙酸正戊酯（色谱纯，纯度≥99.7%；CSA号：628-63-7；批号：R109075-100mL），上海麦克林生化科技有限公司；乙醇（色谱纯，纯度≥99.9%；CSA号：64-17-5；批号：20221013306），山东禹王新材料科技有限公司。

2.仪器。AgilentGC-7890B气相色谱，配有7683自动进样器、氢火焰离子化检测器FID，美国安捷伦公司；梅特勒-托利多MS205DU精密电子天平，瑞士MettlerToledo公司；QL-861涡旋振荡器，海门市其林贝尔仪器制造有限公司；高纯氮气（纯度≥99.999%）、高纯氢气（纯度≥99.999%）、GA-2000A低噪音空气泵，北京中兴汇利科技发展有限公司。

二、试验与方法

1.溶液配制。（1）己酸乙酯储备液25000mg/L，准确称取2.50g己酸乙酯至100mL容量瓶中，用乙醇溶液（50%）定容至刻度，混匀备用。（2）乙酸正戊酯储备液20000mg/L，准确称取2.00g乙酸正戊酯至100mL容量瓶中，用乙醇溶液（50%）定容至刻度，混匀备用。（3）分别吸取己酸乙酯0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.8mL、1.6mL、3.2mL于5个10mL容量瓶中，用乙醇溶液（50%）定容，充分混匀，配制成250mg/L、500mg/L、1000mg/L、2000mg/L、4000mg/L、8000mg/L的系列工作液，混匀备用。内标法己酸乙酯系列标准工作液需要在定容后加入0.1mL乙酸正戊酯内标溶液，混匀备用。

2.气相色谱条件。进样口温度：250℃；检测器温度：250℃；进样量：1μL；分流比：1：37；载气：氮气；柱流速：1mL/min；色谱柱程序升温：35℃（保持4min），以5℃/min升温至60℃（保持4min），以10℃/min升温至150℃（保持2min），再以15℃/min升温至210℃（保持6min）；色谱柱：LZP-930白酒分析专用柱（柱长60m×内径0.53mm×膜厚0.25mm）。

3.样品测定。吸取酒样于10mL容量瓶中，内标法需要在样品中加入0.1mL乙酸正戊酯内标溶液，混匀测定。外标法按上述色谱条件将标液测定，以保留时间定性己酸乙酯，以浓度为纵坐标、己酸乙酯的峰面积为横坐标作一曲线。内标法己酸乙酯系列标准工作液需要在定容后加入0.1mL乙酸正戊酯内标溶液，以浓度为纵坐标、己酸乙酯的峰面积与乙酸正戊酯的峰面积之比为横坐标作一曲线。白酒样品直接进行6次样品平行分析。

三、结果与分析

1.己酸乙酯的色谱分析图。外标法和内标法测定白酒中己酸乙酯的色谱图详见图1。在采用内标法和外标法时，己酸乙酯的保留时间均为16.401min，乙酸正戊酯的出峰时间为13.656min，其特征峰明显，两者互不干扰，分离度好。

根据检测结果做线性回归分析，并得出标准曲线方程，以信噪比为3（S/N=3）计算检出限，线性范围、相关系数及检出限详见表1。结果表明，己酸乙酯标准曲线具有很好的线性关系，其检出限远低于该目标物在所检测白酒中的含量，能够满足浓香型白酒中己酸乙酯的检测要求。

2.内标法分析结果。选取六种不同浓度的浓香型白酒，每个样品平行取6次平行样进行测定，内标法分析结果详见表2。

3.外标法分析结果。选取6种不同浓度的浓香型白酒，每个样品平行取6次平行样进行测定，外标法分析结果详见表3。从两种测定方法对6种不同浓度的白酒的检测结果来看，其相对标准偏差（RSD）范围均小于1%，符合日常检测要求，说明两种检测方法的准确度差别不大。

4.精密度和回收率试验。方法的精密度以测定待测组分含量的相对标准偏差（RSD）来评价。将6种浓香型白酒进行6次样品平行分析，计算相对标准偏差（RSD），结果表明，己酸乙酯相对标准偏差（RSD）在0.3%-0.78%，说明外标法具有良好的精密度。

方法的准确度是通过待测组分在不同浓度下的回收率来评价。选取白酒样品2#和5#，以白酒平行6次样品分析的结果平均值作为本底值，添加与样品含量相当的水平浓度，对加标样品进行平行6次测定，分析结果详见表4。由表4可知，回收率为98%-103%，符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的要求，说明本方法的测定结果准确可靠。

5.内标法与外标法的结果比较。选取不同浓香型白酒样品，分别按外标法与内标法进行比对实验，结果见表5。根据表6的数据进行两种方法成对数值之间的t分布检验，看其在95%的置信度水平中是否存在显著性差异。

两方法绝对差值的平均值dˉ=（0.0035+ 0.002+0.001+0.001+（-0.001）+0.002+（-0.002））/6=0.00075；0.0015；t==1.23。查t分布表可知：当自由度n=6、置信度为0.95时，t（6，0.95）=1.94，实际t值小于t（6，0.95），故两种方法之间无显著性的差异。因此，采用外标法测定浓香型白酒中的己酸乙酯也能取得很好的分析结果。

基金项目：青海省应用基础研究项目“青海牦牛肉风味组学及其相关基因挖掘”（2020-ZJ-753）。

作者简介：云忠祥（1990-），男，回族，青海大通人，助理工程師，硕士研究生，研究方向为检验检测技术。

通信作者：皮立（1972-），男，汉族，江西樟树人，副研究员，博士，研究方向为食品分析技术。