几种外用抗生素对痤疮丙酸杆菌抑菌作用的比较研究

◆重庆市育才中学校 刘桀睿

痤疮丙酸杆菌（C.acnes）作为诱发痤疮的重要因素之一，除了其本身会引发炎症外，也可能将葡萄球菌等其他细菌带入皮肤，造成更复杂的感染。进入青春期，很多同学因为痤疮而苦恼，但并不清楚选择何种药物进行治疗。

外用抗生素是治疗痤疮的药物之一，哪种外用抗生素的抑菌效果最优？我对此进行了探究，以期为同学们治疗轻中度痤疮提供参考。

一、实验准备

（一）菌种选取

北京保藏生物科技有限公司保存的痤疮丙酸杆菌ATCC11827。

（二）培养基选取

采用FT 液体培养基和CBA 固体培养基进行C.acnes 的活化及扩培，取代强化梭菌培养基。

（三）药物选取

选择夫西地酸钠、克林霉素、盐酸金霉素进行抑菌实验。

图1 作者与指导老师汪海（左）讨论

二、实验过程

我选择通过高温灭菌这一方式进行氧气的去除和仪器的灭菌。在溶液配置方面，由于仪器不够精确，采用“做减法”的方式进行实验。创造性地使用厌氧袋加恒温摇床的方式进行培养，并关闭恒温摇床的振荡功能。

（一）菌种活化及传代培养

1.将冻干粉离心至底部圆球位置，然后用70%的酒精脱脂棉球将冻干管擦干净，并将冻干管的尖端放在火焰上加热。

2.迅速滴几滴蒸馏水至已加热的冻干管的尖端处，尖端破裂后用镊子轻轻敲掉冻干管尖端。

3.逐渐敲开冻干管，直至适当位置注入2 mL 无菌水溶解（剩余菌液冷冻备用)。

4.用移液枪吸取0.5 mL 菌液，快速地注射到3 个装7 mL FT 培养基的试管底层，塞上试管塞，并用牛皮纸包裹，在37 ℃环境下密封培养48 h。

5.用移液枪吸取剩余的0.5 mL 菌液，在平板上涂布均匀，放入厌氧袋、产气包和指示剂，在37 ℃环境下密封培养48 h 备用。

6.48h 后，用移液枪吸取试管底层菌液1 mL（取长势最好的），注射到2 个装25 mL FT 培养基的锥形瓶底层、2 个7 mL FT 培养基的试管，用橡胶塞塞紧，在37 ℃环境下密封传代培养48 h。

（二）抑菌作用比较

1.配置药物溶液

用电子天平分别称量夫西地酸钠、克林霉素、盐酸金霉素，用灭菌水配置质量分数为20 mg/L、200 mg/L 的药物溶液备用，如表1。

表1 药物溶液及其对应的涂布平板编号

2.抑菌实验比较

（1）传代培养完成后，用移液枪吸取1 mL 长势较好的菌液加入平板中，用涂布器均匀涂布到1 号至13 号平板中。14 号平板不加菌液，作为阴性空白对照。

（2）用移液枪吸取配置好的药物100 uL 后，在已涂布好的培养基上打孔，之后用无菌针头将枪头从培养基中挑出。各孔中心相距25 mm 以上，与培养基边缘相距15 mm 以上，在每个平板上打3 个孔。每种药物浓度做2 次平行重复。

（3）接种完成后将所有平板分装至厌氧培养袋中，迅速加入打开包装的产气袋和开口的氧气指示剂密封，放入37 ℃环境下正置培养。

（4）48 h 后取出平板，测定各个平板中的抑菌圈的直径。

3.实验结果

（1）1—12 号涂布平板的抑菌圈直径见表2、表3、表4（其中“＜7”表示无明显抑菌作用，“无”表示没有抑菌圈）。

表2 不同质量分数的盐酸金霉素的抑菌圈直径

表3 不同质量分数的夫西地酸钠的抑菌圈直径

表4 不同质量分数的克林霉素的抑菌圈直径

（2）13 号平板为阳性空白对照，14 号为阴性空白对照，如图2。1—12 号平板的抑菌圈如图3。

图2 13 号阳性空白对照与14 号阴性空白对照

图3 1—12 号平板的抑菌圈

三、实验分析

（一）结果分析

克林霉素在高浓度环境中表现出较强的抗菌效果，达到了高敏，抑菌圈平均直径约为31.14 mm，是同等条件下夫西地酸钠抑菌圈直径的两倍以上。在低浓度环境中，两者的抑菌圈直径差别不明显。

在低浓度环境中，盐酸金霉素的抑菌圈直径不明显，而在高浓度环境中的抑菌圈直径大于夫西地酸钠的，但数值不稳定，出现了较多未产生抑菌圈的情况。

综上所得，在低浓度环境中，抑菌作用从大到小依次为克林霉素（中敏）、夫西地酸钠（中敏）、盐酸金霉素（钝敏）；在高浓度环境中，抑菌作用从大到小依次为克林霉素（高敏）、盐酸金霉素（中敏）、夫西地酸钠（中敏）。

（二）误差分析

盐酸金霉素和夫西地酸钠的抑菌圈在48 h 后继续放置了一段时间，可能导致抑菌圈内出现些许菌落生长。取放平板过程中的摇晃导致药液流动，因此在培养基上出现了少许未生长菌落的不规则抑菌斑纹。

四、实验结论

由C.acnes 侵入皮脂腺引起的痤疮，通常以局部外用抗生素的方案进行治疗。我通过比较盐酸金霉素、克林霉素、夫西地酸钠对痤疮丙酸杆菌ATCC11827 的抑菌作用效果，发现对于由C.acnes 感染引起的轻中度痤疮，药物选择优先级依次为克林霉素、夫西地酸钠、盐酸金霉素。建议局部外用克林霉素类和夫西地酸类药物对寻常性痤疮进行治疗。

专家点评

文章比较了不同抗生素在低浓度和高浓度下的抑菌效果，提供了科学依据和实验证据。这种实验设计有助于评估抗生素的敏感性和抑菌效果，对研究抗菌治疗的有效性具有科学性。文章还提供了对C.acnes 感染引起的痤疮的治疗方案建议，通过比较不同抗生素的抑菌效果，得出局部应用克林霉素、夫西地酸钠对轻中度痤疮的治疗效果较好的结论，这为临床实践提供了实用的指导。

值得引起重视的是，文章未提及是否进行了重复实验。为了提高实验的可靠性，需更加严格地控制实验条件，并充分进行误差分析和排除。