HIF-1α和VEGF在佐剂性关节炎大鼠膝关节滑膜的表达

徐育冬 宋新梅 靳洪涛 张绍君 (河北医科大学第二医院风湿免疫科,石家庄 050000)

血管新生在胚胎发生和创伤愈合中是一个基本生理过程,但在类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)、肿瘤、糖尿病视网膜病变和银屑病等病理过程中也具有重要作用[1]。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在促进滑膜局部血管新生中具有重要作用,血管增殖确保了滑膜血管翳的发生和成长,是RA发生和发展的中心环节,并且促进了软骨和骨的破坏及关节重塑,最终造成关节畸形和强直,功能丧失。关节炎动物实验表明,在RA的过程中阻断血管生成是一种有效的治疗方法[2]。本实验旨在观察佐剂性关节炎大鼠(AA)膝关节滑膜VEGF、HIF-1α的表达。为RA滑膜血管翳形成寻找实验证据及临床抑制RA滑膜血管翳生成提供理论依据及有效切入点。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂 Wistar大鼠30只,雄性,体重140～160克,由河北省实验动物中心提供,合格证号802120,许可证号SCXK(冀)2003-1-003。

完全弗氏佐剂(FCA,10 ml)购于Sigma公司;VEGF、HIF-1α免疫组化成套试剂盒购自深圳晶美生物制品公司;卡介苗(BCG,50 mg/支)购自华瑞创新生物科技开发中心。

1.2 分组及AA大鼠模型的建立 将30只雄性Wistar大鼠随机分为2组,设正常对照组10只,造模组20只。将FCA与卡介苗配置为(含BCG 10 mg/ml)的水包油乳剂。试验第一天造模组20只大鼠的尾根部皮内注射该乳剂0.2 ml致炎,正常对照组大鼠的尾根部皮内注射等量生理盐水。

1.3 病理学及免疫组织化学检测 于致炎后第28天,处死所有大鼠并取膝关节滑膜组织,置于4%多聚甲醛固定液中固定,以备作病理及免疫组织化学检测。……