浅谈肉用绵羊颗粒冷冻精液制作

采复拉◦大木拉,买买提明◦巴拉提,郑文新,沙热木,陶卫东,吕雪峰,胡 波,马合木提,艾合买提◦卡斯木

(1.新疆维吾尔自治区种羊与羊毛羊绒质量安全监督检验中心,乌鲁木齐830000;2.新疆农业大学动物科学学院;3.新疆乌鲁木齐绒山羊研究所;4.新疆新和县畜牧兽医局)

肉用绵羊冷冻精液技术的应用研究对提高优质种公羊利用率和充分发挥优良个体在绵羊改良工作中起到重要的作用。目前,绵羊颗粒冷冻精液仍没有广泛地推广应用。新疆是一个养羊大省,养羊业已成为农民增收的支柱产业,但目前羊的品种改良工作还跟不上发展需要。主要原因是优良品种的种羊价格高,农民买不起。利用优良品种的冷冻精液改良土种羊是最好的途径,可获得显著经济效益,越来越受到广大畜牧工作者的重视和养羊专业户的欢迎。因此,2009年11月底我们在新和县开展了肉用羊颗粒冷冻精液生产。

1 种公羊的质量要求

1.1 种公羊选择 近年来,新和县畜牧兽医局引进纯种萨福克种公羊276只(每个养殖户发放1只)。用于制作冷冻精液的种公羊,是从276只种公羊里筛选出体型外貌和生产性能符合品种要求的特级、一级种公羊30只。对每只种公羊进行检疫,确认无传染病、体质健壮。

1.2 种公羊管理要求 保持中上等膘情、健壮、活泼、精力充沛、性欲旺盛,过肥过瘦都不利采精。公羊必须单独组群、饲喂,羊群不宜过大。每日应有足够的运动,夏季每日4～6 h,冬季每日2～4 h。

1.3 饲料配方 对种公羊提前45 d加强饲养管理。配方:玉米500 g,黄豆150 g,大麦150 g,麸皮150 g,黄萝卜500 g,苜蓿粉 1 500 g,添加剂(预混料)2 g,鱼粉5 g,鸡蛋2枚。

1.4 饲喂方式 精料分早中晚3次喂,草料分2～3次喂,食盐自由甜食,饮水分3～4次。

2 精液的稀释

2.1 冷冻稀释液

基础液:按照确定的稀释液配方,要求药品纯净、称量标准、瓶装密封、消毒后保存。

Ⅰ液:基础液加入一定量的卵黄和抗菌素配制而成,用作精液第一次稀释。

Ⅱ液:Ⅰ液中加入甘油等抗冻剂配制而成,用作精液第2次稀释。

在新和县制作颗粒冷冻精液时,用的基础液是葡萄糖3 g、柠檬酸钠3 g、重蒸馏水100 mL。

Ⅰ液:取基础液80 mL,加入20 mL卵黄。Ⅱ液:取I液44 mL加入甘油6 mL。

2.2 精液稀释方法

2.2.1 精液采集后尽快在5 min内用I液作第一次稀释,要把稀释液加温到28～32℃,稀释比例应根据精液的品质作1～3倍稀释。稀释液与精液温度应一致,相差不能超过1℃。

2.2.2 稀释后的精液经20～30 min缓慢降温至3～4℃,平衡2～3 h,再加入等温Ⅱ液,加入量为第1次稀释比例的一半。

3 精液平衡

把第一次稀释过的精液导入玻璃瓶中,并包上8层纱布,放到 3～4℃冰箱里,平衡2～3 h,在此期间内温度不得有变化。

4 精液冷冻

4.1 在3 L广口液氮罐(或保温桶)内注入液氮至罐颈下沿处,将聚四氟乙烯塑料板浸入液氮中,3 min左右,待塑料板热量全部散尽,把塑料板取出。放至把广口液氮罐盖上的两层纱布上面。

4.2 将塑料板提上至液氮罐口、平置2 min,待塑料板温度升至-90～-120℃时,用玻璃滴管吸取经平衡后的精液,按每颗粒0.1 mL的剂量,连续滴冻塑料板上,每次滴冻不得超过100粒,在滴冻过程中注意使冻精液始终保持在3～4℃,温度不得回升。

4.3 在冷冻灌上加盖降温,经过3 min左右,充分冻结的精液颗粒色泽光亮时,将塑料板浸入液氮中取下冷冻精液颗粒,经显微镜检查精子活率达0.3以上时再行分装,并加标签,即可移入贮存罐中保存。

5 解冻

5.1 解冻液 2.9%柠檬酸三钠或人用维生素B12注射液。

5.2 解冻方法 两种方法,第一种是半干解冻,取解冻液3滴(0.3 mL)于小试管中把小试管冲3次,取一粒冷冻精液颗粒迅速投入小试管内,在38～42℃热水中浸泡待溶解至小绿豆大时取出小试管,在外界环境下待全部精液溶解后,取一滴精液于载波片上作精子活率显微镜检查。另一种解冻方法是干解冻,取一粒冷冻精液颗粒迅速投入小试管内,在70～80℃热水中解冻。

6 冷冻精液入库保存管理

6.1 质量检测 每批制作的冷冻颗粒精液,均须经抽样检测。要求每颗粒容量为0.1 mL,精子活率0.3以上,每颗粒有效精子数为1 000万个。

6.2 分装 颗粒精液按30～50粒分装于1个纱布袋或一个小玻璃瓶中。

6.3 标记 每袋颗粒精液须标明品种、公羊号、生产日期、精子活率、颗粒数量,再按照公羊号将颗粒精液袋装入液氮罐提筒内,浸入并固定在液氮罐内贮存。

6.4 分发、取用 分发、转移、取用冷冻精液应在液氮罐内的液氮中进行。冷冻精液每次脱离液氮时间不得超过5 s。

6.5 贮存 贮存冷冻精液的液氮罐应放置在干燥、凉爽、通风和安全的库房内。由专人负责,每周检查一次罐内的液氮容量。当剩余液氮为液氮容量的2/3时,须及时补充。要经常检查液氮罐的状况,如果发现外壳有小水珠、挂霜或者发现液氮消耗过快时,说明液氮罐的保温性能差,应及时更换。

6.6 记载

每次入库或分发,耗损报废的冷冻精液数量及补充液氮的数量等,必须如实记载清楚,并做到每月结算1次。

[1]张壮志,张晋,李刚.小尾寒羊细管冷冻精液试验[J].黑龙江动物繁殖,2009(4):5-6.

[2]赵有璋.羊生产学[M].北京:中国农业出版社,2002,149-152.

[3]渊锡藩,张一玲.布尔山羊颗粒冷冻精液制作规程[J].畜牧兽医杂志,2000(6):40-41.