环丙沙星氯化钠注射液细菌内毒素检查法的研究

帖青松

（江苏省建湖县人民医院，江苏建湖 224700）

环丙沙星氯化钠注射液细菌内毒素检查法的研究

帖青松

（江苏省建湖县人民医院，江苏建湖 224700）

目的：探讨环丙沙星氯化钠注射液应用于细菌内毒素检查法的可行性。方法：制定实验，不同灵敏度的鲎试剂对环丙沙星氯化钠注射液进行干扰试验，将细菌内毒素检查法和热原检查法结果进行比较。结果：环丙沙星氯化钠注射液液稀释2倍后,对细菌内毒素检查无干扰作用，细菌内毒素检查法和热原检查法经比较完全相符。结论：通过系列实验，说明环丙沙星氯化钠注射液细菌内毒素检查法可替代热原检查法。

环丙沙星氯化钠注射液；细菌内毒素检查法

在制药工业中，为进一步扩大细菌内毒素检查法应用范围，笔者探讨了环丙沙星氯化钠注射液应用细菌内毒素检查法的可能性。

1 材料与方法

1.1 实验材料

细菌内毒素工作标准品（规格60 Eu/支，批号061101），中国药品生物制品检定所，鲎试剂（灵敏度0.25 Eu/ml，0.1 ml/支，批号 051009），鲎试剂（灵敏度 0.125 Eu/ml，0.1 ml/支，批号060303），细菌内毒素检查用水（BET 用水）（规格 10 ml，批号060202）均为厦门鲎试剂厂产品。环丙沙星氯化钠注射液（按环 丙 沙 星 计 100 ml∶0.2 g， 批 号 060702、060713、060908、060921、061125、061130、061208、061216、070124、070228） 均为长江药业生产。电热恒温水浴锅，型号H.H.S（上海医疗器械三厂），旋涡混合器,型号XW-80（上海医科大学仪器厂），电热恒干燥箱，型号HX.GZ-550B（连云港医疗器械设备厂），试管架，注射器，试管等。实验前玻璃器皿均经250干烤90min。

1.2 实验方法

1.2.1 细菌内毒素限值 细菌内毒素限值（L）的确定根据公式L=K/M[1]。其中K为按规定的给药途经，人用每公斤体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/（kg·h）表示，M 为人用每公斤体重每小时接受环丙沙星氯化钠注射液的最大剂量，以 ml/（kg·h）表示。 注射剂 K=5 EU/（kg·h）。 参考本品临床的用法用量可知M=400 ml/60（kg·h）。因此L=K/M=5×60/400=0.75 EU/ml。其值为理论值，考虑到本品为大输液（100 ml/瓶）临床多为联合配伍用药且经过实验验证，将L值定为小于0.5 EU/ml有一定的安全系数。

1.2.2 最小不干扰稀释倍数的测定 取鲎试剂灵敏度0.125 EU/ml和细菌内毒素国家工作标准品用BET水稀释至0.25 EU/ml取样品（批号 060702）用0.125 EU/ml灵敏度的鲎试剂进行试验，原液、1∶2及1∶4稀释液均无干扰，即本品最小不干扰稀释倍数为1。

1.2.3 鲎试剂灵敏度 鲎试剂灵敏度的复核将细菌内毒素国家工作标准品用 BET用水稀释成2.00、1.00、0.50、0.25λ系列浓度，按细菌内毒素检查法[1]操作，结果见干扰试验。

1.2.4 干扰试验 取厦门鲎试剂厂的鲎试剂和细菌内毒素国家工作标准品，分别用BET水、2倍稀释液稀释细菌内毒素至 2.00、1.00、0.50 和 0.25λ 依法操作，样品 A（Es内毒素标准溶液）、样品B（Et060702稀释的内毒素标准溶液）、样品C（Et060908稀释的内毒素标准溶液）、样品D（Et060921稀释的内毒素标准溶液），按下面的公式计算[1]:Es或Et=antilg[（X1+X2+X3+X4）/4]，X1、 X2、 X3 、X4 为反应终点浓度的对数值 （lg）， 结果 Es=0.25 EU/ml，Es 在 0.125～0.500 EU/ml之间，表明该鲎试剂灵敏度符合规定。 Et（060702）=0.354 EU/ml，Et（060908）=0.297 EU/ml， Et （060921）=0.354 EU/ml 均在0.5～2.0 Es 之间，即 0.125～0.500 EU/ml之间，说明供试品在稀释倍数为2倍时，环丙沙星氯化钠注射液对细菌内毒素检查无干扰作用。

2 结果

环丙沙星氯化钠注射液液稀释2倍后，对细菌内毒素检查无干扰作用，细菌内毒素检查法和热原检查法经比较完全相符。样品原液、1∶2及1∶4稀释液均无干扰，临床可以有效控制质量和保证用药安全。

3 讨论

一种药品能否应用细菌内毒素检查法，首先通过干扰试验，排除该药品本身对细菌内毒素检查的干扰作用[2-3]。其次确定出既克服干扰因素，又符合该药品细菌内毒素限值的有效浓度范围。为确证供试品在某一浓度对内毒素和鲎试剂的凝胶反应不存在干扰，本试验分别对3个批号的供试品进行相同浓度的重复试验。结果在本试验条件下，样品原液、1∶2及1∶4稀释液均无干扰，表明本试验可以有效控制其质量和保证临床用药安全有效。干扰试验进一步证明样品在1∶2稀释液时，对细菌内毒素检查无干扰[4-6]。本试验对10批热原检查符合规定的环丙沙星氯化钠注射液进行细菌内毒素检查，细菌内毒素检查法和热原检查法检查相符率为100%，说明环丙沙星氯化钠注射液细菌内毒素检查法可替代热原检查法。由于细菌内毒素检查法具有快捷、简便、灵敏的特点，大大地节约了资源、时间，产生了良好的社会效益和经济效益。

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1674-4721（2010）10（a）-182-01

2010-07-05）