兔肝VX2移植瘤不同剂量高强度聚焦超声辐照后增殖细胞核抗原的表达及意义

欧霞，王雁，邹海蓉，邹建中，李崇雁

（重庆市生物医学工程学重点实验室 重庆市超声医学工程重点实验室，省部共建国家重点实验室培育基地，重庆 400016）

高强度聚焦超声（high-intensity focused ultrasound，HIFU）技术在肿瘤的治疗中发挥了重要作用［1］，其剂量和疗效是当前研究的热点。增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）存在于细胞核中，其表达的高低和程度与肿瘤细胞增殖活性密切相关，乃目前公认的一个细胞增殖相关基因［2］。本研究检测HIFU不同剂量辐照后肿瘤及与正常组织交界的PCNA表达情况，拟探讨细胞增殖活性与HIFU辐照剂量的关系及意义，为HIFU临床疗效提供参考。

1 材料与方法

1.1 兔肝VX2移植瘤模型的建立

健康纯种新西兰大白兔72只（重庆医科大学动物实验中心提供），体质量1.5～2.0 kg，月龄2～3月，雌雄不限；VX2鳞癌细胞株瘤块（日本Funbanski公司引进，重庆医科大学超声医学研究所提供）。采用包埋法，将1 mm×1 mm×1 mm大小的瘤块植于开腹后拟接种的兔肝右中叶，止血、关腹、缝合切口，即制成荷瘤兔。

1.2 实验方法

辐照前1 d荷瘤兔禁食，前12 h禁水、备皮，术前5 min全麻后俯卧固定于手术台，腹部完全浸入脱气水。采用JC200型聚焦超声肿瘤治疗系统（重庆海扶（HIFU）技术有限公司研发，治疗参数：治疗头频率为1.03 MHz，直径为158 mm，焦点处声强ISATA最高可达19894.38 W/cm2），治疗头定位肿瘤，以“线-面-体”的方式，由深至浅逐渐覆盖整个肿瘤组织，仅扫描一遍，速度为3 mm/s，两线间距4 mm，每层间距3 mm。以声功率表示该组剂量（各组实验参数相同，每只肿瘤模型每立方厘米的辐照时间相同且最短），肿瘤模型按剂量平分为9个组，每组8只。……