榆黄蘑提取物对保护肝脏作用的初步探讨

何 英,万德云,张玉兴

(1.吉林大学体育学院,吉林 长春 130026;2.吉林大学应用技术学院;3.长春中医学院)

榆黄蘑提取物对保护肝脏作用的初步探讨

何 英1,万德云2,张玉兴3

(1.吉林大学体育学院,吉林 长春 130026;2.吉林大学应用技术学院;3.长春中医学院)

目的探讨榆黄蘑提取物的保肝作用,为开发利用榆黄蘑提供实验基础。方法给动物灌胃给药,腹腔注射环磷酰胺制作小鼠肝损伤模型,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果榆黄蘑提取物沉淀部分大剂量(0.8 g/kg/d)和中剂量(0.4 g/kg/d)组对降低肝损伤小鼠血清中ALT和AST的含量有显著效果,上清液小剂量(0.4 g/kg/d)组对降低AST含量也有显著效果;沉淀部分中剂量和上清液小剂量组对MDA含量也有显著降低作用。结论榆黄蘑提取物沉淀部分和上清液均具有明显的保肝作用。

榆黄蘑;提取物;肝脏;保护

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1368)

榆黄蘑(Pleurotus citrinipileatus Sing),隶属于担子菌亚门(Basidiomycotina),层菌纲(Hymenomycetes),伞菌目(Agaricales),侧耳科(Pleurotaceae),侧耳属(Pleurotu),也叫金顶侧耳,在植物学上被称为金顶蘑,又称榆黄菇、玉皇蘑或黄蘑。野生的榆黄蘑子实体多发生于多雨的夏秋季节,腐生于多种倒木上,主要分布于东南亚、欧洲、美洲和中国等地[1]。

榆黄蘑子实体金黄色,色泽鲜艳,其营养丰富,味道鲜美,并且榆黄蘑富含多种有效成分,是一种具有药用功能的名贵珍稀食用菌。经常食用能补充赖氨酸不足,降低胆固醇,也可治疗肾虚阳萎和痢疾等病患[2]。其所含的多糖作为一种宿主免疫增强剂,具有抗肿瘤 、抗病毒、抗自由基 、调节机体免疫功能的作用。本次实验利用环磷酰胺致肝损伤动物模型初步探讨榆黄蘑保肝作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 小白鼠,由吉林大学医学部实验动物科提供,体重22-25 g,雌雄各半。

1.2 药品及主要试剂 榆黄蘑,市售长白山区采集的野生榆黄蘑子实体,精缩干燥品,注射用环磷酰胺由江苏恒瑞医药股份有限公司生产,ALT、AST试剂盒购置北京北化康泰临床试剂有限公司。

1.3 实验仪器 普瑞系列可调移液器;22PC可见分光光度计;BS224电子天平。

1.4 实验样品的制备 将干燥的榆黄蘑子实体粉碎机粉碎,按料水比1∶15加入蒸馏水,100℃恒温水浴提取1 h,重复2次,过滤、合并提取液,浓缩至约500 ml,加乙醇至80%,沉淀12 h以上。倒出乙醇溶液,沉淀再加水溶解,过滤,浓缩至约200 ml,再加乙醇至80%,沉淀12 h以上。合并80%乙醇溶液,沉淀部分浓缩成膏状备用。

1.5 动物实验及指标测定 取昆明种小鼠80只,随机分成空白对照组、模型组、沉淀部分大、中 、小剂量组、上清液(80%乙醇提取物)大、中、小剂量组。沉淀部分大、中、小剂量组分别灌胃0.8 g/kg/d、0.4 g/kg/d和0.2 g/kg/d提取的榆黄蘑沉淀部分水溶液0.2 ml/10 g体重;上清液大、中、小剂量组分别灌胃1.86 g/kg/d、0.8 g/kg/d和0.4 g/kg/d榆黄蘑的80%乙醇提取物0.2 ml/10 g体重,空白对照组和模型组分别给予同体积纯净水。早晚各一次,连续12 d,期间第3 d和第10 d腹腔注射环磷酰胺85 mg/kg,空白对照组腹腔注射氯化钠注射液0.2 ml/10 g体重。第13 d将小鼠摘除眼球取血,3 000 r/min离心15 min,取血清,按试剂盒操作方法,测定血清中ALT和AST活性,采用硫代巴比妥酸法测血清中MDA含量[4]。

2 结果

2.1 榆黄蘑提取物对小鼠血清中ALT活性的影响

实验结果如表1所示,腹腔注射环磷酰胺后,模型组与对照组比较ALT明显升高,有显著性差异(P＜0.05),说明造模成功。沉淀部分大、中剂量组ALT活性与模型组比较明显降低,有显著性差异(P＜0.05)。其它组与模型组比较无统计学差异。

2.2 榆黄蘑提取物对小鼠血清中AST活性的影响

实验结果如表1所示,腹腔注射环磷酰胺后,模型组与对照组比较AST明显升高,有非常显著性差异(P＜0.01)说明造模成功。沉淀部分大、中剂量组和上清液小剂量组与模型组比较明显降低,有显著性差异。其它组与模型组比较无统计学差异。

2.3 榆黄蘑提取物对小鼠血清中MDA含量的影响

实验结果如表1所示,腹腔注射环磷酰胺后,模型组与对照组比较MDA明显升高,有显著性差异(P＜0.05)。沉淀部分中剂量组和上清液小剂量组与模型组比较明显降低,有显著性差异(P＜0.05)。其它组与模型组比较无统计学差异。

表1 榆黄蘑提取物对小鼠ALT、AST、MDA活性的影响

3 讨论

环磷酰胺(CY)致肝毒性的机理为:CY进入体内经肝脏P450氧化裂环,生成有活性的中间代谢产物,与DNA等生物大分子发生共价结合,因此肝脏是CY的代谢活化器官也是毒作用靶器官。动物实验证明CY致小鼠肝细胞脂质过氧化增强,肝组织中丙二醛(MDA)含量升高,谷胱甘肽耗竭,微粒体细胞色素P450下降。本实验表明,给小鼠腹腔注射CY 85 mg/kg可致小鼠血MDA含量升高,说明动物模型成立。给予榆黄蘑提取物沉淀部分中剂量组和上清液小剂量组与模型组比较明显降低,说明榆黄蘑沉淀物和上清液对CY致肝损伤小鼠有一定的拮抗作用。

临床也观察到CY可引起部分患者肝功能损害,血清转氨酶升高,并出现血清ALT或AST活性升高[5]。ALT主要存在于肝细胞浆内,当肝细胞损伤时,细胞内转氨酶能就入血中,引起血ALT升高。AST也存在于肝细胞内,并分布于线粒体中,当肝细胞损伤严重时,线粒体内AST释放入血,使血清中AST升高。本实验结果表明,给小鼠腹腔注射CY 85 mg/kg可致小鼠血清ALT、AST升高,榆黄蘑沉淀大剂量和中剂量组可以降低CY致肝损伤小鼠血清中ALT和AST的活性,上清液小剂量组对降低AST活性也有显著效果。说明榆黄蘑沉淀和上清液对CY致肝损伤小鼠有一定的拮抗作用。提示,榆黄蘑可作为临床减少CY毒副作用的补助药品或保健食品进行开发利用。

[1]图力古尔,李 玉.我国侧耳属真菌的种类资源及其生态地理分布[J].中国食用菌,2001,20(5):8.

[2]江苏新医学院 .中药大辞典[M].上海科学技术出版社,1986:24-38.

[3]陈 湘.黄蘑多糖提取及除蛋白方法的实验研究[J].平顶山工学院学报,2007,16(2):1671.

[4]杨 李,唐 瑛,左 娟,等.硫代巴比妥酸法测定血清脂质过氧化物方法的改进[J].华南国防医学杂志,2004,18(1).

[5]Ma B,Yeo W,Hui P,et al.Acute toxicity of adjuvant doxorubicin and cyclophosphami for early breast cancera retrospective review of Chinese patients and comparison with an iistoric Western series[J].Radiother Oncol,2002,62(2):185.

Discussion on extract of Pleurotus citrinopileatus in liver-protective effect

HE Ying1,WAN De-yun2,ZHANG Yu-xing3.(1.P.E.School of Jilin University,Changchun130026,China;2.Appilied Techonology Institute of Jilin University;3.Chinese Medicine Institute)

ObjectiveTo study the liver-protection effect of extracts of Pleurotus citrinopileatus,provide the experimental foundation for the development Pleurotus citrinopileatus.MethodsPleurotus citrinopileatuswas perfused stomache to the miceswith liver injury models induced by intraperitoneal injection of Cyclophosphamide.The activities of alanine transaminase(ALT),aspartate transaminase(AST)and the content malondialdehyde(MDA)in serum were determined.ResultsLarge dosage(0.8 g/kg/d)of the mushroom precipitation of Pleurotus citrinopileatus and middle dosage(0.4 g/kg/d)to reduce the cyclophosphamide group of liver injury in mice serum ALT and AST in a significant effect;Supernatant small dosage(0.4 g/kg/d)group in the lower AST also a significant effect;in the middle dosage of precipitation part and small dosage group of supernate in the MDA have obviously reduced role.ConclusionThe precipitation part and the supernate of Pleurotus citrinopileatus have protecting effects for liver.

Pleurotus citrinopileatus;extract;liver-protective effect;Cyclophosphamide;Cicer;Protect

R961

A

1007-4287(2010)09-1368-02

2009-06-30)