重症监护病房(ICU)两种产超广谱B-内酰胺酶细菌耐药性动态分析

余建申,卢建明,夏 海,习德娥,向常青

(三峡大学仁和医院1.检验科;2.重症监护病房,湖北宜昌 443001)

重症监护病房(ICU)两种产超广谱B-内酰胺酶细菌耐药性动态分析

余建申1,卢建明1,夏 海1,习德娥1,向常青2

(三峡大学仁和医院1.检验科;2.重症监护病房,湖北宜昌 443001)

目的对医院ICU(重症监护病房)两种常见产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率及耐药性进行动态观察,为指导临床合理使用抗生素提供依据。方法对我室2006至2009年从ICU标本分离的479株肺炎克雷伯菌和491株大肠埃希菌采用纸片协同试验和双纸片确证试验检测其ESBLs,并用纸片扩散法进行药敏试验。结果四年来大肠埃希菌产ESBLs阳性率从41.6%上升至58.4%;肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率从29.0%上升至35.3%。产ESBLs株对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,但对碳青霉烯类抗菌药物都敏感。结论4年来,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率逐年升高,对产ESBLs菌株的治疗应首选含酶抑制剂的抗生素、非B内酰胺类敏感的抗生素或碳青霉烯类抗菌药物。

超广谱B-内酰胺酶;耐药;大肠埃希氏菌;肺炎克雷伯菌

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1428)

本院自2006年以来,本室对来自ICU的标本培养后进行了病原学和药敏分析,特别是对于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行了检出率和耐药性的动态分析。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是引起院内感染常见的革兰阴性杆菌,其对抗菌药物的耐药性日趋严重。由于第3.4代头孢菌素的广泛应用,导致细菌对新一代B-内酰胺类抗菌药物产生耐药性[1]。为了解本院ICU病房产ESBLs菌株的发生率和耐药特性,制定有效对策控制其传播和流行,我们对整整4年来自ICU病房标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行了ESBLs检测及药敏分析。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 2006年1月至2009年12月,从本院ICU送检细菌培养标本中共分离出肺炎克雷伯菌479株(其中产超广谱B-内酰胺酶156株)和大肠埃希菌491株(其中172株产超广谱B-内酰胺酶),剔除同一病人相同部位的重复菌株。

1.1.2 质控菌株 ATCC25922大肠埃希菌,ATCC35218大肠埃希菌;ATCC700603肺炎克雷伯菌、ATCC25923金黄色葡萄球菌,ATCC27853铜绿假单孢菌,均购自杭州天和微生物试剂有限公司。

1.1.3 药敏纸片 头孢唑啉、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢曲松、头孢他定、庆大霉素、环丙沙星、氨曲南、阿米卡星均购自杭州天和微生物试剂有限公司;氨苄西林、美罗西林、头孢吡肟、复方新诺明、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、美罗培南 、头孢哌酮/舒巴坦、确证试验纸片头孢噻肟钠、头孢噻肟钠/棒酸、头孢他啶、头孢他啶/棒酸均购自英国OXOID公司;

1.1.4 试剂 API生化反应板购自法国梅里埃公司。

1.1.5 仪器 ATB半自动生化药敏鉴定仪。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定 采用ATB鉴定系统对分离细菌株进行鉴定。

1.2.2 药敏试验 采用双纸片扩散法,严格按照NCCLS 2005版标准进行。

1.2.3 产ESBLs检测试验 筛选试验 奥格门丁/克拉维酸与头孢他啶、头孢吡肟、头孢唑林、头孢哌酮、头孢曲松相邻,观察抑菌圈有无协同作用,有协同现象为阳性;确证试验 头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸;头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸。2组纸片中任意1组或2组加克拉维酸抑菌药的抑菌圈直径与不加克拉维酸抑菌药的抑菌圈直径之差大于等于5 mm时为阳性。

2 结果

2.1 2种菌株产ESBLs的逐年检出率 见表1。

表1 2种菌株ESBLs的逐年检出率

2006年1月至2009年12月,临床分离到491株大肠埃希菌和479株肺炎克雷伯菌,产ESBLs酶肺炎克雷伯菌的检出率按年份分别为29.0%、31.4%、32.0%、35.3%;产ESBLs酶大肠埃希菌的检出率按年份分别为41.6%、46.1%、46.9%、58.4%。2种细菌ESBLs的检出率明显呈逐年上升趋势。

2.2 两种细菌对18种抗生素的耐药分析 见表2。

表2 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌耐药率(%)

用纸片扩散法测定172株产超广谱B内酰胺酶大肠埃希菌和156株产超广谱B内酰胺酶肺炎克雷伯菌以及不产酶的219株大肠埃希菌和323株肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物耐药率,发现,大肠埃希氏菌对抗生素耐药率由高到低前3位依次为:氨苄西林(100%、89.6%)、美洛西林(90.6%、63.6%)、复方新诺明(83.7%、61.3%)、;肺炎克雷伯菌对抗生素的耐药率由高到低前3位依次为:氨苄西林(100%、84.3%)、复方新诺明(86.6%、41.9%)、美洛西林(77.1%、65.3%);可以看出两种细菌耐药率最高的前3位抗生素大致相同,从表2中也可以看出两种细菌对碳青霉烯类(亚胺培南、美罗培南)耐药率最低,对部分含酶抑制剂抗生素(头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦)的耐药率也较低。同时也可以看出,产酶株耐药率明显高于非产酶株,大肠埃希菌耐药率高于肺炎克雷伯菌的耐药率。

3 讨论

重症监护病房(ICU),是集中疑难重危病例进行监测和积极治疗的单位,也是医院易感人群和感染因素集中的场所,由于其特殊性,患者病情危重,抵抗力差,患者接受较多的治疗和监护措施,大量运用抗生素,产生耐药菌的机会明显增多[2].而细菌耐药性又是全球医疗领域中的重要问题[3-4]。ESBLs阳性菌株的产生是细菌长期在抗菌药物的作用下为适应环境而不断变异的结果。产ESBLs菌株的出现与住院患者的细胞免疫功能下降、器官移植、介入治疗、呼吸机应用等危险因素相关外,在很大程度上取决于临床广谱B-内酰胺类抗菌药物特别是第3代头孢菌素的作用。随着第3代头孢菌素的大量使用,临床ESBLs阳性菌株的检出率有明显上升的趋势,给临床治疗带来了极大困难。通过表1表明,近4年来我院ESBLs菌株阳性率逐年升高,大肠埃希菌中产ESBLs菌株从2006的41.6%上升到2009年的58.4%,肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株从2006年的29.0%上升到2009年的35.3%。

产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)主要由质粒介导,可通过接合、转化和传导等方式在细菌种属之间进行传递,它能赋予细菌对头孢类,青霉素类,单酰胺类,和氨曲南等抗菌药物的耐药,导致耐药现象的扩散[5]。通过表2表明,ESBLs阳性菌株对头孢菌素的耐药率明显高于ESBLs阴性菌株,ESBLs阳性菌株对氨基酸苷类、氟喹诺酮类、磺胺类等抗菌药物的耐药性也较为明显,说明ESBLs阳性菌株存在着广泛的多重耐药现象。ESBLs阳性菌株对碳青霉烯抗菌药物、部分含酶抑制剂(头孢哌酮/他唑巴坦,哌拉西林/他唑巴坦等)抗生素均较敏感,可作为ESBLs阳性菌株病例的首选药物。

ESBLs会使医院感染变得复杂化,正确使用抗菌药物有助于控制其播散与爆发流行[6]。因此及时对产ESBLs菌株进行动态监测,研究其耐药谱的变化,对指导临床用药有重要的意义。由于在目前医院抗菌药物的使用、管理、控制的相对不规范以及大量使用抗生素,是造成耐药菌株特别是产酶菌株出现的重要因素。特别是在重症监护病房(ICU),病人病情严重,病人免疫力较低下,治疗周期较长,抗生素运用相对过多,所以开展ESBLs感染的前瞻性监测,及时准确地提供给临床,提高医务人员对医院感染的认识,加强抗菌药物的合理使用及管理,对有效控制产ESBLs菌株及其他耐药菌株在医院的感染将起到至关重要的作用。

[1]林建平,潘品福,陶兴和.医院产超广谱B-内酰胺酶细菌耐药性动态观察[J].检验医学,2009,24(2):91.

[2]张 华.重症监护病房(ICU)院内感染的控制[J].中国实用医药,2010,5(6):207.

[3]JonesRN,Pfaller MA.Bacterial resistance;a worldwide problem[J].Diagn Microbiol Infect Dis,1998,31(2):379.

[4]World Heath Organization.WHO global strategy for containment of antimicrobial resistance[EB/OL].WHO/CDS/CSR/DRS/2001.2.

[5]刘水音,何小峰,吴 镝,等.产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检测及耐药分析[J].空军总医院学报,2009,25(2):71.

[6]彭少华,李从荣,施菁玲,等.产超广谱B内酰胺酶细菌的检测及耐药性观察[J].中华检验医学杂志,2001,24(6):350.

The dynamical analysis of two Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias in intensive care unit(ICU)

YU Jian-shen,LU Jian-ming,XIAHai,et al.(The Renhe hospital of The Three GorgesUniversity1Clinical laboratary2intensive care unitYI Chang city,Hubei province443001,China)

Objectiveanalyse the detection rate and drug resistance of two common Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias in intensive care unit(ICU)dynamically to provide an evidence for clinical doctors to choose antibiotics reasonably.MethodsBetween year 2006 and 2009,test Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing rate of 479 Klebsiella pneumoniae and 491Escherichia coli isolatedfrom the samples of patients in ICU by disk synergy test and double disk test confirmatory test,at the same time do the antibiotics sensetivity test with disk diffusionmethod.ResultsIn recent four years the positive rate of extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing Escherichia coil have increased to 58.4%from 41.6%,which of Klebsiella pneumoniae have increased to 35.3%to 29.0%.The drug resistance rate of extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias is higher obviously than that of the bacteriaswhich don't produce extended-spectrum beta-lactamases(ESBL).However,all these bacterias are sensetive to Carbapenem antibiotics.ConclusionThe positive rates of Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae have increased year by year in recent 4years.For the therapy of extendedspectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias,the antibiotics including beta-lactamases inhibitor,antibiotics unsensetive to beta-lactamases and Carbapenem antibiotics should be choosed firstly.

Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)drug resistance Escherichia coli Klebsiella pneumoniae

R915

A

1007-4287(2010)09-1428-03

余建申(1973-),男,主管技师,从事临床微生物检验13年。

2010-02-17)