雷公藤甲素的抗肿瘤活性研究

董志华

(江苏省连云港市第二人民医院药学部,江苏连云港,222006)

雷公藤甲素(TP)是从雷公藤植物中分离出的活性较高的环氧化二萜内酯化合物,是雷公藤的主要有效成分之一,具有很强的抗感染、免疫抑制、抗肿瘤等多种药理作用[1]。临床上常用于治疗关节炎、自身免疫性紊乱、肿瘤、器官移植、肾病、哮喘等疾病的治疗。为进一步研究雷公藤甲素的抗肿瘤活性,以期寻找一种新的具有抗肿瘤活性的天然药物成分,笔者选取3种肿瘤细胞,并建立荷瘤裸鼠模型,考察雷公藤甲素的体内外抗肿瘤活性,揭示其临床肿瘤治疗的可能应用前景。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药品及试剂:雷公藤甲素购于上海融禾医药科技发展有限公司;阿霉素购自北京华奉联博科技有限公司;MTT(噻唑蓝)购于美国Sigma公司;人乳腺癌细胞MCF-7、肝癌细胞 SMMC-7721、骨髓白血病细胞株(HL-60)均来源于美国ATCC细胞库;DMEM高糖培养基购于美国Invitrogen公司。

1.1.2 仪器:BIO-RAD680型伯乐全自动酶标仪(美国);光学显微镜(日本OLYMPUS公司)。

1.1.3 实验动物:裸鼠BALB/c-nu,雌性,体质量18～22 g,购自南京实验动物中心。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养:MCF-7、SMMC-7721、HL-60细胞均选择DMEM高糖培养基,含10%胎牛血清,37℃下5%CO2培养。

1.2.2 体外细胞毒性实验[2-4]:MTT法检测雷公藤甲素对MCF-7、SMMC-7721、HL-60细胞的体外细胞毒性,阳性对照药为阿霉素。将对数生长期的细胞接种于96孔板种,接种密度为5× 104/mL,待细胞处于对数生长期后分别加入不同浓度的雷公藤甲素(100.0,70.0,40.0,10.0,0.1 nmol/L),空白对照组只加培养液,对照组为阿霉 素(100.0,70.0,40.0,10.0,0.1 μ mol/L)。孵育48 h后每孔加入20 μ L MTT,4 h后吸去药物,每孔加入150 μ L的DMSO 溶解,并在酶标仪下于570 nm处检测细胞活性,按以下公式计算细胞生长抑制率,然后以细胞存活率对剂量对数线性回归计算IC50值。……