载脂蛋白J及补体C3在大鼠脑出血模型中表达的实验研究

郑晓梅,刘 亮,李小刚

(1.四川省泸州市人民医院神经内科 646000;2.泸州医学院附属医院神经外科 646000;3.泸州医学院附属医院神经内科,四川泸州 646000）

脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是神经系统多发病,严重威胁人类健康。补体激活所致的炎症反应和细胞凋亡在ICH继发性损伤中的作用日益受到重视[1]。载脂蛋白 J(apolipoprotein J,ApoJ)是一种多功能糖蛋白,参与补体调控、细胞凋亡及DNA修复等多种生理功能[1]。目前,国内外对ApoJ在ICH过程中所起作用的报道不多。有学者认为在阿尔茨海默病及脑梗死等疾病中,A poJ有神经元保护作用,ApoJ可清除阿尔茨海默病患者脑组织中沉积的β-淀粉样蛋白而延缓老年性痴呆[2]。既往研究表明,补体系统参与了ICH后的神经元死亡。ApoJ作为公认的补体调节因子,是否通过抑制ICH后的补体激活来阻止补体介导的神经元死亡,是本研究的切入点。本文通过探讨ApoJ在ICH过程中的作用机制,为临床治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器 RT-PCR试剂盒购自大连宝生物工程有限公司。WDT-V型鼠脑立体定向仪购自西安西北光电仪器厂。

1.2 动物分组与建模 Sprauge-Daw ley(SD)大鼠150只(鼠龄 3～4个月、体质量 250～350 g)购自泸州医学院动物中心,合格证号:川医动字2401115。将SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n=10)、假手术组(n=70)及 ICH组(n=70);假手术组与ICH组(出血量为50μL)分别按假手术术后时间及出血后时间分为 3、6、12 h以及1、3、5、7 d等7个亚组(n=10)。采用参考文献[3]的实验方法,通过脑立体定向仪将自体血注入尾状核,制作大鼠ICH模型。根据Bederson等[4]的评定方法将神经功能缺损程度分为4级,将手术后2 h大鼠神经功能缺损程度达1、2、3级判断为建模成功。……