肉豆蔻提取物对小鼠小胶质BV 2细胞环氧合酶2表达的影响*

崔春爱,毛 翘,金德山,张庆镐

(延边大学基础医学院,吉林延吉 133000）

神经退行性疾病是一系列以神经元凋亡为特征的神经疾病的总称,可导致学习和记忆力下降,如阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)、帕金森病(parkinson's disease)及亨廷顿病(huntington's disease,HD)等[1]。流行病学研究表明,长时间应用非甾体类消炎药可降低患AD的危险性,改善症状,但易导致胃肠道出血,长期服用时具有一定的危险性。肉豆蔻提取物是从肉豆蔻科高大乔木植物Myristica fragrans中提取的天然成分,常作食用佐料[2-3],并可抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠脑内小胶质细胞的激活及空间学习记忆的降低[4-6]。小胶质细胞作为中枢神经系统内的免疫细胞,既可通过吞噬脑组织中的病原体及有害颗粒对神经元起保护作用,又可在致炎因子的作用下激活成反应性小胶质细胞,分泌炎性细胞因子,对神经元起毒性作用[7-8],是治疗神经炎症及神经退行性疾病的一个重要靶点[9-10],本课题主要对小胶质细胞功能的调控进行研究,使其向保护神经元的方向发展。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 小鼠小胶质BV 2细胞购自韩国细胞株银行;DM EM细胞培养基及小牛血清为GIBCO公司产品;WST-8试剂盒为日本株式会社同仁化学研究所Dojindo产品;LPS、兔抗小鼠环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG及常规试剂均购自美国Sigma公司。

1.2 细胞培养 小鼠小胶质BV 2细胞以适量细胞密度接种于培养瓶中,加入含10%小牛血清、100 U/m L青霉素及100 μg/m L链霉素的DM EM 培养液,置于37℃、5%CO2恒温培养箱中常规培养、传代。

1.3 WST-8法检测 将对数生长期小鼠小胶质BV 2细胞密度调整至1×105个/m L,接种于96孔板。……