近红外荧光分子标记的ox-LDL靶向小鼠动脉粥样硬化模型的成像研究

王圆圆，姚玉宇，张毅，文颂，郭静，顾月清

(1.东南大学附属中大医院放射科，江苏 南京 210009;2.中国药科大学生命科学与技术学院，江苏南京 210009)

关于动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的形成机制，最被广泛接受的是“损伤后反应”学说[1]，即内皮细胞损伤引起血管炎症，继而形成泡沫细胞和发生增殖反应。对AS疾病，了解、探讨其发生发展过程及可能机制具有重大意义。本实验通过体外合成近红外荧光分子标记的ox-LDL分子，进行体外巨噬细胞吞噬实验，并采用高脂喂食动脉内皮损伤后的Apo E-/-小鼠，成功建立颈总动脉AS模型，并通过活体7 T MRI、近红外成像及病理组织学对照研究，观察近红外荧光分子探针对小鼠颈总动脉AS的评估价值。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞及试剂 小鼠RAW 264.7细胞株(上海中国科学院细胞库)，ox-LDL(2 mg·ml－1，广州奕源生物科技有限公司)，碳青花染料ICG-Der-02(中国药科大学生命科学与技术学院)，高糖DMEM培养液(Hyclone公司，美国)，胎牛血清(四季青公司)，EDTA-胰蛋白酶(Sigma公司，美国)，MTT(南京晚晴化学制剂公司)。

1.1.2 动物与饲料 实验动物:Apo E-/-鼠10只[8周龄，雄性，北京大学医学部实验动物科学部，许可证号:SCXK(京)2006-0008]，高脂饲料(Western Diet:21%脂肪，0.15%胆固醇，南京协同生物有限公司)。

1.1.3 仪器及药品 CO2培养箱(Herabus，德国)，倒置相差显微镜(Zeiss Axiovert25 CFL，德国)，紫外分光光度计(Bedkmen，美国)，净化工作台(吴江市生化净化设备厂)，7 T MRI设备(Bruker，PharmaScan，德国，孔径大小89 mm，射频线圈直径25 mm)，近红外成像仪(CRI Maestro系统)，异氟烷(山东科源制药有限公司)，戊巴比妥钠(南京晚晴化学制剂公司)。

1.2 方法

1.2.1 ox-LDL-ICG-Der-02探针合成 ICG-Der-02是一种吲哚菁绿的衍生物，首先在常温下将……