钙通道阻滞剂对大鼠坐骨神经嵌压性损伤早期c-fos表达及神经病理变化的影响

徐长中，吴 乐，唐金荣，苏建华，肖 杭

(1南京医科大学第一附属医院，南京210029;2灌南县人民医院;3南京医科大学神经毒理研究所)

c-fos是第三信使，可在神经细胞表达。以往认为，神经干损伤早期c-fos表达增加是参与冲动传导轴突对伤害性刺激的反应［1］;采用一定形式刺激神经干，检测c-fos表达部位及程度，可了解神经受损状态［2］。研究证实，刺激兴奋性氨基酸受体可增加Ca2+通道开放，增加Ca2+内流;不同性质的致病因子最终均可导致第二信使Ca2+内流，使神经细胞功能受损［3］。早期使用钙通道阻滞剂(CCB)可保护受损细胞的重要功能［4］，但其确切机制不明。2003～2005年，为探讨CCB对大鼠坐骨神经损害的保护机制，我们进行了相关研究。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物、药物及试剂 SD大鼠288只，雌雄各半，体质量180～220 g，由上海斯莱克实验动物公司提供。禁食12 h后，按体质量随机分为对照组(A组)、生理盐水组(B组)、氟桂利嗪低剂量组(C1组)与高剂量组(C2组)各72只。CCB为氟桂利嗪(西安杨森)，试剂为Trizol试剂(Invitrogen公司)、逆转录试剂盒(Promega公司)等。

1.2 实验方法

1.2.1 周围神经损伤模型制作 模型制作前30 min，C1组、C2组分别腹腔注射氟桂利嗪1、2 mg/kg，B组注射等量生理盐水。大鼠腹腔注射戊巴比妥麻醉后，于右后肢后侧切开，钝性分离肌肉组织，暴露坐骨神经。其中A组在坐骨神经暴露后关闭切口;其余三组用大鼠平均体质量1/2的压力夹住，持续30 s后松开，关闭切口。各组均注射抗生素预防感染。

1.2.2 背根神经节(DRG)、坐骨神经干分离 在实验0、5、15、30 min，1、2、4、24 h 及4 周时分别快速处死大鼠8只，取出胸腰段脊柱。……