马兜铃酸对肾小管上皮细胞氧化应激效应的作用

季文萱，黄俊彦*，孟冬梅，刘凤娟

(1青岛市中心医院，青岛266042;2青岛大学医学院附属医院，山东省代谢性疾病重点实验室，青岛266003)

马兜铃酸(AA)是马兜铃科马兜铃属植物所含的成分，含AA成分的中药曾在国内外用于治疗多种疾病，后因发现其有致突变、致肿瘤和肾毒性等而引起国内外学者广泛关注［1］。服用含AA中草药导致的肾损害［即马兜铃酸肾病(AAN)］是一种特殊的肾小管—间质损害，其主要表现为进行性肾间质纤维化;该病发展迅速，急性者数月或数年即可发展为终末期肾功能衰竭，国内发病率较高［2］，但其发病机制尚不完全清楚。研究表明，细胞凋亡与AAN发病关系密切;氧化应激可使机体处于易损状态，同时能增强致病因素的毒性作用，导致基因突变，它不仅与多种疾病的发生、发展有关，也与细胞凋亡有密切关系［3］。目前，对AAN发病机制中氧化应激作用的研究少见报道。2010～2011年，我们观察了AA对人肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激的效应。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 主要药品及试剂 AA(美国Sigma公司)，噻唑蓝试剂盒(Amresco公司)，Annexin-V试剂盒(Invitrogen公司)，丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒均购自南京建成生物研究所。HK-2细胞株购自中国典型培养物保藏中心。

1.2 检测方法

1.2.1 细胞培养及分组 将HK-2细胞培养于含10%胎牛血清及1%青霉素+链霉素的DMEM，在HamsF-12培养基中传代培养，培养条件为5%CO2、37℃、湿度100%，实验前24 h更换无血清培养液。实验分两组，对照组不加任何药物;AA组在培养液中加入AA终浓度20 μg/ml。两组血清浓度一致，培养48 h后终止实验，每一实验均重复3次。……