噬菌体展示技术*

冯 俊，李 丽，刘 海，刘世喜

(1.四川大学华西医院耳鼻咽喉-头颈外科，四川 成都 610041;2.川北医学院病理教研室;3.川北医学院附属医院耳鼻咽喉-头颈外科，四川 南充 637000)

1 噬菌体展示技术的研究历史

噬菌体展示技术是近年才发展起来并得到广泛应用的新技术，Smith［1］于1985年首次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ，使编码的目的基因的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面，从而创建了噬菌体展示技术，将丝状噬菌体fd基因组通过基因工程的手段进行改造，将EcoRⅠ内切酶的部分基因片段与PⅢ基因融合，获得的重组噬菌体可在体外稳定增生。1988年Pannley et等［2］，将已知抗原决定族与PⅢ的N端融合呈现在表面，可特异性地被抗体选择出来，并提出通过构建随机肽库可以了解抗体识别的抗原决定簇表位的设想。

2 噬菌体展示技术的基本原理

噬菌体展示技术是一种亲和选择和基因表达产物相结合的技术，以改造的噬菌体为载体，将外源多肽或蛋白与噬菌体的一种衣壳蛋白融合表达，融合蛋白将展示在病毒颗粒的表面，而编码这个融合子的DNA则位于该病毒粒子内，通过检测病毒内部的DNA来测定融合蛋白序列。噬菌体展示技术使大量随机多肽与其DNA编码序列之间建立了直接联系，使得各种靶分子的多肽配体通过一种被称为淘选的体外选择程序得以快速鉴定(如图1)。噬菌体结构蛋白PIlI和PⅧ均可作为载体来展示外源多肽或蛋白质。在成熟蛋白质编码区与信号肽之间……