iNOS在16例肺癌中的表达及其临床意义

张菁华

(菏泽医学专科学校,山东 菏泽 274000)

近年来,我国肺癌的发病率及病死率已跃居恶性肿瘤首位。在癌症的诊治及预后中,iNOS受到广泛关注。近期研究显示,iNOS因促进新生血管生成而有助于血管依赖的实体瘤的生长,其在肺癌中表达的研究也炙手可热。我们应用免疫组织化学法检测16例肺癌组织标本中iNOS的表达,探讨iNOS在肺癌中的表达意义及与肺癌临床病理特征的关系。

1 临床资料

1.1 一般资料

本组资料选取菏泽市立医院病理科2010年6月～2010年12月手术切除并经病理确诊的肺癌患者的石蜡标本16例,其中鳞癌8例,腺癌8例,所有病例均有完整的临床资料。患者术前均未行放疗、化疗及生物免疫治疗,手术中取肺癌组织及淋巴结、正常肺组织[所切除肺距离病灶最远处(＞3 cm)的正常组织]。

1.2 诊断标准

依据1997年国际抗癌联盟(UICC)修订的标准进行分类和TNM分期。

1.3 主要试剂

美国Santa Cruz公司制造生产的兔抗人iNOS多克隆抗体,美国Zymed公司生产制造的SP-streptavidin/per-oxidase kit,Sigma公司生产的考马斯亮蓝 G-250染料、BSA、二巯基乙醇,德国罗氏公司生产的PVDF膜以及Pierce公司生产的ECL显色液。

1.4 免疫组化染色

采用链霉菌抗生物素过氧化酶(Streptavidin-Peroxidase,S-P)免疫组化法,按S-P试剂盒操作说明进行操作。肿瘤组织切除后,立即取标本,放入-80℃低温冰箱中保存备用。将标本置于中性福尔马林中固定,石蜡包埋,4 μ m厚度连续切片后供常规HE染色及SP法免疫组织化学染色。具体步骤:石蜡切片常规脱蜡至水,PBS洗两次各5 min,3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶,室温静置10 min,PBS洗两次各5 min,高……