骨肿瘤患者血清细胞因子TNF-α和IL-6水平观察及临床意义

周 健 孙 昕

安徽医科大学第一附属医院骨科，安徽合肥 230022

随着肿瘤的研究进展，人们已初步认识到肿瘤的发生发展与细胞宿主免疫防御系统对肿瘤失去调控密切相关。本研究测定骨肿瘤患者及骨转移患者（有远处转移的晚期骨肿瘤患者）血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素（IL-6）含量，研究与骨肿瘤发生发展、恶化转移的关系，探讨其在骨肿瘤恶化转移中的作用，这对骨肿瘤的诊断、疗效评估预后判断及免疫治疗具有一定的临床意义。

1 对象与方法

1.1 检测对象

标本来源为经组织学或细胞学明确诊断的骨肿瘤患者45例（有远处转移的晚期骨肿瘤患者15例），年龄45～70岁，平均（60.1±10.2）岁。其中男27例，女18例。标本来源为健康体检人员及部分本院健康医护人员，正常对照组40例，年龄36～ 72岁，平均（53.5±8.7）岁。

1.2 标本处理

所有受试者均用一次性注射器取清晨空腹静脉血1～2 mL，置预先处理好的清洁干燥无任何添加物的试管中，常温下静置后（严禁溶血）送肿瘤实验室。为排除化疗干扰的可能性，化疗后血液在细胞毒药物给予后1个月抽取，方法同上。

1.3 样品处理

将样品管编号后，置高速离心机中，以3000 r/min离心10 min，用预先经洁净处理过的干燥吸管吸取上部清亮血清，置具塞塑料样品管中。闭塞-70℃低温冰箱中保存，待测。

1.4 细胞因子的检测

细胞因子生物学活性检测，是应用依赖于该细胸因子而增殖的细胞检测方法，细胞因子的免疫学检测方法通常用的是酶联免疫吸附反应（enzyme-Linked immunosorbent assay，ELISA）的方法。本实验检测骨肿瘤患者血清中的TNF-α和IL-6含量水平，采用的就是ELISA方法。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 3组患者血清TNF-α和IL-6测定结果比较

骨肿瘤患者TNF-α和IL-6均高于健康对照组，统计学检验TNF-α差异有高度统计学意义（P＜0.01），IL-6差异有统计学意义（P＜0.05）。骨转移组（远处转移者）TNF-α和IL-6均高于骨肿瘤组。统计学检验TNF-α差异有高度统计学意义（P＜0.01），而IL-6差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 TNF-α与IL-6的灵敏度和特异性

若以TNF-α正常值的3倍（45.45 pg/mL）、IL-6正常值的2倍（43.18）为诊断肿瘤截断点[1]，则TNF-α的灵敏度为40/45=88.89%，特异性36/40=90.0%（对照组4例假阳性）；而IL-6的灵敏度为35/45=77.78%，特异性35/40=87.50%（对照组5例假阳性）。

表1 骨转移（远处转移）与骨肿瘤组TNF-α和IL-6水平变化（± s，pg/mL）

表1 骨转移（远处转移）与骨肿瘤组TNF-α和IL-6水平变化（± s，pg/mL）

注：与健康组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与骨肿瘤组比较，⊕P＜ 0.05，⊕⊕P ＜ 0.01

组别 n TNF-α IL-6骨转移（远处转移） 15 96.71±33.12**⊕⊕ 57.43±19.74*⊕骨肿瘤组 45 69.04±35.59** 48.17±20.07*健康组 40 15.15±7.71 21.59±9.74

3 讨论

近年国内外学者应用肿瘤细胞株，新鲜肿瘤组织进行研究，发现人细胞系和新鲜肿瘤结节中的IL-4、IL-6、IL-10等细胞因子占优势[2]，血清中IL-6类细胞因子水平升高与进展期肿瘤患者的免疫抑制和恶液质相关[3]。本研究结果也证实了上述观点，骨肿瘤组IL-6水平高于健康对照组，统计学处理差异有统计学意义（P＜0.05）。血清中IL-6水平与骨肿瘤临床分期有关，分期越晚，肿瘤负荷越大，有远处转移的晚期骨肿瘤患者血清IL-6水平明显高于无转移的早期患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。同时研究报道也表明，有远处转移的晚期骨肿瘤患者，也能会产生较高水平的IL-6含量。

TNF-α可促进细胞的增殖和分化，对某些肿瘤细胞具有生长因子样作用，并协同EGF、PDGF和胰岛素的促增殖作用，促进EGF受体表达。TNF-α也可与细胞增殖密切相关的原癌基因的表达，引起细胞周期G0期向G1期转变[4]。王昌才等[5]报道正常人血清和尿液存在一定量TNF-α，而肿瘤、艾滋病毒感染、红斑狼疮患者血清 TNF-α水平明显升高。肿瘤患者血清TNF-α水平升高机制目前尚不清楚，可能与免疫反应有关。TNF-α升高往往提示肿瘤的发生。实验中发现有远处转移的晚期骨肿瘤患者血清TNF-α平均值均高于正常值近6倍，而骨肿瘤组也高于正常值近3.96倍。且随病变的加重水平亦愈高。故治疗前后血清TNF-α水平的检测可作为判断疗效的一个辅助性监测指标。

综上所述，本研究结果显示，IL-6、TNF-α与骨肿瘤的进展、预后有一定的相关性。应用ELISA方法测定血清中IL-6、TNF-α含量水平具有一定的临床实用价值。在结合临床资料的情况下，可作为临床骨肿瘤的辅助指标之一。

[1]叶世柏.化学性食物中毒与检验[M].北京：北京大学出版社，1989：8-9.

[2]Asselin PC,Echchalir H,Carayol G,et al.Quantiative analysis of Th1 Th2 and TGF-beta 1 cyctokine expression in tumor.TIL and PBL of non-small cell lung cancer patients[J].Int J Cancer,1998,77(1):7-12.

[3]Wkjciechowska-Lacka A,Matecka-Nowak M,Adamiak E,et al.Serum levels of interleukin-6 in patients with lung cancer[J].Neoplasma,1996,43(3):155-158.

[4]Burger RA,Grosen EA,Ioli GR,et al.Spontaneous release of interleukin-6 by primary cultures of lymphoid and tumor cell populations purified from human overrian carvinoma[J].J Interfer-on cytokine Research,1995,15(3):255-260.

[5]王昌才，郭明戢.肿瘤坏死因子受体的生理作用及在疾病检测中的意义[J].中外医学（临床生物化学与检验学分册），1997，18（3）：110-112.