白掌的组培与快繁技术

2011-09-12 02:09江金兰罗庆国李永清
浙江农业科学 2011年5期
关键词:叶柄外植体种苗

江金兰,叶 炜,罗庆国,李永清

(福建省三明市农业科学研究所,福建 沙县 360059)

白掌 (Spathiphyllum floribundum),又名白鹤芋、苞叶芋、一帆风顺、和平芋,属天南星科苞叶芋属多年生常绿草本观叶植物,由于白掌花叶兼美,轻盈多姿,生长旺盛,且又耐阴,故深受人们的青睐,常用于室内绿化美化装饰[1]。白掌不仅是优良的观叶植物,它还可以抑制人体呼出的废气如氨气和丙酮,同时它也可以过滤空气中的苯、三氯乙烯和甲醛,它的高蒸发速度可以防止鼻粘膜干燥,使患病的可能性大大降低[2]。白掌常用分株和播种繁殖,年繁殖系数低,远不能满足商品化生产的要求,因此大规模生产常采用组织培养法繁殖,增殖迅速,株丛整齐,是种苗生产的最佳途径。

1 材料与方法

材料从三明市农科所引进,试验于2008年在本单位生物中心实验室进行,选择生长健壮,无病虫害的白掌侧芽、叶片、叶柄为外植体。

从母株上剪取侧芽 (母株少浇水,土壤保持干燥),用清水将芽表面彻底冲洗干净,剪去外层的苞叶,先用75%的酒精浸30 s后,再用0.1%的升汞浸泡8 min(期间不停的振荡)后,用无菌水冲洗4~5次,备用。将侧芽的叶片、叶柄剪去,侧芽接种于侧芽诱导培养基 (1) -(4)诱导丛生芽,剪下的叶片、叶柄接种于叶片、叶柄诱导培养基 (5)-(8)诱导愈伤组织,叶柄切成1 cm左右,叶片切成1 cm×1 cm左右,叶片的背面用刀片划几刀。为了避免交叉污染,每瓶培养基接种一个外植体。每种培养基接种40个样本,定期观察侧芽、愈伤组织的萌发情况、不定芽的数量,生根的株数,以比较不同培养基的培养效果。

诱导培养基。侧芽诱导不定芽:(1)MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1;(2)MS+6-BA 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(3)1/2MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg· L-1;(4)MS+6-BA 1 mg·L-1+KT 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1。叶片、叶柄诱导愈伤组织:(5)1/2MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.2 mg · L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1;(6)MS+6-BA 5 mg· L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1;(7)MS+6-BA 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg · L-1+2,4-D 0.2 mg·L-1;(8)MS+2,4-D 2 mg·L-1。增殖培养基:(9)MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(10)MS。生根培养基:(11)1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1;(12)1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1。pH 为 5.8,培养温度为(25±1)℃,光照强度1 500~2 000 lx,光照为每天14 h,琼脂粉 5.5 g·L-1。

2 结果与分析

2.1 不定芽与愈伤组织的诱导

将侧芽的叶片、叶柄剪去,侧芽接种于侧芽诱导培养基 (1) -(4),剪下的叶片、叶柄接种于叶片、叶柄诱导培养基 (5) - (8),20 d后侧芽萌动,培养基 (1)中萌发的芽较壮,叶色浓绿,表明侧芽诱导不定芽时MS较1/2MS好,分裂素6-BA比KT诱导率更高,且以5 mg L-1为宜。叶片、叶柄40 d后边缘出现少量愈伤组织,60 d后愈伤组织萌发不定芽,培养基 (6)为最适宜 (表1),通过愈伤组织萌出不定芽的时间较侧芽长,且变异率更高,故本研究以侧芽诱导不定芽方式为主。

表1 不同外植体在不同培养基上的出芽情况

2.2 不定芽的增殖

将侧芽诱导的不定芽接种于增殖培养基 (9)-(10)中,在种苗生产过程中,9代以前以 (9)为主,分裂素6-BA的量慢慢降低,9代以后以不加激素的空白培养基 (10)为主,每隔30 d左右继代1次。结果 (表2)培养基 (9)的增殖倍数达3.83,培养基 (10)的增殖倍数为1.93。

表2 不同培养基对丛生芽增殖的影响

2.3 不定芽的生根

将增殖培养中2 cm以上的无根苗切下接种于生根培养基 (11) - (12),7 d后近基部有小根长出,30 d后生根培养基 (11)生根率最高,达100.0%(表 3)。

表3 不同培养基的生根效果

2.4 炼苗与移栽

生根培养30 d后,将试管苗炼苗1~2 d,洗净根部培养基,用1 000倍液的甲基托布津浸泡5 min后,移栽至装有泥炭土的穴盘中,把移栽苗放在温室栽培架上,移栽后浇透水,覆盖薄膜保湿,保持相对湿度90%以上,遮荫70% ~80%,7 d后掀开薄膜,增加浇水次数,保持苗床湿润,15 d后开始施肥喷药,以后每7~10 d为1周期,药剂防治以1 000倍液的甲基托布津或多菌灵喷雾,施肥以花多多2 000倍液喷施,3个月后可作为穴盘苗出售。

3 小结与讨论

侧芽最适宜的培养基为 MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,叶片、叶柄最适宜的诱导培养基为 MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1,继代增殖培养基9代以前以MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1为宜,生根培养基以 1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1为宜。

在外植体的消毒过程中,侧芽相对于用叶片、叶柄困难,在建立无菌系的过程中,用侧芽诱导不定芽相对于用叶片、叶柄诱导愈伤组织产生不定芽容易,且变异率更低。

在试验和生产的过程中发现,白掌较容易生根,省去生根培养阶段,把增殖阶段的有根苗直接移栽,可以大大的降低生产成本,但未经过生根培养的移栽苗,种苗的整齐度不一致,因此对污染率及种苗整齐度的控制仍然是生产过程中应把握的重点。

[1]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术 [M].北京:中国林业出版社,2000:84-141.

[2]余亚白,陈源,赖呈纯,等.室内空气净化植物的研究与利用现状及应用前景 [J].福建农业学报,2006,21(4):425-429.

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