噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性研究

王庆 徐东芳

（安徽省结核病防治研究所 合肥 230022）

耐多药结核病（MDR－TB）是新世纪结核病控制面临的严峻挑战之一［1]。对于耐多药的治疗需通过药物敏感性实验选择有效的药物，氟喹诺酮类药物包括氧氟沙星（Ofloxacin，OFX）因其良好的抗结核活性，成为目前治疗耐药结核病广泛应用的二线药物之一［2]。但常规耐药性检测方法时间太久，严重滞后临床治疗的需要。因此，快速准确的氧氟沙星耐药性检测技术对临床治疗及控制结核病具有重要的意义。噬菌体生物扩增法（phage amplified biologically assay，PhaB）是一种新型的表型技术，可快速诊断结核病和结核的药物敏感性，一般不超过4d就得知药敏结果，本文应用噬菌体生物扩增法对205株结核分枝杆菌氧氟沙星的耐药性检测，并与常规使用的绝对浓度法药敏结果进行比较，对不一致菌株进行WHO推荐的比例法测定，以评价PhaB检测结果的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值。现将结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 噬菌体及其检测试剂 均为上海市肺科医院结核病重点实验室惠赠，具体见文献［3] 。

1.1.2 药物及其浓度 OFX药粉购自Sigma公司，用0.4%NaOH溶解后，再用无菌蒸馏水配制为1mg／ml，－20℃保存，PhaB法应用时稀释至16μg／ml。

1.1.3.试 菌 株 H37Rv 标 准 菌 株 （ATCC 95054）购自中国疾病预防控制中心结核病防治临床中心国家菌种保藏中心，205株MTB临床分离株均为本实验室库存菌株，全部来自我院确诊的肺结核患者的痰标本培养物，并经常规生化反应鉴定为MTB。检测前，将待检菌株转种至改良罗氏培养基37℃培养2～3周。……