敦化人参各部位皂苷组分的比较

常 建 涛， 富 瑶 瑶， 吴 迪， 鱼 红 闪， 金 凤 燮

( 1.大连工业大学 生物工程学院， 辽宁 大连 116034;2.大连生生绿谷生物工程有限公司， 辽宁 大连 116023 )

0 引 言

人参具有大补元气、生津安神的作用，同时对多种疾病具有良好的防治效果及对人身的滋补强健作用[1-2]。人参主要有效成分是人参皂苷。人们已经从人参属植物中分离提取出40多种人参皂苷单体[3]。20世纪90年代初，我国学者在国内外研究的基础上，对人参地上部分及地下部分的皂苷成分进行了分离鉴定[4]，但对人参不同部位皂苷含量及组成的研究较少。本研究对产自吉林敦化的四年生白参参头(距离顶端1 cm)、主根及须根部位人参皂苷组成及含量进行了比较，以期为利用人参各部位生产人参皂苷提供科学的依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

材料：人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、F2、C-K标准品，大连工业大学天然活性物质生物转化研究中心提供；敦化人参，吉林省敦化市长白县产四年白参；甲醇、乙腈，色谱纯。

仪器：超声波发生器，昆山市超声仪器有限公司；高效液相色谱分析仪，Waters 2695 Separations Module；检测器，Waters 2996 Potodiode Array Detector；色谱柱，C-18 Hypersil ODS2 5 μm (4.6 mm×250 mm)。

1.2 方 法

1.2.1 人参选择与预处理

取头根须俱全敦化四年生白参4只，按主根、参头、须根(支根及不定根)将其切成三部分，碾成细粉，待用。取人参主根、参头、须根粉末各3 g，滤纸包好后分别放入烧杯中加石油醚没过纸包，浸泡1 h，脱去人参中的脂溶性成分，反复3次，取出纸包，风干。

1.2.2 甲醇法提取人参皂苷

以甲醇为提取溶剂，采用超声波萃取法对人参各部位皂苷进行提取。脱脂后的参粉中分别加入20 mL甲醇(分析纯)，超声振荡4次，每次30 min，合并4次皂苷提取液，放入通风橱中蒸干。将风干样品溶解于20 mL去离子水中，向其中加入20 mL水饱和正丁醇萃取人参皂苷，收集正丁醇相，反复萃取3次。合并3次正丁醇相，置于通风橱中风干。取甲醇(色谱纯)将样品定容为10 mL，获得人参皂苷样品溶液。

1.2.3 薄层层析法(TLC)分析

微量点样器吸取人参皂苷标准品及样品，点样于薄层层析板上。依照样品浓度确定点样量，每次点样均需风干再进行下一次点样。展开剂为氯仿-甲醇-水[V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水)=7∶3∶0.5]。显色剂10% H2SO4水溶液，加热显色。

1.2.4 高效液相色谱法(HPLC)分析

采用Waters分离及检测系统对人参皂苷标准品及样品分析。检测波长，203 nm；进样量，10 μL；体积流量，1 mL/min；柱温，35 ℃。

流动相由乙腈和水组成。梯度洗脱程序为0～20 min，乙腈体积分数为20%；21～30 min，乙腈体积分数由20%增至32%；31～40 min，乙腈体积分数由32%增至43%；41～70 min，乙腈体积分数由43%增至100%。

2 结果与讨论

为得到敦化产四年白参各部位皂苷，研究其各部位皂苷组成及含量的差异，取人参主根、参头、须根称重后，经石油醚脱脂、甲醇超声波萃取提取皂苷，采用TLC和HPLC进行检测。

2.1 薄层层析检测

敦化人参主根、参头、须根部位皂苷经TLC检测，结果如图1所示。由图1可知，在点样量相同的条件下，参头部位的颜色明显比须根和主根部位深，主根的显色最浅，说明在敦化人参中，参头部位的皂苷含量最高，其次是须根，而主根的皂苷含量最低。对照人参皂苷标准品可以看出，敦化人参中含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1，而未检测出人参稀有皂苷C-K、Rh2、Rg2、Rg3，由此推断敦化人参中不含有稀有皂苷。

2.2 高效液相色谱检测

将人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、F2、C-K 11种标准品作为对照进行HPLC分析，各对照品在HPLC上的保留时间见表1。人参参头、主根、根须各部位皂苷经HPLC检测，结果如图2～4所示。

表1 人参皂苷标准品HPLC检测结果

图2 敦化人参参头部位皂苷组成

Fig.2 Ginsenosides of rhizome from Dunhua ginseng on HPLC

图3 敦化人参主根部位皂苷组成

Fig.3 Ginsenosides of root from Dunhua ginseng on HPLC

图4 敦化人参须根部位皂苷组成

Fig.4 Ginsenosides of fiber from Dunhua ginseng on HPLC

与人参皂苷标准品保留时间对比可知，敦化白参参头、主根、须根样品溶液中主要含有人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等成分。按色谱峰面积进行各种皂苷含量的计算，结果见表2。

表2 敦化人参不同部位人参皂苷质量分数

Tab.2 The content of ginsenosides in different parts of Dunhua ginseng

人参皂苷w(皂苷)/%参头主根须根Rg10.0460.0110.015Re0.1900.0060.055Rf0.0340.0060.019Rb10.2200.0250.091Rc0.1500.0120.072Rb20.1000.0070.039Rd0.0410.0010.017

通过计算可以看出，敦化人参参头、主根、须根各部位皂苷组成区别不大，均含有原人参二醇型皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd和原人参三醇型皂苷Rg1、Re、Rf。其中参头部分各种皂苷的含量都很高，其次是须根，最后是主根。总皂苷质量分数分别为参头0.781%，须根0.308%，主根0.068%。敦化人参各部分中，参头部分总皂苷的含量最高，其中Rb1(0.22%)、Re(0.19%)、Rc(0.15%)含量较高，Rf(0.034%)含量最低；人参主根部分中Rb1、Rg1在皂苷总量中所占比例最高，分别为Rb10.025%、Rg10.011%，Rd比例最低为0.0013%；人参须根部分中Rb1、Rc含量较高，分别为Rb10.091%，Rc 0.072%，Rg1含量最低，为0.015%。在色谱图上几乎找不到C-K、Rh2、Rg3等人参稀有皂苷的色谱峰。

3 结 论

敦化人参不同部位皂苷组成区别不大，各部位中均含有原人参二醇型皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rd和原人参三醇型皂苷Rg1、Re、Rf，而未检测出人参稀有皂苷C-K、Rh2、Rg2、Rg3，由此推测敦化人参样品中不含有或仅是痕量含有稀有皂苷。薄层层析和高效液相色谱检测发现，敦化人参参头部位皂苷含量最高，须根次之，主根最低。总皂苷质量分数分别为参头0.781%，须根0.308%，主根0.068%。

[1] YU Hongshan, ZHANG Chunzhi, LU Mingchun, et al. Purification and characterization of gypenoside-α-L-rhamnosidase hydrolyzing gypenoside-5 into ginsenoside Rd[J]. Process Biochemistry, 2004, 39:861-867.

[2] YU Hongshan, ZHANG Chunzhi, LU Mingchun, et al. Purification and characterization of new special ginsenosidase hydrolyzing multi-glycisides of protopanaxadiol ginsenosides, ginsenosidase type I[J]. Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 2007, 55(2):231-235.

[3] 孙芳,吴迪,付绍平,等. 移山参、圆参各部位中皂苷组成和比例的研究[J]. 大连轻工业学院学报, 2007, 26(2):97-100.

(SUN Fang, WU Di, FU Shao-ping, et al. Distribution of saponin in ginseng and wild ginseng[J]. Journal of Dalian Institute of Light Industry, 2007, 26(2): 97-100.)

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