胰腺癌患者血浆miR-155检测及其诊断价值

刘建强 高军 李兆申 任艳 王小玮 王卫卫 路华

·论著·

胰腺癌患者血浆miR-155检测及其诊断价值

刘建强 高军 李兆申 任艳 王小玮 王卫卫 路华

目的检测胰腺癌患者血浆miR-155表达量，评价其对胰腺癌的诊断价值。方法收集62例胰腺癌、61例慢性胰腺炎(CP)及36例正常对照者的血标本，抽提血浆RNA，应用实时PCR检测miR-155表达量，并分析其与胰腺癌临床参数的关系。应用接受者操作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价血浆miR-155表达量对胰腺癌的诊断价值。结果胰腺癌、CP和正常对照组的血浆miR-155表达量分别为5.41±3.14、2.59±2.49和0.77±1.17，胰腺癌血浆miR-155表达量显著高于CP及正常对照组(P<0.01 )。胰腺癌血浆miR-155表达量与患者年龄、性别、肿瘤大小等均无显著相关性，而与肿瘤TNM分期呈显著负相关(r=-0.323，P=0.01)。经ROC分析，胰腺癌对正常对照组的AUC为0.943(95%CI0.902～0.985)，敏感性和特异性分别为87.1%和83.3%；胰腺癌对CP的AUC为0.762(95%CI0.678～0.846)，敏感性和特异性分别为64.5%和73.8%；胰腺癌对正常对照组+CP组的AUC为0.829(95%CI0.767～0.892)，敏感性和特异性分别为62.9%和84.5%。结论胰腺癌患者血浆miR-155表达量显著升高，对胰腺癌的诊断可能有一定的应用价值。

胰腺肿瘤； 微RNA； 诊断

血清CA19-9对胰腺癌的诊断敏感性为70%～80%[1]，而特异性不到50%[2]，这就需要发现新的胰腺癌肿瘤标志物。众多研究结果表明，microRNA(miRNA)与肿瘤的发病及预后相关，其中miR-155在胰腺癌组织中显著高表达[3]。本研究检测胰腺癌患者血浆miR-155表达量，评价其对胰腺癌的诊断价值。

资料和方法

一、临床资料

收集2008年1月至2009年12月第二军医大学附属长海医院收治的62例胰腺癌患者和61例慢性胰腺炎(CP)患者的血浆标本。所有胰腺癌患者均经手术及病理证实。CP患者通过影像学诊断，并随访半年以上无肿瘤发生者。以36例年龄匹配、无任何肿瘤病史的健康体检者作为正常对照组。

二、血浆miR-155检测

采集2 ml外周静脉血，置EDTA试管抗凝，4℃离心取上层血浆至1.5 ml Eppendorf管， 4℃ 12 000 g离心10 min后置-80℃保存。取200 μl血浆，加入5 μl作为内参的50 pmol/L的线虫miR-39(Qiagen公司)，再加入20 μl 5 mol/L醋酸和750 μl TRI Regent BD(Molecular Research Center)，按TRI Regent BD说明书抽提RNA。取2 μl RNA用TaqMan MicroRNA 逆转录试剂盒(Applied Biosystems公司)获取cDNA，反应条件：16℃ 30 min，42℃ 30 min，85℃ 5 min，4℃ 维持。取2 μl cDNA作为模板，用TaqMan Universal Master Mix Ⅱ试剂盒进行实时 PCR，miR-155和miR-39探针为TaqMan公司提供。……