丙戊酸钠对人胰腺癌细胞PaTu8988增殖的影响及量效关系研究

高飞 徐岷 麻树人 张宁 蒋小猛 徐萍

·论著·

丙戊酸钠对人胰腺癌细胞PaTu8988增殖的影响及量效关系研究

高飞 徐岷 麻树人 张宁 蒋小猛 徐萍

目的探讨丙戊酸钠(VPA)对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响。方法应用0.2、1.0、5.0 mmol/L的VPA干预人胰腺癌PaTu8988细胞24、48 h，采用WST-8法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞周期。以培养基中单加二甲基亚砜为空白对照组，单加PBS为PBS组。结果VPA干预24 h后，VPA 5.0 mmol/L组的细胞生长抑制率为18.9%，显著高于对照组、PBS组及VPA 0.2、1.0 mmol/L组(0、4.4%、6.8%、6.1%，P值均<0.05)；干预48 h后，VPA 1.0、5.0 mmol/L组的细胞生长抑制率分别为12.9%、25.9%，显著高于对照组、PBS组、VPA 0.2 mmol/L组(0、6.2%、4.6%，P值均<0.01)。VPA干预24 h后，VPA 1.0、5.0 mmol/L组G2期细胞比例分别为(26.57±1.88)%、(34.11±4.74)%，显著高于PBS组、对照组、VPA 0.2 mmol/L组[(10.72±2.02)%、(13.53±2.28)%、(13.81±2.40)%，P值均<0.01]；VPA干预48 h后的细胞周期变化与24 h一致。结论VPA呈时间及剂量依赖性抑制人胰腺癌PaTu8988细胞的增殖，诱导细胞阻滞在G2期。

胰腺肿瘤； 丙戊酸钠； 乙酰化作用； 细胞增殖； 细胞周期

组蛋白乙酰化在哺乳动物发育及肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用。核小体组蛋白的乙酰化状态由组蛋白乙酰化酶(histone acetyl transferase, HAT)与组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)活性的平衡所控制，这种平衡的打破成为产生某些癌症的直接诱因。丙戊酸钠(valproic acid，VPA)是一种广谱抗癫痫药物。新近研究显示，VPA也是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor，HDACI)，可诱导多种肿瘤细胞分化与凋亡[1]。它对胰腺癌细胞的作用国内尚未见报道。本研究观察VPA对人胰腺癌细胞PaTu8988增殖及细胞周期的影响，探讨其机制。

材料和方法

一、细胞培养及分组

人胰腺癌PaTu8988细胞系由德国Marburg市Philipps大学细胞生物学和分子病理学研究所Elsasser博士惠赠。收集对数生长期PaTu8988细胞，按1×104个/孔接种于96孔板。分为对照组、PBS组及VPA 0.2、1.0、5.0 mmol/L组。对照组细胞培养基中仅加入等容积二甲基亚砜，PBS组细胞培养基中仅加PBS。每组3个复孔。培养48、72 h。

二、细胞存活率检测

按上述分组培养细胞48、72 h后，每孔加入10 μl WST-8试剂(日本株式会社同仁化学研究所)，再培养4 h。……